肿瘤异常蛋白与乳腺癌分子标志物关系及其在乳腺癌新辅助化疗中的应用

沈国栋 陆羽玲 张黎

乳腺癌作为城市女性第一位恶性肿瘤, 其病死率在现代诊疗技术不断进步下有所下降, 患者总生存时间延长, 但乳腺癌复发、转移风险仍较大。目前关于TAP与ER、PR等生物学因子的相关性研究尚少。因此, 本研究主要分析TAP与乳腺癌分子标志物的关系, 以及TAP在新辅助化疗中的应用, 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选择本院2014年9月～2017年9月收治的乳腺癌患者78例。纳入标准：①经影像学检查、穿刺活检病理确诊为乳腺癌；②年龄40～65岁, 均为女性, 临床分期Ⅱ～ⅢA期；③术前均未远处转移, 术前接受新辅助化疗；④预期生存时间＞6个月。排除标准：①合并糖尿病、风湿病等影响TAP检测结果的疾病；②合并其他肿瘤；③妊娠期或哺乳期妇女；④相关资料不全者。

1. 2 方法

1. 2. 1 TAP测定 采集患者指端末梢血, 置于载玻片上, 将其推成均匀血片3张, 平放, 自然晾干；之后将血片放到净化操作台上, 每张血片间隔均匀滴入TAP试剂(摇晃均匀)3滴, 共9个液斑, 静置120 min左右, 若血片上有3个斑点形成判断为完成。血片放到TAP图像分析仪上, 找寻形态特异的凝聚物：凝聚物面积＜121 μm2判断为TAP正常/无明显凝聚物；凝聚物面积121～225 μm2判断为TAP异常/凝聚物较小；凝聚物面积＞225 μm2判断为TAP异常/凝聚物较大。

1. 2. 2 研究方法 收集并整理78例乳腺癌患者临床病例资料, 包括年龄(＜50岁与≥50岁)、月经情况(绝经前与绝经后)、肿瘤直径(≤3 cm与＞3 cm)、ER状态(阳性与阴性, 免疫组化染色ER阳性细胞1%及以上判断为阳性)、PR状态(阳性与阴性, 免疫组化染色PR阳性细胞1%及以上判断为阳性)、HER-2状态［阳性与阴性, 免疫组化染色HER-2(+++)判断为阳性, (++)者需通过荧光原位杂交(FISH)验证, FISH阳性判断为阳性］、Ki-67表达(≥14%与＜14%)、淋巴结转移(是与否)等。

1. 2. 3 新辅助化疗方法 接受新辅助化疗4个疗程, 1个疗程21 d, 方案为：多西他赛(75 mg/m2)+表柔比星(75 mg/m2)+环磷酰胺(600 mg/m2)。

1. 3 近期疗效判定标准 新辅助化疗4周后依据实体瘤疗效评价标准(RECIST)评价近期疗效, 包括CR、PR、SD、PD, 有效率=(CR+PR)/总例数×100%。

1. 4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验, 多组比较采用F检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验；影响因素分析采用多因素Logistic回归分析。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 化疗前TAP表达 78例患者新辅助化疗前TAP正常17例(21.79%), TAP异常/凝聚物较小38例(48.72%), TAP异常/凝聚物较大23例(29.49%), TAP异常率为78.21%。

2. 2 化疗前TAP表达与预后因素的关系 化疗前, 不同年龄、月经情况患者TAP表达比较差异无统计学意义(P＞0.05)；不同肿瘤直径、ER状态、PR状态、HER-2状态、Ki-67表达、淋巴结转移患者TAP表达比较差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 不同病理特征患者化疗前TAP表达比较［n(%)］

2. 3 近期疗效 新辅助化疗4个疗程后, CR 12例(15.38%),PR 44例(56.41%), SD 15例(19.23%), PD 7例(8.97%), 有效率为71.79%。

2. 4 TAP表达与近期疗效的关系 新辅助化疗前后, 不同疗效患者的TAP凝聚物面积比较差异均具有统计学意义(P＜0.05)；化疗前后, CR、PR患者TAP凝聚物面积均低于PD、SD患者, SD患者TAP凝聚物面积均低于PD患者, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 不同疗效患者化疗前后TAP凝聚物面积比较 ( ±s, μm2)

表2 不同疗效患者化疗前后TAP凝聚物面积比较 ( ±s, μm2)

注：与化疗前比较, aP＜0.05；与PD比较, bP＜0.05；与SD比较,cP＜0.05

近期疗效 例数 化疗前 化疗后CR 12 125.28±11.45bc 104.67±10.29abc PR 44 140.36±10.32bc 119.25±9.64abc SD 15 152.84±11.70b 150.98±12.37b PD 7 170.31±14.53 238.94±19.85a F 20.67 54.18 P＜0.01 ＜0.01

2. 5 多因素Logistic回归分析 多因素Logistic回归分析发现, ER阴性、PR阴性、Ki-67＞14%、Her-2阳性是TAP异常表达的影响因素(P＜0.05)。见表3。

表3 多因素Logistic回归分析

3 讨论

新辅助化疗可直接观察化疗前后肿瘤的大小、病理学及生物学指标的变化, 直观地了解化疗药物及方案对具体肿瘤是否有效, 是最为可靠的体内药敏试验, 可及时调整、更换有效化疗药物, 为制定高效化疗方案提供可信依据, 最大可能地提高化疗效果, 但当下尚无评价化疗敏感性、预测化疗效果的有效指标［1-3］。相比影像学、分子生物技术, TAP检测通过末梢血变化可提前发现病变, 且TAP检测价格不高, 操作简单, 准确度高, 对癌前病变、肿瘤临床诊断有重要评估作用［4,5］。近年来大量研究［6,7］证实 , TAP 在食管、胃、大肠癌的早期筛查中有较高的灵敏度并可用于疗效评估。Nilsson MI等［3］认为恶性肿瘤治疗有效性不仅表现在肿瘤体积缩小方面, 单纯的影像学检查难以明确肿瘤活性变化,可能导致延迟或过度治疗, 不利于其预后。TAP检测可弥补判断结果仅为阴性、阳性的限制。本研究结果显示, 化疗前CR、PR患者TAP凝聚物面积比SD、PD者显著小, 且CR、PR患者化疗后TAP凝聚物面积比化疗前明显缩小, 而PD明显增大。

综上所述, 乳腺癌中TAP异常表达率较高, TAP的异常表达程度与ER阴性、PR阴性、Ki-67高表达、Her-2阳性有关, 在新辅助化疗前行TAP检测, 一定程度上可预测患者的疗效。