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1.福建省明溪县医院,福建 明溪 365200;2.福建中医药大学药学院,福建 福州 350122
厚朴为木兰科植物厚朴(MagnoliaofficinalisRehd.etWils.)或凹叶厚朴(MagnoliaofficinalisRehd.etWils. subsp.biloba(Rehd.etWils.)Law)的干燥干皮、根皮及枝皮,为国家二级保护中药材植物[1-2]。始载于《神农本草经》,列为中品,其后历代本草均有记载,并载入历版《中国药典》,在我国已有两千多年药用历史[3]。厚朴主产于四川、湖北等省份,凹叶厚朴主要分布于福建、浙江、江西等省。近年来国内外对厚朴的研究不断深入,在国内外用于多种疾病的治疗,新的药效又不断被发现,尤其是其较好的抗病毒、抗肿瘤、防龋、抗菌的药效,越来越受到人们的重视。
福建省天然分布和栽培的主要为凹叶厚朴,也有少量引种培育[5],是福建省道地药材,其性温,味苦、辛,具燥湿消痰,下气除满的功效,为我国传统的芳香化湿中药,用于湿滞伤中,肮痞吐泻,食积气滞,腹胀便秘,痰饮喘咳[3-4],治腹胀、呕吐、胃病、泻痢和咳嗽气喘等症[5]。药理研究表明厚朴还具有广谱抗菌作用[6]。另外,厚朴栽培简便,资源丰富。由于对厚朴进行了大规模的提前采收,导致好货难找,中药材市场混乱,频发质量问题,从而使临床疗效下降。因此,对厚朴的枝皮和干皮进行一系列生药鉴定研究,旨在为闽产厚朴的正确鉴别,以及进一步的研究、开发应用及质量标准鉴定提供参考,也为后期开展相关的研究以及将来开发利用提供参考,使厚朴具有更大的社会效益和更广泛的开发前景。
1.1 材料 厚朴的枝皮和干皮采于福建省三明市明溪县胡坊镇福西村,经福建中医药大学中药鉴定教研室黄泽豪副教授鉴定为木兰科凹叶厚朴(Magnoliaofficinalissubsp. biloba)的干燥枝皮、干皮。
1.2 仪器 生物显微镜(YS100 日本尼康公司)、照相机(E0S 60D 佳能公司)、连续变倍体视显微镜(JSZ4 南京江南光电集团股份有限公司)、快速开盖万能高速粉碎机(DFY-C-500 温岭市林大机械有限公司)、手机(魅族mx5)、显微测量尺、载玻片、盖玻片、直尺、切片刀、镊子、擦镜纸、吸水纸、酒精灯等。
1.3 试剂 合氯醛试液、浓盐酸、1%间苯三酚试液、蒸馏水。
2.1 性状鉴别 通过眼观、手摸、鼻闻、口尝等简单方法,鉴别药材的外观性状,包括形状、大小、色泽、表面特征、质地、断面、气、味、水试、火试等[7]。干品药材直接观察并记录其性状特征。
2.2 显微鉴别 应用显微技术对厚朴的枝皮和干皮进行显微分析,包括组织鉴定和粉末鉴定。组织鉴定是通过观察厚朴的切片鉴别其组织构造特征;粉末鉴定是通过观察厚朴的干皮及其干品的粉末制片对其细胞分子及内含物的特征进行鉴定。
在此采用传统的徒手切片、表皮撕取等方法进行制片,分别对厚朴的皮(枝皮、干皮)进行显微鉴别观察;干品药材在进行打粉过筛后进行粉末制片观察。观察结果做好细胞大小、细胞后含物等测量及鉴别并及时拍照和做好数据记录。
实验中涉及的徒手切片、粉末制片两种制片方法,其具体如下。
2.2.1 徒手制片 取新鲜厚朴的枝皮进行徒手切片,装片,必要时用水合氯醛进行透化处理,或可加盐酸-间苯三酚试液进行染色,而后即可在显微镜下观察,该方法较方便快捷。
2.2.2 粉末制片 取药材粉末少许分别进行加蒸馏水的不透化处理和加水合氯醛的透化处理,并分别进行观察,必要时加盐酸-间苯三酚试液进行染色。
3.1 厚朴枝皮
3.1.1 性状鉴别 皮薄呈单筒状,外表面灰棕色或灰褐色,粗糙,较易剥落,有明显椭圆形皮孔和纵皱纹,刮去粗皮者显黄棕色。内表面黄棕色,较平滑,具细密纵纹。嚼后残渣较多。气香,味辛辣、微苦。如图1所示。
3.1.2 显微鉴别 ①木栓层由数列细胞组成,木栓层细胞壁木化,栓内层为石细胞环层,约1~3列石细胞组成。②皮层较宽,皮层散有油细胞及石细胞,有的石细胞呈分枝状,层纹隐约可见,少见油细胞,椭圆形,壁稍厚,内含油状物。③韧皮部射线宽1~3列细胞,向外渐变宽,韧皮纤维束较少,壁较厚。如图2所示。
3.2 干皮
3.2.1 性状鉴别 干皮呈卷筒状或双卷筒状,长25~35 cm,厚0.2~0.7cm。外表面灰棕色或灰褐色,粗糙,有时呈鳞片状,较易剥落,内表面黄棕色,较平滑,具细密纵纹。质坚硬,不易折断。气香,味辛辣、微苦。如图3所示。
3.2.2 显微鉴别
3.2.2.1 干皮横切面组织构造特征(徒手切片) ①木栓由10余列细胞组成,有的可见落皮层,落皮层较薄,木栓层细胞壁木化,木栓形成层中含黄色棕色物质,栓内层为石细胞环层,约3~8列石细胞组成。②皮层较宽,皮层散有多数油细胞及石细胞群,可见石细胞呈分枝状,层纹隐约可见,油细胞椭圆形,壁稍厚,内含油状物。③韧皮部射线向外渐变宽,韧皮纤维束众多,壁较厚,油细胞颇多,单个散在或2~5个相连。如图4所示。
3.2.2.2 粉末 显微特征粉末棕色。①石细胞较多,呈椭圆形、卵圆形、类方形或不规则分枝状,直径10~60 μm,壁较厚,厚约至20 μm,孔沟较少,有时可见层纹。②纤维直径15~30 μm, 壁较厚,有的呈波浪形或一边呈锯齿状,孔沟不明显,木化。③油细胞较多,单个散在,椭圆形或类圆形,直径25~70 μm,壁稍厚,胞腔内含黄棕色油滴状物。④可见木栓细胞,壁薄而平直,较长,多层重叠。如图5所示。
通过分析厚朴的枝皮和干皮的性状鉴别与显微鉴别的实验结果、查阅相关文献比较可得:闽产厚朴枝皮横切面与干皮横切面的显微特征基本一致,但是,枝皮横切面显微特征中油细胞较少,大多单个散在;韧皮纤维束较少。张淑洁等对[8]厚朴化学成分及其现代药理研究进展,发现厚朴中含有厚朴酚、和厚朴酚等化学成分,这些成分具有抗氧化、抗菌、抗炎镇痛等现代药理作用,这可能是干皮药用价值更高的原因所在。实验结果中厚朴干皮性状鉴别与张朝民[9]在厚朴常见伪品的鉴别检验中关于厚朴干皮性状鉴别的描述较一致。李水福等[10]在市场厚朴的质量亟待重视,林仁礼[11]研究厚朴及其伪品黄杞的鉴别,从他们的研究结果中发现厚朴的干皮的横切面显微以及粉末显微特征中有的薄壁细胞中发现含有草酸钙方晶。在厚朴的干皮的横切面显微以及粉末显微特征未发现草酸钙方晶,笔者推测可能是由于厚朴产地不同或其生长年限不同导致这一现象。
近年来,厚朴也频繁出现伪品,笔者通过查阅文献发现主要有山玉兰来源为木兰科植物山玉兰(MagnoliadalavayiFraneh.)的干燥树皮[9],黄杞皮来源为胡桃科植物黄杞(EngelhardiaroxburghianaWall.)的干燥树皮[11],大泡通皮来源为五加科植物白背鹅掌柴(Schefflerahypoleuca(Kurz) Harms)的干燥皮[9],合欢皮来源于豆科植物合欢(AlbiziajulibrissinDurazz)的干燥树皮[12]。由于其形态特征相似性,造成大量伪品代替或冒充正品,在中药市场上流通销售。厚朴在中药材市场中的需求量很大,同时厚朴是福建省道地药材,也是国家重点保护的中药材[2,13],市售品有其它产地或不同品种的混淆品需要鉴别。中药材市场中发现大量伪品代替或冒充正品,故对其进行生药鉴定为将来开发利用提供参考,具有极大的意义。本文的研究为厚朴的道地正确鉴别,以及进一步的研究、质量标准制定提供鉴定参考。
通过实验的观察可知:闽产厚朴枝皮、干皮的性状鉴别分别为枝皮薄,单筒状,外表面灰棕色或灰褐色,粗糙,内表面黄棕色,断面纤维性,嚼后残渣较多;干皮呈卷筒状或双卷筒状,外表面灰棕色或灰褐色,粗糙,较易剥落,内表面黄棕色,质坚硬,不易折断。显微特征为枝皮皮层油细胞少见,韧皮纤维束较少。干皮皮层散有多数油细胞及石细胞群。干皮粉末特征主要为石细胞多见,油细胞较多,壁稍厚;纤维较多,有的呈波浪形或一边呈锯齿状。