复方中药组分对链脲菌素糖尿病大鼠心肌过氧化的影响

黄 波，杨 鑫，刘永林，冯 瑶，吴晓岚，谢 剑，张 何，宋光熠，刘文艳

（辽宁医药职业学院，沈阳 110101）

心脏是糖尿病常累及的脏器之一[1]，其发生发展是多种因素综合作用所致，病因的复杂性使其缺乏有效的治疗药物。目前中药及其有效组分对糖尿病及其并发症的防治作用越来越受到关注，本实验研究旨在证实复方中药组分防治糖尿病及糖尿病心脏病的有效性以及探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料 8周龄SPF级SD种系大鼠（适应性饲养一周），体重190～210 g、繁育鼠全价固体颗粒饲料，均由辽宁省长生生物技术有限公司提供（实验动物许可证为辽宁省科学技术厅签发，许可证号：SCXK（辽）2010-0010）。链脲菌素（Streptozotocin）是Adamas Reagent CO.Ltd产品（货号：CFHF-33231A；批号：644548120509；规格：25 g；95+）。黄芪、麦冬、三七皂苷等中药多糖由北京普惠天悦生物技术有限公司提供。SOD、CAT、MDA等测定试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。酶标仪（型号318C）为上海三科仪器有限公司产品。分光光度计（型号SPECORD plus200）为德国耶拿分析仪器股份公司产品。

1.2 方法 应用pH值为5.0、浓度为0.01 mol/L柠檬酸缓冲液配制浓度为12.2 mg/mL的链脲菌素，然后以55 mg/Kg体重的标准对大鼠进行一次性腹腔注射，1周后检测其空腹血糖，取血糖水平超过16.0 mmol/L的大鼠为合格大鼠，继续实验，将其随机分为模型组和中药组分干预组，中药组分干预组又分为2组（大剂量干预组、小剂量干预组），3组大鼠均为8只，雌雄各半。中药干预组的大、小剂量组大鼠每天分别灌胃复方中药组分500 mg/kg体重、50 mg/kg体重；模型对照组大鼠每天灌胃生理盐水，3组灌胃量均为1 mL/100 g体重。另取大鼠8只（雌雄各半）作为正常对照组（空白对照组），应用0.01 mol/L柠檬酸缓冲液（pH 5.0）与注射链尿菌素同样标准对该组每只大鼠一次性腹腔注射，且每天以另外三组同样标准灌胃生理盐水。各组大鼠连续给药12周后断头采血检测SOD、CAT、MDA；取心脏，10%组织匀浆后，3 000 r/min离心15 min，取上清液检测SOD、CAT和MDA。指标检测按照试剂盒说明书进行操作。

2 结果

2.1 心脏SOD、CAT、MDA的变化 连续给药12周后链脲菌素糖尿病模型对照组心肌SOD、CAT含量明显低于空白对照组，MDA活性明显高于正常对照组；复方中药组分大剂量组心肌SOD、CAT含量明显高于糖尿病模型对照组，MDA活性明显低于糖尿病模型对照组。小剂量仅对MDA有降低作用，对升高SOD和CAT活性无效。详见表1。

2.2 血浆SOD、CAT、MDA的变化 连续给药12周后各组大鼠血浆SOD、CAT、MDA的检测结果表明，糖尿病模型对照组SOD和CAT明显低于空白对照组、MDA明显高于正常对照组，复方中药组分治疗组的大鼠SOD和CAT均高于糖尿病模型对照组、MDA低于糖尿病模型对照组。详见表2。

表1 中药组分对链脲菌素糖尿病心组织SOD、CAT、MDA的影响（± s ，n = 8）

表1 中药组分对链脲菌素糖尿病心组织SOD、CAT、MDA的影响（± s ，n = 8）

注：与模型对照组比较，# P＜0.01，△ P＜0.05，▲ P＞0.05

组 别 SOD/（U/mgprot） CAT/（U/mgprot） MDA/（nmol/mgprot）空白对照组 827.1034±76.7913# 9.1470±0.9517△ 82.5464±10.8951#模型对照组 597.2921±59.0763 7.6690±0.9173 106.5263±8.0725大剂量组 711.8283±60.4303△ 11.5530±1.2178# 89.1625±8.9969#小剂量组 589.3618±58.4203▲ 7.7332±1.0373▲ 96.3440±8.9563△

表2 中药组分对链脲菌素糖尿病大鼠血浆SOD、CAT、MDA的影响（± s ，n = 8）

表2 中药组分对链脲菌素糖尿病大鼠血浆SOD、CAT、MDA的影响（± s ，n = 8）

注：与模型对照组比较，# P＜0.01，△ P＜0.05

组 别 SOD/（U/mL） CAT/（U/mL） MDA/（nmol/mL）空白对照组 174.6800±8.0981# 14.8213±1.3852# 9.2248±1.0678#模型对照组 151.1263±13.6340 8.2850±0.8591 11.3594±1.1637大剂量组 180.0088±15.3012# 9.5775±0.9209△ 9.9635±1.3636△小剂量组 173.3025±15.5913# 9.4675±0.9946△ 9.9032±1.0483△

3 讨论

糖尿病患者，尤其是2型糖尿病患者的死亡因素中，有三分之二与冠心病和中风有关。而许多糖尿病患者被诊断糖尿病时就已经患有冠心病，因而糖尿病心脏病的早期防治尤为重要[2]。

自由基代谢异常是糖尿病心肌病发生的主要病因之一[3-6]，自由基可诱导膜发生脂质过氧化反应[7]，生成MDA。MDA是脂质发生过氧化反应的终产物，具有细胞毒性，它的产生能加剧膜的损伤，破坏组织细胞，引起组织病变[8-9]，MDA的含量可反映自由基的水平和膜脂过氧化的程度[10]。正常情况下体内的SOD、CAT等酶系统具有抗氧化反应[10]。SOD是氧自由基的天敌，可对抗与阻断氧自由基引起细胞损害，且可及时修复受损伤的细胞[11-12]；CAT能催化H2O2分解成O2和H2O，阻止H2O2与O2反应生成非常有害的-OH，从而使细胞免于遭受H2O2的毒害[11,13]；糖尿病患者长期的高血糖状态，可引起细胞代谢紊乱[14]，不仅自由基生成增多，且抗氧化酶不足以清除过量生成的自由基，过量生成过氧化物，破坏细胞膜磷脂，严重者可导致生物膜溶解和细胞死亡，从而引起心肌组织严重损伤[4,15-16]。其损伤程度可通过心肌组织SOD、CAT活性和MDA含量评定，SOD和CAT水平降低、MDA升高，提示脂质过氧化作用的增强及抗氧化酶的活性降低。所以，糖尿病大鼠自由基代谢异常对糖尿病心血管并发症起到重要作用[4,17]。

本项实验研究表明由黄芪、麦冬、三七皂苷等中药多糖组成的复方制剂对链脲菌素糖尿病大鼠的心脏有保护作用，其作用机制与升高SOD、CAT水平、降低MDA，抑制脂质过氧化反应密切相关。其中大剂量作用较强，小剂量对心脏的保护作用很弱。