医学实验室不同检测人员检测结果的可比性探讨

卢红玉 董家书*

（1 南宁市第六人民医院检验科，广西 南宁 530003；2 广西医科大学第四附属医院检验科，广西 柳州 545005）

实验室人员可比性试验是按照预先规定的条件，由两个或多个检验人员对相同的试验样品进行检测，识别实验室检验人员存在的问题与确定实验室检验人员能力。是判断和监控实验室检验人员能力的有效手段之一。特别是新入职人员，可用比对试验的结果来监测培训的效果，决定是否予以相应的授权。人员比对也是人员能力评估的一项重要的评估内容。为了评价人员间检测结果的可比性，需对人员检测结果进行可比性实验，也是CNAS-CL02《医学实验室质量和能力认可准则》的要求[1]，也是国家认可委评审专家进入现场评审时，现场实验内容中的一部分。由此可见，人员检测结果比对是一项重要的实验室活动。现将本实验室部分可比性试验，按专业叙述如下。

1 人员比对项目

1.1 临床基础检验专业：新鲜血液细胞学涂片分类计数；新鲜尿液有形成分显微镜检查；形态学显微摄像照片考核；女性分泌物显微镜检查；血小板手工计数。

1.2 临床免疫学检验专业：同一项目2人以上操作的比对。

1.3 临床微生物学检验专业：新鲜临床标本涂片显微镜检查比对；抑菌圈测量；细菌分离鉴定。

1.4 基因诊断（PCR）实验室：每年至少比对1次。定性项目检测人员比对；定量项目检测人员比对。

2 人员比对标本的选取、比对流程和判断标准

2.1 临床基础检验

2.1.1 血液细胞学涂片：每6个月选取5份血液细胞分析新鲜标本，要求含中性杆状粒细胞、中性分叶核粒细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞、淋巴细胞、单核细胞、异型淋巴细胞，其中1份含有晚幼红细胞，另1份含少量未成熟白细胞。由3名有经验人员分类，取均值作为靶值，将每人结果与靶值进行比较[2-3]，结果在WS/T246-2005[4]《白细胞分类计数参考方法》附录B范围内为合格。各类细胞5份有4份合格为通过。

2.1.2 尿液有形成分：每6个月用5份新鲜尿液标本各10 mL，用标准离心管按1000转/分离心5 min，弃去上层，留取管底0.2 mL作为人员比对材料。各自涂片并盖上要求规格的盖玻片[5]镜检，各自报告镜检结果。以1名实验室最有经验者的结果为标准，其他人员结果分别与其比较，结果阳性不能为阴性，阴性不能为阳性，阳性在1个量级内为符合，符合率≥80%[6]为合格。

2.1.3 形态学显微照片：每6个月由组长挑选室间质评或电子图谱等的寄生虫/尿沉渣/血液细胞电子图片各15张，参比人员独立判断箭头所指物质或细胞名称，填入答题卡上交组长。判断标准：寄生虫/尿沉渣/血液细胞图片与正确结果相符≥80%[7]为通过。

2.1.4 血小板（PLT）手工计数人员比对：每6个月由组长随机选取仪器检测后的患者新鲜标本5份（要求PLT直方图峰正常、PLT结果后无标记），另用血常规标本采集管换装（对于参加比对的人员来说为盲样）。由操作人员从标本稀释开始到结果报告独立完成。与仪器结果比较，相对偏差≤15%[8]或绝对偏差≤20×109/L为合格。5份有4份满足要求为比对通过。

2.1.5 女性分泌物显微镜检查比对：每6个月用5份女性分泌物标本进行比对，标本要求新鲜采集。比对人员各自涂片镜检，记录结果，与1名经验丰富者检测的结果为参照。霉菌、滴虫、线索细胞、革兰阴性双球菌的检测结果阳性不能出现阴性，阴性不能出现阳性，清洁度、白细胞、上皮细胞可上下1个计量级。符合率≥80%为合格。

2.2 临床免疫学检验：每半年选取2份阴性临床标本（其中1份其他标志物最好阳性）和3份阳性临床标本，以及试剂盒阴阳性对照、空白、弱阳性质控物同时检测，阴阳性检测符合率≥80%为合格[9]。

2.3 临床微生物检验

2.3.1 抑菌圈测量[10]：从分离培养18～24 h的血平板上，挑选单个菌落直接在无菌管中用无菌生理盐水制成接种物，将浊度调整为0.5麦氏单位浓度，接种物在15 min内接种MH平板。用无菌棉签蘸取菌液在管内壁上方旋转挤压，将多余菌液挤去，在平板上均匀涂布，最后用棉签涂布平板四周边缘1圈，静置3～5 min，将纸片分片器置于培养皿上，平稳而全面按下柱塞并释放纸片，检查纸片是否贴稳。将贴好纸片的平板置35 ℃培养箱孵育16～18 h。每位工作人员用游标卡尺测量药敏试验的抑菌圈直径，每个抑菌圈测量3次，记录结果。所得数据采用方差分析，如结果显示差异有统计学意义，则用t检验分析。判断：直径差异无统计学意义。

2.3.2 显微镜形态学检查人员比对[11]：选取一般细菌、抗酸杆菌和真菌检查的临床涂片标本各5份，进行涂片染色镜检。比较工作人员间的符合率，符合率≥80%为合格。

2.3.3 培养结果判读和结果报告比对：选取5份临床培养标本，不同工作人员对标本培养结果进行判读和报告，人员间5份有4份结果一致为满足要求。

2.4 PCR实验室

2.4.1 定性项目：选取3份阳性（低、中、高各1份）和2份阴性标本，进行提取DNA和上样扩增，严格按相应项目的SOP操作。阴阳相符为比对通过。

2.4.2 定量项目：选取3份阳性（低、中、高各1份）和2份阴性标本，进行提取DNA和上样扩增，严格按相应的SOP操作。比对人员与参比人员比，至少有4份样本的偏倚≤7.5%。

3 人员比对意义

3.1 质量改进：实施人员比对，能发现影响结果可比性的一些关键因素。如PLT人工计数冲池后的静置时间不足、非PLT颗粒的区分有的未掌握；形态学基础差[12]、平时培训又不足；人员操作未严格按规定程序进行；所用设备未经校准；耗材质量欠佳等。总之，认真分析比对过程中的每一个环节，找出影响结果的关键点，采取有效的措施进行控制，从而提高检测结果质量，实现人员间检测结果的可比性。

3.2 实验室认可必备：现场评审时，实验室需提供人员比对资料，还需进行现场人员比对实验，提供原始数据和比对结果、结论。这样，平时的比对相当于现场比对的演练。通过比对，发现问题，解决问题，进而在平时工作中少出问题，现场实验时有底气。

4 总 结

人员检测结果的可比性，是实验室质量要求。具体如何实施，对于一些实验室来说有些迷惘，需要考虑比对哪些项目，标本选取要求，比对周期，判断标准等。本实验室在经历了ISO15189实验室认可的3次现场评审，积累了一定的经验，比对流程也经历了一定的完善。人员比对，能发现人员存在的问题，流程存在的问题，仪器设备、耗材存在的问题，针对问题采取改进措施和有效手段进行控制，达到提升检测结果质量的目的。