不同动物中静脉的组织学结构比较*

陈 晶 李 斌 乔 璐 张洁娟 王 愚 王紫赟

(包头医学院,1 基础医学与法医学院,2 2014级临床医学本科3班,3 2016级临床医学本科1班,包头 014040)

静脉是心血管系统中引导、输送血液返回心的管道,人的中静脉管径1～10mm。静脉管壁薄,平滑肌和弹力纤维均较少,缺乏收缩性和弹性。在临床上以静脉动脉化手术方式解决断指(肢)再植和治疗肢体缺血症等方面的应用与研究已开展多年[1],因此对静脉血管结构研究具有重要意义。中静脉组织结构在不同种属间是否存在差异,相关研究较少。本研究比较了人、羊、兔、大鼠、小鼠的中静脉的血管管壁结构,并比较了各种动物的中静脉与中动脉的管壁结构。

1 材料和方法

1.1 取材

取各10只清洁级大鼠、小鼠、家兔双侧肾动、静脉,取2只羊单侧肾动、静脉,取2具人尸体标本旋髂浅静脉。

1.2 固定与包埋

将取到的标本迅速固定于10%甲醛溶液中,石蜡包埋。

1.3 染色

切片厚度6μm,一部分切片行H-E染色,一部分切片行地衣红染色,一部分切片行弹性纤维混合染色。

1.4 H-E染色

染色流程：二甲苯20min 2次,无水乙醇5min 2次,95%乙醇5min,80%乙醇5min,70%乙醇5min,自来水洗,苏木精4min,自来水洗,1%盐酸乙醇分化,自来水洗,伊红15min,70%乙醇1s,80%乙醇1s,95%乙醇2min,95%乙醇5min,无水乙醇5min 2次,二甲苯10min 2次。

1.5 地衣红染色[2-4]

地衣红染液的配制：将1g地衣红溶于99ml 70%乙醇中,然后缓缓加入1ml浓盐酸,调pH至1.1,配制后室温静置6h后滤过使用。

染色流程：二甲苯20min 2次,无水乙醇5min 2次,95%乙醇5min,80%乙醇5min,70%乙醇5min,自来水洗,地衣红2h,70%乙醇1s,80%乙醇1s,95%乙醇2min,95%乙醇5min,无水乙醇5min 2次,二甲苯10min 2次。

1.6 弹性膜复合染色

采用焦油紫、偶氮桃红、苯胺蓝等进行复合染色显示弹性膜、平滑肌、胶原纤维和基质的方法[5]。1%偶氮桃红染液的配置：2g偶氮桃红加甲醇100ml溶解,加冰乙酸10ml,用时取上清液。0.1%焦油紫溶液的配置：0.1g焦油紫溶于100ml蒸馏水,用时加10%冰乙酸17滴。1%水溶性苯胺蓝液的配置：1g水溶性苯胺蓝溶于1%磷钨酸100ml水溶液中。染色流程：二甲苯20min 2次,无水乙醇5min 2次,95%乙醇5min,80%乙醇5min,70%乙醇5min,自来水洗,蒸馏水洗2次,0.5%过碘酸溶液15min,蒸馏水洗2min,0.1%焦油紫溶液20min 60℃,蒸馏水洗,95%乙醇分色,1%偶氮桃红4min,70%乙醇分色,1%苯胺蓝溶液2min,70%乙醇1s,80%乙醇1s,95%乙醇2min,95%乙醇5min,无水乙醇5min 2次,二甲苯10min 2次。

2 结果

羊、兔、大鼠、小鼠与人的中动脉管壁都分为内膜、中膜、外膜3层，其中内、外弹性膜明显。中静脉管壁分为内膜、中膜、外膜，其中外膜厚，羊的中静脉外膜中有纵行的平滑肌束，这在人的中静脉外膜中亦可见。

图1 中动脉和中静脉H-E染色。A1：兔中静脉,×400；A2：兔中动脉,×400；B1：羊中静脉,×100；B2：羊中动脉,×100；C1：人中静脉,×200.

图2 中动脉和中静脉地衣红染色。A1：兔中静脉,×400：A2：兔中动脉,×400；B1：羊中静脉,×100；B2：羊中动脉,×100；C1：人中静脉,×200；D1：小鼠中静脉,×400；D2：小鼠中动脉,×400；E1：大鼠中动脉、中静脉,×200；E2：大鼠中动脉、中静脉,×400.

图3 中动脉和中静脉弹性膜复合染色。A1：兔中静脉,×400；A2：兔中动脉,×400；A3：兔中静脉,×1 000；A4：兔中动脉,×1 000；B1：羊中静脉,×200；B2：羊中动脉,×100.

Fig 1 Medium-sized artery and medium-sized vein by H-E staining.A1：Medium-sized vein of rabbit,×400；A2：Medium-sized artery of rabbit,×400；B1：Medium-sized vein of sheep,×100；B2：Medium-sized artery of sheep,×100；C1：Medium-sized vein of human,×200.

Fig 2 Medium-sized artery and medium-sized vein by orcein staining.A1：Medium-sized vein of rabbit,×400；A2：Medium-sized artery of rabbit,×400；B1：Medium-sized vein of sheep,×100；B2：Medium-sized artery of sheep,×100；C1：Medium-sized vein of human,×200；D1：Medium-sized vein of mouse,×400；D2：Medium-sized artery of mouse,×400；E1：Medium-sized artery and medium-sized vein of rat,×200；E2：Medium-sized artery and medium-sized vein of rat,×400.

Fig 3 Medium-sized artery and medium-sized vein by elastic composite staining.A1：Medium-sized vein of rabbit,×400； A2：Medium-sized artery of rabbit,×400；A3：Medium-sized vein of rabbit,×1 000；A4：Medium-sized artery of rabbit,×1 000；B1：Medium-sized artery of sheep,×200；B2：Medium-sized artery of sheep,×100.

H-E染色显示(图1，见封三)，兔的中静脉靠近内膜处可见一层染为粉红色、呈波浪状的结构(图1A1箭头所示)，这层结构类似中动脉内弹性膜(图1 B2所示)；在兔中静脉中膜与外膜交界处有多层波浪状、断断续续染为粉红色的结构(图1A1▲所示)，类似中动脉的外弹性膜的结构(图1A2所示)。

地衣红是一种弱酸性染色剂，在酸性溶液中呈深橙红色，且地衣红易溶于乙醇，参照范军等[3-4]的方法，采用酸化的地衣红乙醇溶液进行染色，显示弹性膜。结果显示(图2，见封三)，地衣红染色显示在兔肾静脉中靠近内膜处可见染为棕色一层波浪状的类似内弹性膜的结构(图2A1箭头所示)，在中膜与外膜交界处有多层断断续续、波浪状的染为棕色的类似外弹性膜的结构(图2A1▲所示)，并且这种结构不如中动脉中内、外弹性膜发达；而在人、羊、大鼠、小鼠的中静脉中均无此结构。

弹性膜复合染色可将平滑肌染为红色、胶原纤维染为紫红色、基质呈蓝色，内、外弹性膜呈波浪状无色透明(图3，见封三)。其中中动脉的内弹性膜如图3A4所示，外弹性膜如图3A4、B2所示，呈无色透明波浪状，在兔的中静脉中亦可见此类似结构，如图3A1、A3所示(箭头处表示类似内弹性膜结构，▲表示类似外弹性膜结构)，而在人、羊、大鼠、小鼠的中静脉中均无此结构。

3 讨论

本研究利用H-E染色、地衣红染色和弹性膜复合染色法对几种动物和人的血管组织切片进行染色。结果显示,兔血管中静脉组织结构与人、大鼠、小鼠、羊有差异,有类似中动脉内、外弹性膜结构。国内外尚未见到相关报道。

弹性膜由弹性蛋白组成,在血管横切面上,因血管管壁收缩,弹性膜呈波浪状。人的中动脉有明显的内弹性膜,1～2层,为内膜与中膜的分界;较大的中动脉在中膜和外膜交界处有外弹性膜,为多层,呈断断续续。人的中静脉无内、外弹性膜,外膜较中膜厚,由结缔组织构成,可含纵行平滑肌纤维束。动物血管结构与人血管结构相似,本研究对小鼠、大鼠、兔、羊的中动脉和中静脉进行石蜡切片,其管壁均分为内膜、中膜、外膜3层,在中动脉管壁中都存在明显的内、外弹性膜。但对静脉的研究显示,兔的中静脉管壁结构略有不同,经过H-E染色、地衣红染色和弹性膜复合染色,均可见在内膜处有1层波浪状的类似弹性膜的结构,在中膜、外膜交界处可见呈多层断断续续、波浪状的类似外弹性膜的结构。

王媛媛等[6]对猕猴、小鼠、大鼠、日本大耳白兔、比格犬、树鼩6种实验动物大动脉血管结构进行研究,显示6种动物大动脉血管结构无明显差异,但中膜厚度与胶原纤维、弹性纤维含量有差异。李文春等[7]对人脐静脉研究表明脐静脉存在内弹性膜,且呈叠扇状,这与本研究结果有相似之处,但并未见脐静脉有类似外弹性膜结构。本研究所用人体标本为尸体标本中静脉,未见到类似弹性膜的结构。本研究显示家兔肾静脉存在类似内弹性膜、外弹性膜结构。家兔的中静脉血管壁上为何存在这种这样的结构？在家兔其他中静脉管壁中是否也有类似的结构？这些结构又与何种功能有关？这些问题还需进一步研究。