超声引导下细针穿刺联合CK19、Ki-67检测在甲状腺乳头状癌中的应用价值分析

任利中

作者单位： 312400浙江省嵊州，嵊州市人民医院

甲状腺乳头状癌（PTC）是最为常见的甲状腺恶性肿瘤之一，约占甲状腺恶性肿瘤的80%，临床通常依据其细胞核核沟、核内含体及毛玻璃样核等形态学结构进行诊断。但由于某些甲状腺良性病变也伴有细胞核形态学的变化，PTC的临床诊断相对困难[1-2]。近年来，随着彩色多普勒超声和细针穿刺细胞学检查在甲状腺结节诊断中的广泛应用，超声引导下细针穿刺（US-FNA）在PTC中的优势日益凸显[3]。本研究分析US-FNA联合CK19、Ki-67检测在PTC中的应用价值，旨在为PTC患者的临床治疗提供参考。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取浙江省嵊州市人民医院2015年6月至2017年5月诊断且符合纳入标准（患者近1个月内均未接受放、化疗治疗，临床资料完整）的70例疑似PTC患者为研究对象，并已排除存在其他部位肿瘤或严重心、肝、肾等主要脏器疾病者。其中男31例，女39例；平均年龄（39.47±4.98）岁，甲状腺肿块直径（1.36±0.25）cm。本研究经本院医学伦理委员会批准通过，所有患者均自愿参与且签署知情同意书。

1.2 检测方法

1.2.1 US-FNA细胞形态学检测 所有患者均采用LOGIQE9超声诊断仪进行检测，探头类型为线阵探头，频率为9.0～15.0 MHz，患者取仰卧位，头部后仰，充分暴露颈部，常规检查甲状腺峡部及双叶，重点记录甲状腺纵横比、边界、数目、肿块回声及内部血流。超声确认位置后进行可疑结节穿刺。常规铺巾消毒，利多卡因行全身麻醉，超声引导下以23 GPTG穿刺针穿刺甲状腺结节，多方位穿刺15～30次，当组织难以取出时，可增加负压抽吸，抽取部分样本，制作1～3张涂片，并用95%乙醇固定，HE常规染色，光镜下行细胞形态学检查。根据细胞染色结果，由2名具有5年以上工作经验的病理科医生进行独立判断，意见相左时应协商取得一致。

1.2.2 细胞角蛋白（19CK19）、Ki-67检测 手术切取患者的肿瘤组织，采用免疫组化法，检测CK19、Ki-67蛋白表达，采用PBS代替一抗作空白对照，CK19、Ki-67均为即用型抗体（福州迈新生物技术开发有限公司），其他操作均按说明书要求严格进行。CK19的检测标准：细胞膜出现棕黄色着色的细胞数＞10%，即为阳性；＜10%，为阴性；Ki-67的检测标准：细胞核出现棕黄色着色的细胞数＞1%，即为阳性，＜1%为阴性。

1.3 统计方法 采用SPSS20.0统计软件进行统计分析，计数资料采用x2检验进行比较。采用ROC曲线下面积（AUC）评价各检测方法对PTC的诊断价值，当0.5＜AUC＜0.7时，表示诊断价值较低；当0.7≤AUC＜0.9时，表示诊断价值中等；当AUC≥0.9时，表示诊断价值较高。一致性采用 Kappa检验进行分析，当Kappa值≤0.45时，表示一致性差；当Kappa值在0.45～0.75，表示一致性好；当Kappa值≥0.75时，表示一致性非常好。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病理学诊断结果 70例PTC患者中，42例患者为恶性肿瘤，28例患者为良性肿瘤。

2.2 各检测方法诊断结果

2.2.1 US-FNA检测结果与病理学结果比较 US-FNA检测显示，恶性肿瘤41例，其中33例与病理学结果相符；良性肿瘤29例，其中20例与病理学诊断相符。与病理学结果比较，US-FNA检测阳性预测值为0.805（33/41），阴性预测值为 0.690（20/29），灵敏度为 0.786（33/42），特异度为0.714（20/28），准确度为0.757，一致性检验Kappa值为0.497。见表1。

2.2.2 CK19检测结果与病理学结果比较 CK19检测结果为（11.13±2.35）%，其中，恶性肿瘤45例，32例与病理学结果相符；良性肿瘤25例，15例与病理学结果相符。与病理学结果比较，CK19检测阳性预测值为0.711（32/45），阴性预测值为0.600（15/25），灵敏度为0.762（32/42），特异度为0.536（15/28），准确度为0.671，一致性检验Kappa值为0.303，见表2。

2.2.3 Ki-67检测结果与病理学结果比较 Ki-67检测结果为（1.11±0.22）%，其中，恶性肿瘤41例，32例与病理学结果相符；良性肿瘤29例，19例与病理学结果相符。与病理学结果比较，Ki-67检测阳性预测值为0.780（32/41），阴性预测值为 0.655（19/29），灵敏度为 0.762（32/42），特异度为0.679（19/28），准确度为0.729，一致性检验Kappa值为0.438，见表3。

2.3 ROC曲线 以病理学诊断结果为状态变量，分别以 US-FNA、CK19、Ki-67检测的细胞染色结果及 US-FNA联合CK19、Ki-67检测的拟合度为检验变量，做ROC曲线，结果显示，US-FNA联合CK19、Ki-67检测PTC的AUC值同US-FNA检测、CK19检测及Ki-67检测相比，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表 4、封四彩图 3。

任利中.超声引导下细针穿刺联合CK19、Ki-67检测在甲状腺乳头状癌中的应用价值分析（见正文第1632页）

图3 各检测方法诊断PTC的曲线

3 讨论

PTC是一种起源于甲状腺滤泡上皮的高分化、低恶性肿瘤，为临床最常见的甲状腺恶性肿瘤。PTC预后较好，若能及时确诊并施以有效治疗，患者甚至可达到治愈的效果。近年来，有研究表明[4]，甲状腺结节的检出率约为70%，而乳头状癌的检出率仅占其5%左右，极低的检出率阻碍了患者治疗，影响患者预后。因此，早期的确诊对改善PTC患者临床症状有重要意义。

表1 US-FNA检测结果与病理学结果比较 例

表2 CK19检测结果与病理学结果比较例

表3 Ki-67检测结果与病理学结果比较 例

表4 各检测方法诊断PTC的曲线结果

表4 各检测方法诊断PTC的曲线结果

方法95%US-FNA检测 0.750 0.0620 0.632～0.846 CK19检测 0.688 0.0662 0.566～0.793 Ki-67检测 0.724 0.0608 0.604～0.824 US-FNA联合CK19、Ki-67检测 0.858 0.0450 0.754～0.930

近年来，临床常用CK19和Ki-67检测对PTC患者进行诊断。CK19是最常见的细胞角蛋白类型之一，常用于甲状腺、胰腺及肺等部位肿瘤的病理学诊断，其在PTC组织中多呈强阳性表达，对于恶性肿瘤的诊断有较高的敏感性；Ki-67作为一种与细胞周期相关的增生细胞抗原，仅存在于周期性细胞的细胞核内，可准确反应细胞增殖活性[5]，多数恶性肿瘤中均存在Ki-67的过度表达；但本研究发现，CK19与 Ki-67检测的一致性较差，影响了二者的临床应用价值。本研究采用US-FNA对患者进行诊断发现，US-FNA检测对PTC患者的诊断有较好的一致性，且 US-FNA联合 CK19、Ki-67检测 PTC的 AUC值高于 USFNA、CK19及Ki-67检测。

US-FNA是在指在超声仪器的实时监控引导下对活体组织进行穿刺，以取得细胞和病理组织的诊断方法。超声具有精准、无创及高效等优点，其可通过不同超声特征直接反应患者的肿瘤发生情况，预测恶性肿瘤存在风险，将超声分为超声高度、中度、低度和极低度怀疑及良性，并给出相应的恶性概率；US-FNA可通过超声精准定位、负压抽吸及多方位取材等方法，提高对微小病变的穿刺精准度，从而提高US-FNA的成功率，加强了对直径＜1 cm肿瘤的检出率。何坚沃等[6]的研究表明US-FNA检测对PTC的检出率高达90%，与本研究结果相近，但US-FNA检查其尚不能识别包膜、血管浸润等病理学组织，通过免疫组化法检测CK19和Ki-67水平可较好地弥补这一不足。因此，采用 US-FNA联合CK19、Ki-67检测PTC具有较高的临床应用价值。

综上所述，US-FNA联合 CK19、Ki-67检测对PTC的诊断有较好的诊断价值，能够为PTC患者的确诊提供参考，临床应用价值高。