伏晓清 庄 婧
(泗阳县人民医院检验科,江苏泗阳 223700)
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的,以肝脏炎性病变为主,能够引起慢性乙肝、肝硬化和肝癌,严重危害人类健康的一种传染病。乙肝两对半血清学指标一直用来诊断乙肝,判断患者的病毒复制以及评价抗病毒治疗的效果[1]。HBV-DNA是诊断HBV感染的金标准,其浓度高低可直接反应乙肝患者体内病毒复制水平的高低以及传染性的强弱[2]。本研究通过对300例乙肝患者的血清进行乙肝两对半、HBV-DNA的检测,探讨其在乙肝的诊断、治疗后等的重要作用。
选取2015年10月至2016年9月本院收治的300例乙肝患者的静脉血作为研究资料。其中,男性178例,女性122例。设定乙肝两对半的排列顺序为:①乙肝病毒表面抗原(HBsAg);②乙肝病毒表面抗体(HBsAb);③乙肝病毒e抗原(HBeAg);④乙肝病毒e抗体(HBeAb);⑤乙肝病毒核心抗体(HBcAb)。本次检测共有6种乙肝5项组合模式,分别为①③⑤、①④⑤、①④、①⑤、①②④⑤和①③④⑤。其中①③⑤模式俗称大三阳,①④⑤模式俗称小三阳。依据HVB-DNA载量将患者分为4个级别:102~ 103、104~ 105、106~ 107和 108 IU/mL。所有患者均签署知情同意书。
乙肝两对半检测方法。采用化学发光免疫分析检测 乙 肝 五 项,包 括 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb。
HBV-DNA检测。HBV-DNA采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法。由仪器软件自动分析报告结果。<5×102 IU/mL为阴性。
仪器和试剂。北京科美CHEMCLIN®600化学发光分析仪及其配套试剂。GeneLight9800全自动荧光PCR仪。
采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析,计数资料用(%)表示,行χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
化学发光分析法检测乙肝两对半6种模式中HBVDNA阳性率有所不同,其中乙肝①③⑤模式中HBV-DNA含量阳性率最高,见表1。
表1 乙肝两对半不同模式下HBV-DNA阳性率分布情况
111例HBeAg阳性患者中HBV-DNA阳性107例(96.4%),HBV-DNA阴性4例(3.6%);279例HBeAg阴性患者中HBV-DNA阳性124例(44.4%),HBV-DNA阴性155例(55.6%)。
分析HBsAg和HBeAg含量与HBV-DNA载量之间的关系。随着HBeAg含量的增高,HBV-DNA载量也增高,见表2。
乙型肝炎作为一种传染病呈世界性流行趋势。全球每年大约100万人死于HBV感染引发的肝硬化、肝癌等疾病。而我国是乙肝发病率较高的国家。据文献报道,我国乙肝的感染率超过7%[3]。目前,HBV在我国临床实验室多以乙肝五项作为检测指标,该法组合模式复杂多样,常导致部分患者的HBV感染状况难以判断。HBV-DNA可直接检测乙肝病毒的含量,是反映乙肝病毒存在、复制及传染性强弱的最直接可靠的指标。
本研究结果发现,乙肝两对半6种模式中HBV-DNA阳性率差异很大,其中HBeAg阳性的两种模式①③⑤和①③④⑤中HBV-DNA阳性率最高,明显高于其他组合模式。HBV-DNA载量呈阳性,说明HBV-DNA有复制,具有传染性。而且,载量越高传染性越强[4]。传统观念认为e抗原是乙肝病毒在体内复制的标志,患者为“大三阳”时具有较强的传染性[5]。说明两者任何一种阳性均能提示乙肝正在复制,并且具有传染性。本文这一数据较文献[6]报道偏高,主要原因是本文收集的乙肝患者多数首次来医院就诊,无治疗史。进一步的结果分析发现279例HBeAg阴性患者中有124例HBV-DNA阳性,与文献[7]相近。HBeAg阴性不能说明无传染性,病毒停止复制。无论HBeAg阳性还是阴性,病毒的复制依然存在,与文献[8]报道基本一致。而且HBeAb的出现,病毒仍未终止复制,本文的数据显示HBeAb阳性的3种模式中HBV-DNA的阳性率各不相同,以“小三阳”模式最高。①②④⑤模式和①④模式次之。因此,不能以HBeAg转换为HBeAb作为判断病毒复制、有无传染性的标准。①②④⑤模式虽然只占乙肝的少数,但 HBV-DNA阳性率较高,可能是乙肝病毒发生变异,多种亚型并存的原因。本研究发现,随着HBV-DNA载量增高,HBeAg含量也增高,说明两者具有一定的相关性。但HBV-DNA载量增高,HBsAg的含量并没有成比例增高,并不具有相关性。这一结果与文献报道不符,可能与个体差异的原因有关。
综上所述,单纯乙肝两对半检查指标对于乙肝患者的诊断及判断预后均具有一定的局限性,建议联合HBVDNA检测,能够更好地反映乙肝病毒在体内的复制情况以及肝脏受损程度,更准确地指导临床医生合理用药。
表2 HBsAg和HBeAg含量与HBV-DNA载量关系(±s)
表2 HBsAg和HBeAg含量与HBV-DNA载量关系(±s)
HBV-DNA拷贝数(IU/mL) 102~103 104~105 106~107 108 HBsAg(ng/mL) 76.1±10.24 40.6±20.27 68.7±16.71 89.48±22.35 HBeAg(NCU/mL) 4.12±7.11 11.4±10.57 29.29±9.14 >44.00