柞蚕雄蛾营养液对小鼠保肝降酶功能的研究

范作卿　邹德庆　王娜　郭光　朱琳

摘要：为了解柞蚕雄蛾营养液保肝降酶的功能，采用谷丙转氨酶活性检测与病理组织学切片观察的方法，研究柞蚕雄蛾营养液对四氯化碳中毒小鼠肝损伤的作用。结果表明：柞蚕雄蛾营养液大剂量组与小剂量组均可明显降低四氯化碳中毒小鼠血清中谷丙转氨酶（ALT）水平，治疗效果达显著水平（P<0.05），与乙肝宁具有相同作用。通过肝组织切片观察，柞蚕雄蛾营养液小剂量组可见部分肝细胞点状坏死，有轻度肝损伤，而柞蚕雄蛾营养液大剂量组小鼠肝组织结构正常，肝细胞排列规则，未见炎症。表明柞蚕雄蛾营养液能减少肝细胞变性、坏死的程度和范围，对受损伤的肝组织具有明显保护作用，且大剂量效果更佳。

关键词：柞蚕雄蛾营养液；四氯化碳；保肝；谷丙转氨酶；功能试验

中图分类号：S885.1：F307.5 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2018）08-0148-04

Study on Liver-Protecting Function of Tussah

Male Moth Nutrient Solution on Mice

Fan Zuoqing， Zou Deqing， Wang Na， Guo Guang， Zhu Lin

（Sericultural Research Institute of Shandong Province， Yantai 264002， China）

Abstract To understand the liver-protecting function of tussah male moth nutrient solution， the alanine transaminase （ALT） activity assay and histopathological observation were used to study the effect of tussah male moth nutrient solution on liver injury of mice induced by carbon tetrachloride poisoning. The results showed that the tussah male moth nutrition in high dose group and low dose group both could decrease ALT level in serum of poisoning mice. The therapeutic effect was significant compared with the carbon tetrachloride model group（P<0.05）. And its effect was the same as that of positive drug Yiganning. The histopathologic examination showed that there were partial necrosis of liver cells and mild liver injury in low dose group. While the liver tissue structure was normal in high dose group. The liver cells arranged regularly， and no inflammation occurred. Therefore， it indicated that the nutrient solution of tussah moth could reduce the extent of liver cell degeneration and necrosis， and had a significant protective effect on the injured liver， and high doses were better.

Keywords Tussah male moth nutrient solution； Carbon tetrachloride； Liver protection； Alanine transaminase （ALT）； Function test

我國柞蚕资源丰富，近年来对柞蚕雄蛾的综合加工利用已引起人们的高度重视，柞蚕雄蛾的相关保健品及药物已被证明具有增强机体免疫力[1]、降血脂[2]、抗肿瘤[3]等多种功能。现已开发出一些食品、保健品和医药品，取得了较大的经济效益和社会效益。例如“延生护宝液”系以雄蚕蛾为主药，配以人参、鹿茸、驴肾、仙茅、肉桂等多味中药而成，对男女肾虚引起的疾病有一定的防治作用[4]。新型中药复方制剂——柞蚕雄蛾口服液具有明显增强免疫力，降低过氧脂质（Lpo）含量的抗衰老作用[5]。柞蚕雄蛾营养液是山东省蚕业研究所研究团队选用初羽化、未交尾的柞蚕雄蛾为原料，通过酒精浸泡后低温减压抽提得到的富含生物活性的保健产品，现已完成了其提取工艺研究及成分检测[6，7]。柞蚕雄蛾营养液可明显降低由半胱氨酸所致高脂血症小鼠血清中的血脂四项水平，因而对于高脂血症有良好的治疗效果，经试验证明其有效成分对小鼠的细胞免疫和体液免疫均具有明显的增强作用，对单核吞噬细胞系统功能也有一定提升作用[2]，并且还可逆转放疗后荷瘤大鼠Th1/Th2 漂移状态，改善荷瘤机体免疫功能，增强抗肿瘤细胞免疫功能，可作为恶性肿瘤传统放疗中的辅助用药[8-10]。本研究对柞蚕雄蛾营养液是否对小鼠具有保肝降酶的作用进行了试验，以期为柞蚕雄蛾营养液的保健与药用价值提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料及主要仪器设备

柞蚕雄蛾营养液，山东省蚕业研究所2017年提取制备；雄性ICR小鼠，每只18～20 g，购自济南金丰实验动物有限公司；谷丙转氨酶试剂盒，购自上海酶联生物科技有限公司；四氯化碳（分析纯），购自天津市富宇精细化工有限公司；乙肝宁颗粒，购自九芝堂股份有限公司。

HM325轮转式切片机，购自赛默飞世尔（上海）仪器有限公司；机博视达拍照显微镜，购自深圳市博视达光学仪器有限公司；H2200R冷冻离心机，购自长沙湘仪离心机仪器有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 小鼠分组及给药 将小鼠随机分设5组，每组6只，A组为空白对照组，B组为四氯化碳模型组，C组为乙肝宁阳性对照组，给药剂量为6.8 mg/（g·d），D组为柞蚕雄蛾营养液大剂量组，给药剂量为0.010 mL/（g·d），E组为柞蚕雄蛾营养液小剂量组，给药剂量为0.005 mL/（g·d）。除A、B组外，其他组按照对应药物与剂量，每日灌胃小鼠1次，连续4 d，于最后一次灌胃1 h后，给小鼠腹腔注射2.5%四氯化碳油溶液0.010 mL/g（包括B组），20 h后每组随机取3只小鼠摘眼取血于1.5 mL離心管中，静置2 h后3 500 r/min离心，吸取上层血清，-20℃冷冻备用。

1.2.2 酶活性检测与切片处理 用谷丙转氨酶试剂盒测定小鼠血清中谷丙转氨酶活性，结果以平均值±标准差表示。同时对各组选取的3只小鼠进行解剖，摘取肝脏组织，以纯净水洗去血污，4%福尔马林固定，HE染色，石蜡包埋切片，在200×显微镜下进行病理组织学观察、拍照，并对肝脏炎症及损伤情况进行分析。

2 结果与分析

2.1 小鼠血清中谷丙转氨酶活性测定结果

由表1看出，B组谷丙转氨酶活性显著高于其余各组（P<0.05），表明B组小鼠四氯化碳中毒达显著水平；而C、D、E组谷丙转氨酶活性都显著低于B组（P<0.05），表明柞蚕雄蛾营养液大、小剂量组与乙肝宁药品都对小鼠肝脏的保护作用达显著水平；其中D组与A组无显著差异，表明柞蚕雄蛾营养液大剂量组可将四氯化碳中毒小鼠血清中谷丙转氨酶降低到正常水平，因此认为柞蚕雄蛾营养液可明显降低四氯化碳中毒小鼠血清中谷丙转氨酶水平，对小鼠肝细胞具有明显保护作用。

2.2 小鼠肝组织切片结果

如图1所示，A组小鼠肝组织结构正常，肝细胞排列均匀、规则，肝细胞未见变性、浊肿及坏死等形态学改变，汇管区也无急、慢性炎细胞浸润。B组小鼠肝组织中可见肝细胞广泛肿胀，部分肝细胞脂肪样变性，甚至有较多的肝细胞坏死，坏死区可见较多的急、慢性炎细胞浸润，说明小鼠受四氯化碳损伤严重。C组小鼠肝组织结构较正常，坏死区可见急、慢性炎细胞浸润，肝组织病变程度轻于B组，重于D组，说明乙肝宁对四氯化碳所致小鼠的肝脏损伤有一定的减轻作用。D组小鼠肝组织结构正常，肝细胞排列较规则，肿胀不明显，肝细胞中未见急、慢性炎细胞浸润，说明大剂量柞蚕雄蛾营养液对四氯化碳所致小鼠的肝脏损伤有明显减轻作用。E组小鼠肝组织中可见肝细胞轻度肿胀，部分肝细胞气球样变，肝组织中可见部分肝细胞点状及小灶状坏死，坏死区可见急、慢性炎细胞浸润，但其坏死程度及范围明显轻于B组，说明小剂量柞蚕雄蛾营养液对四氯化碳所致小鼠的肝脏损伤有减轻作用。

2.3 小鼠肝脏炎症及损伤情况分析

由表2可以看出，B组小鼠由于受四氯化碳毒性影响肝脏炎症都达重度程度，肝损伤严重。C组受四氯化碳毒性影响肝脏炎症中度或不明显，肝损伤轻度或不明显。D组受四氯化碳毒性影响肝脏炎症轻度或不明显，肝损伤情况极轻。E组受四氯化碳毒性影响肝脏炎症中度，肝损伤情况轻度或中度。表明大、小剂量柞蚕雄蛾营养液均可起到保护小鼠肝脏不受四氯化碳损伤、减轻肝脏炎症的功效，其中以大剂量柞蚕雄蛾营养液作用效果更佳。

3 讨论与结论

柞蚕雄蛾营养液可明显降低四氯化碳中毒小鼠血清中谷丙转氨酶水平，与B组相比，治疗作用达显著水平，且大剂量柞蚕雄蛾营养液可将四氯化碳中毒小鼠血清中谷丙转氨酶降低到正常水平。通过肝组织切片观察，E组可见部分肝细胞点状坏死，有轻度肝损伤，而D组小鼠肝组织结构正常，肝细胞排列规则，未见炎症。因而表明柞蚕雄蛾营养液能减少肝细胞变性、坏死的程度和范围，对受损伤的肝组织具有明显保护作用，且大剂量柞蚕雄蛾营养液作用效果更佳。

柞蚕雄蛾营养液是一类富含蛋白质[6]、雄性激素类[11]、黄酮[12]等多种活性成分的复合营养制品，对其保肝降酶的功效成分还有待于进一步定性，其对保肝降酶的作用机理及对相关基因的调节作用也有待于进一步研究。

参 考 文 献：

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[11] 范作卿，邹德庆，李智峰，等.高效液相色谱法测定柞蚕雄蛾浓缩液中睾丸酮含量[J].山东农业科学，2009（9）：97-98.

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