脑外伤合并不同程度获得性肺炎患者外周血T细胞亚群表达水平观察

杨华林,杨月丽

医院内获得性肺炎(hospital acquired pneumonia，HAP)，是指患者在住院48～72 h发生的肺部感染，在神经外科临床中，HAP具有较高的患病率及病死率，并已成为颅脑外伤(traumatic brain injury, TBI)患者住院期间主要并发症之一。新近国外文献[1-3]显示，这些HAP发生、进展显然与患者体内相关细胞免疫失衡关系密切，但迄今为止，国内专门涉及到TBI患者类似内容报告还不算多。为此，我们观察了一组近期在我院住院的TBI合并HAP患者外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)指标表达变化，并与同期住院确诊TBI但无HAP患者(TBI组)及同期参加我院体检结论健康者(对照组)的相同检测结果进行比较。

1 对象与方法

1.1 对象 连续选择2013-01至2015-06在我院神经外科住院的TBI合并HAP患者，入选标准：(1)有近期TBI史；(2)临床表现、头颅影像学检查符合TBI诊断；(3)年龄≥18岁；(4)符合1.2.1HAP确诊条件。排除条件：(1)肺结核、肺部肿瘤、非感染性肺间质性疾病、肺水肿、肺不张、肺栓塞、肺嗜酸性粒细胞浸润症及肺血管炎患者；(2)接受肿瘤放、化疗及免疫抑制药治疗患者；(3)人类免疫缺陷病毒感染(艾滋病)患者；(4)粒细胞缺乏者。符合入选标准并除外排除条件后，实际入选TBI合并HAP患者31例。另选择同期住院诊断TBI但无HAP患者24例(TBI组)，该组纳入标准符合TBI合并HAP组入选条件的(1)、(2)、(3)和(5)及全部排除条件。另有同期参加我院体检结论健康者为对照组(27例)。表1为3组对象基线参数资料比较，结果表明，3组患者的平均年龄、性别分布接近(P均>0.05)。

项目TBI合并HAP组(n=31)TBI组(n=24)对照组(n=27)年龄范围(岁)27～7624～7312～40平均年龄(岁)54.80±9.1552.69±8.2431.62±3.97男性21(67.74)13(54.17)19(70.37)女性10(32.26)11(45.83)8(29.63)

1.2 方法

1.2.1 HAP诊断标准及严重程度评估 (1)HAP诊断标准[4]：本研究选择美国感染病学会/美国胸科学会(IDSA/ATS)确立的HAP诊断标准：①新出现咳嗽、咳痰或原有呼吸道疾病症状加重，并发生脓性痰，伴或不伴胸痛；②发热；③肺实变体征和(或)闻及湿性啰音；④外周血细胞>10×109/L，和(或)<4×109/L，伴或不伴细胞核左移；⑤胸部X线影像学显示片状、斑片状浸润性或间质性改变，伴或不伴胸腔积液。TBI患者出现以上①至④中任何1项加⑤表现纳入本研究。⑵HAP严重程度评估：根据IDSA/ATS制定的相关标准[4]来评估HAP严重程度。

1.2.2 外周血T细胞亚群表达水平测定 各组入选对象均在住院后第5天进行血液标本采集，均行空腹采集静脉血8 ml，高速离心10 min后，分离血清，在超低温冰箱保存待检。T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)指标表达水平测定应用美国FC-500-MPL流式细胞仪，试剂盒由海丰翔生物科技有限公司提供，按使用说明书规定步骤进行相关操作。

2 结 果

2.1 外周血各T细胞亚群表达水平比较 3组对象外周血各T细胞亚群表达水平比较，结果表明，TBI合并HAP患者外周血CD3+、CD4+表达水平及CD4+/CD8+比值则明显低于TBI组及对照组(P均<0.05，表2)。

项目TBI合并HAP组(n=31)TBI组(n=24)对照组(n=27)CD3+52.71±5.24②63.28±5.79②70.46±7.15CD4+29.30±3.15②34.52±3.41①38.72±4.63CD8+32.66±3.6333.16±3.2232.69±3.35CD4+/CD8+0.89±0.17①0.97±0.14①1.18±0.21

注：与对照组比较：①P<0.05，②P<0.01

2.2 HAP患者外周血各T细胞亚群表达水平比较 31例TBI合并HAP患者中，重度HAP组14例(45.16%)，轻度HAP组17例(54.84%)。表3为轻及重度HAP患者外周血各T细胞亚群表达水平比较，结果表明，重度HAP组外周血CD3+、CD4+表达水平以及CD4+/CD8+比值均明显低于轻度HAP组(P均<0.05，表3)。

项目重度HAP组(n=14)轻度HAP组(n=17)CD3+49.64±4.81②54.38±5.60CD4+28.76±3.04①32.42±3.48CD8+30.21±2.9532.69±3.55CD4+/CD8+0.85±0.13①0.98±0.19

注：与轻度HAP组比较：①P<0.05，②P<0.01

3 讨 论

随着我国社会、经济迅猛发展，TBI也呈逐年增加趋势。这些患者病情严重，常常伴随意识不清，尤其会发生咳嗽反应机能减弱或消失，不能及时、有效地自主排痰；重症TBI救治过程中，气管插管及切开等侵入性手术较多，这都促使HAP患病率明显上升，并已成为TBI患者主要死亡原因之一[5，6]。现已证实，机体免疫功能紊乱或损害是TBI发生HAP重要机制之一，他们体内大都存在明确的T淋巴细胞反应性降低或无反应状态。一般认为，T淋巴细胞亚群是体内重要的细胞免疫组成部分，T淋巴细胞介导的细胞免疫扮演着核心角色，是机体免疫功能执行者及调节者。T淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+及CD8+分别代表总T淋巴细胞、辅助T淋巴细胞及抑制T淋巴细胞等3种不同单克隆抗体，各司相关职能，辅助T淋巴细胞可增强体液及细胞免疫应答功能，抑制T淋巴细胞则是抑制体液及细胞免疫发挥作用，当体内发生上述各类T淋巴细胞数量不足或作用缺失时，免疫调控失衡，导致HAP发生。

近年来，国内外学者从细胞免疫学角度对HAP病因及发病机制进行了多种分层系列研究[7，8]，但专门涉及到TBI合并HAP患者上述内容报告较少。为此，我们观察了一组近期在我院住院的TBI合并HAP患者外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)指标表达变化，并与同期住院确诊TBI但无HAP患者(TBI组)及同期参加我院体检结论健康者(对照组)的相同指标检测结果进行比较，我们发现，TBI合并HAP患者外周血CD3+、CD4+表达水平及CD4+/CD8+比值则明显低于TBI组及对照组，同时，进一步按HAP病情分层后，重度HAP患者外周血CD3+、CD4+表达水平以及CD4+/CD8+比值也显著低于轻度HAP组。上述外周血T细胞亚群变化数据与国内外一些非TBI患者发生HAP临床研究结论[9,10]一致，提示TBI合并HAP患者存在明确的外周血T细胞亚群表达异常，是后者发生可能机制之一，且随病情加重趋于显著。

鉴于TBI合并HAP患者外周血存在明确的T细胞亚群指标异常，这些表现可作为其免疫学病因诊断、设计治疗方案及评估治疗疗效的参考数据。同时，这些发现也告知我们，提高相关T细胞数量，恢复各类T细胞构成比，可成为HAP抗炎、抗内毒素治疗新途径。