冠心病患者血清软骨寡聚基质蛋白水平变化及其与冠状动脉钙化的关系

何雨峰 李宁侠 李建华 强 锋 杨泽华

冠状动脉粥样硬化型心脏病简称冠心病(coronary heart disease，CHD)，是因冠状动脉管壁形成粥样斑块造成血管狭窄从而引发的临床综合征。冠状动脉硬化进展期易发生冠状动脉钙化，而冠状动脉钙化是CHD的重要影像特征，与粥样硬化严重程度呈显著相关[1]。临床常用CT冠状动脉钙化积分评估冠状动脉钙化的程度，冠状动脉钙化积分升高与CHD急性事件发生率呈正相关，积分越高的患者急性心肌梗死及心源性猝死的发生率越高[2]。虽然CT定量冠状动脉钙化积分可反映冠状动脉钙化程度，预测未来心血管事件，但反复CT检查增加患者放射线暴露的风险，且CT定量冠状动脉钙化评分不适于持续动态观察CHD患者粥样硬化的进展，探讨可反映冠状动脉钙化程度的血清学指标成为临床研究的热点[3]。

软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein，COMP)属糖蛋白G家族，由5个相同含有755个氨基酸的亚单位构成，常用于骨关节炎、类风湿性关节炎等的诊断和疗效评估。近年来的研究发现，血管壁基质中的COMP参与血管钙化的发生，血液透析患者血清COMP浓度与血管钙化和心血管事件成正相关[4]。目前，COMP与CHD患者冠状动脉钙化的关系研究较少。为此，本研究通过对CHD患者血清COMP水平变化及其与冠状动脉钙化的关系，分析探讨COMP与冠状动脉钙化积分的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年1月至2018年2月在西安医学院第二附属医院就诊的237例CHD患者，将其纳入观察组，其中男性131例，女性106例；年龄52～77岁，平均年龄(66.05±7.26)岁；体质量指数(23.87±3.26)kg/m2。抽取同期在医院正常体检的237名健康者，将其纳入对照组，其中男性136名，女性101名；年龄51～77岁，平均年龄(66.42±6.14)岁；体质量指数(23.56±3.39)kg/m2。两组受试者性别、年龄、体质量指数、个人史、家族史及合并疾病等一般资料比较差异均无统计学意义，具有可比性。

1.2 纳入与排除标准

(1)纳入标准：①有CHD的临床症状，冠状动脉CT血管成像或冠状动脉造影至少1支冠状动脉血管狭窄程度＞50%，符合CHD的诊断标准[5]；②年龄≥50岁，性别不限；③首次确诊，既往无CHD史；④患者对研究知情并签署知情同意书。

(2)排除标准：①合并严重肝肾功能不全、老年性瓣膜病、高血压心脏病、风湿、类风湿关节炎、骨关节炎、肥厚型心肌病及原发性甲亢者；②对碘造影剂过敏者；③合并感染性疾病、血液系统疾病、恶性肿瘤、结核、甲状腺疾病者；④合并免疫系统疾病、结缔系统疾病者；⑤精神疾病、认知功能障碍、视听功能障碍，不能正确交流者；⑥拟纳入或已纳入其他临床研究者。

1.3 仪器设备

采用BS-800M型全自动生化分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子设备有限公司)；BC-5380型全自动血液细胞分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)；特定蛋白分析仪(深圳市国赛生物技术有限公司)。

1.4 观察与评价指标

(1)实验室检查。两组受试者入组后抽取空腹静脉血，采用ELISA法测定血清COMP水平。观察组患者同时检测血脂、同型半胱氨酸(Hcy)、白细胞(white blood cell，WBC)以及C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。

(2)冠状动脉钙化积分(CAC scoring，CACS)。参照Agatston等[6]和冯勤颖等[7]方法进行计算：①CT值＞130 HU、钙化面积＞1 mm2；②钙化面积×钙化灶峰值计分，130～199 HU=1分，200～299 HU=2分，300～399 HU=3分，≥400 HU为4分，一条血管各钙化灶积分之和为该支血管总积分，以0分为无钙化，≤100分为轻度钙化，101～400分为中度钙化，＞400分为重度钙化；③根据评分将患者分为≤100分和＞100分，分别代表无明显钙化和明显钙化。

1.5 分析方法

(1)以是否明显钙化作为应变量，将年龄(＜60岁=0，60～75岁=1，＞75岁=2)、性别(女=0，男=1)、体质量指数(＜24 kg/m2=0，≥24 kg/m2)、CHD家族史(否=0，是=1)、吸烟(否=0，是=1)、饮酒(否=0，是=1)、高血压(否=0，是=1)、糖尿病(否=0，是=1)、低密度脂蛋白(LDL-C＜3.12 mmol/L=0，≥3.12 mmol/L=1)、高密度脂蛋白(HDL-C＜1.04 mmol/L=0，≥1.04 mmol/L=1)、总胆固醇(TC＜5.2 mmol/L=0，≥5.2 mmol/L=1)、甘油三脂(TG＜1.7 mmol/L=0，≥1.7 mmol/L)、WBC(＜10×109/L=0，≥10×109/L=1)、Hcy(＜10μmol/L=0，≥10μmol/L=1)、CRP(连续变量)、COMP(＜157.2 ng/ml=0，≥157.2 ng/ml=1)引入二分类多因素logistic分析。

(2)以是否明显钙化为应变量，将自变量赋值后引入多因素logistic分析，COMP预测明显钙化的灵敏度、特异度、最佳截断值(Cut-off)和受试者工作(receiver operating characteristic，ROC)曲线下面积(area under curve，AUC)采用ROC曲线分析。

1.6 统计学方法

本研究所有数据均输入Excel2007建立数据库，采用SPSS 23.0软件进行统计学数据分析。计量资料采用均数±标准差(x-±s)表示，采用独立样本t检验，以p＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组COMP水平相比较

对照组受试者COMP水平为(111.74±21.86)ng/ml，观察组患者COMP水平为(162.74±22.61)ng/ml，两组比较差异有统计学意义(t=19.082，p＜0.001)。

2.2 CHD有无钙化患者COMP水平相比较

经对观察组CHD患者进行CACS评分，其中0分21例，1分61例，3分63例，4分92例；无明显钙化患者共82例(占34.60%)，明显钙化患者155例(占65.40%)。无明显钙化患者COMP水平为(145.42±17.17)ng/ml，明显钙化患者COMP水平为(170.37±16.14)ng/ml，明显钙化组COMP水平显著高于无明显钙化组，差异有统计学意义(t=8.719，p＜0.001)。以CACS评分为金标准，绘制COMP预测明显钙化的ROC，确定COMP预测CACS的最佳截断值为157.2 ng/ml，预测的灵敏度为73.5%，特异度为86.6%，AUC为0.85，95%CI为0.806～0.905，ROC曲线如图1所示。

图1 明显钙化和无明显钙化COMP预测明显冠状动脉钙化的受试者工作曲线图

2.3 影响CHD患者冠状动脉钙化的多因素logistic分析

以是否明显钙化作为应变量，将年龄、性别、体质量指数、CHD家族史、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病、LDL-C、HDL-C、TC、TG、WBC、CRP和COMP水平引入二分类多因素logistic分析，年龄、吸烟、糖尿病、CRP和COMP水平是冠状动脉钙化的独立影响因素(OR=5.857，OR=2.688，OR=3.684，OR=1.082，OR=4.639；p＜0.05)，见表1。

3 讨论

冠状动脉钙化是冠状动脉粥样硬化的重要特征，冠状动脉狭窄程度越高，伴有钙化的概率越大，与钙化程度低的患者相比较，钙化程度高的患者所有的CHD事件、非致死性心肌梗死及CHD猝死等危险事件的危险度更高[8]。

表1 影响冠状动脉钙化的多因素logistic分析

近年来的大量研究显示，冠状动脉钙化过程是多因素、多机制共同参与的主动的和可调控的复杂病理生理过程，探讨影响冠状动脉钙化的危险因素，并给予针对性防控成为目前研究的热点[9-10]。本研究结果显示，年龄、吸烟、糖尿病及CRP是冠状动脉钙化的独立危险因素，与多数研究一致[11-14]。

COMP是表达于肌肉骨骼和心血管系统的细胞基质蛋白，血清COMP水平常做为诊断骨关节炎和类风湿性关节炎及预测预后的生物学指标[15]。Riessen等[16]报道，COMP是人血管细胞外基质的正常组分，与血管平滑肌细胞的黏附和趋触性密切相关。血管平滑肌细胞增殖迁移是动脉粥样硬化内膜增厚、冠状动脉成形术后再狭窄和静脉移植失败的关键[17]。Adams-7可通过降解血管COMP促进血管平滑肌细胞的迁移和内膜增生，导致血清中COMP过表达[18]。Halasz等[19]报道，COMP参与胶原纤维的装配，是人动脉粥样硬化斑块、狭窄斑块及不同动脉粥样硬化模型斑块的基质重要组成成分。本研究结果显示，观察组患者血清COMP水平高于对照组，提示COMP参与CHD发病过程，CHD患者血清COMP水平升高，与Wang等[20]研究一致。

近年来的研究显示，血管平滑肌细胞可产生COMP，主要存在于动脉中膜，参与血管平滑肌钙化过程，并在钙化过程中降解，导致血清COMP水平升高[21]。Bond等[22]报道，ApoE和COMP敲除的小鼠可促进胶原纤维增殖和冠状动脉钙化形成。Du等[23]研究显示，COMP敲除可降低体外高钙环境中培养的血管平滑肌细胞的钙沉积量，COMP过表达可抑制氯化钙诱导的主动脉器官培养模型的血管钙化，COMP缺乏对冠状动脉钙化具有明显促进作用。本研究结果显示，明显钙化CHD患者COMP水平高于无明显钙化患者，多因素分析显示，COMP是冠状动脉钙化的独立危险因素，提示COMP参与CHD患者血管钙化，血管钙化患者COMP降解片段增加，导致血清COMP水平升高。AUC不受患病率和诊断界值影响，是诊断试验的最佳评价指标，理想的AUC为1，ROC位于0.5～0.7之间为诊断价值低，位于0.7～0.9之间为诊断价值中等，＞0.9为诊断价值高，ROC显示COMP预测CHD患者明显钙化的敏感度为73.5%，特异性为86.6%，AUC为0.85，95%CI为0.806～0.905。本研究结果提示，COMP预测CHD患者明显冠状动脉钙化具有一定的临床价值。

CHD患者COMP水平高于正常人群，是CHD患者冠状动脉钙化的独立危险因素，预测冠状动脉明显钙化具有一定的临床价值。