匍匐筋骨草勃艮第之光组培快繁与移栽基质筛选

詹菁，马广莹，郑日华，毛永成，应桃园，杨烨

(1.杭州市萧山区高级技工学校，浙江 杭州 311202； 2.浙江省农业科学院 花卉研究开发中心，浙江 杭州 311202)

匍匐筋骨草(Ajugareptans)原产美国，为唇形科筋骨草属多年生草本植物。其彩叶品种勃艮第之光与中国原产野生种多花筋骨草相比，株形更为低矮，匍匐生长。新叶嫩红并常伴有银边，轮伞花序具花多数，小花淡蓝紫色或淡白色，花期3～7月。引种栽培证明，其在浙江省及周边地区可露地栽培，能耐-8 ℃低温和40 ℃高温，越夏正常，保持常绿，是优良的地被植物。

匍匐筋骨草可用分株或扦插的方式进行繁殖，但繁殖系数相对较低，用工量较大，且短期内大规模生产困难，限制了该品种的推广速度，采用组培快繁可很好解决上述难题[1]。下地移栽是组培快繁走向应用的关键技术。目前匍匐筋骨草刚引进国内不久，有关其组培与下地移栽关键技术未见报道。本试验以匍匐筋骨草勃艮第之光为试材，对其组培快繁技术及组培生根苗移栽的几个主要影响因素进行了研究，为其工厂化生产及育苗提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

试验材料采自浙江省农科院花卉研究开发中心栽植的2年生匍匐筋骨草勃艮第之光盆栽苗。取材前半个月，将材料移至大棚内养护以减少菌源污染。

1.2 方法

1.2.1 外植体的选择与处理

选取生长健壮、无病虫的枝条作外植体，从叶柄基部剪除所有叶片，将剩余裸枝剪成6 cm左右的茎段备用。用洗涤液轻轻搓洗去除表面残物后，用流水冲选材料2 h，将外植体转入无菌操作台，用75%酒精漂洗20～30 s，用无菌水冲洗2次，再用0.1%升汞溶液浸泡6～10 min，期间不断晃动以提高植物材料与升汞的接触面积。用无菌水冲洗3次后，将外植体转移至滤纸上，吸取残余液体备用。将外植体切成3 cm左右的茎段，接种至诱导培养基MS+BA 1.0 mg·L-1(培养基中加入蔗糖30 g·L-1，琼脂7.5 g·L-1，pH值6.0左右)，筛选出后续增殖、生根所用的无菌繁殖材料[2]。

1.2.2 增殖培养基的筛选

以MS为基础培养基，添加不同浓度的BA和NAA，30 d后调查接种茎段的生长情况。

1.2.3 生根培养基的筛选

以1/2MS为基本培养基，添加不同浓度的NAA，30 d后调查接种后各处理的试管苗生根情况[3]。增殖和生根培养基都添加蔗糖30 g·L-1，琼脂7 g·L-1，pH值6.0左右。培养条件为室温(25±1)℃，光照时间16 h/d，光照强度2 000～2 500 lx。

1.2.4 炼苗移栽

移栽前1周，将组培成品苗移至温室大棚内，松开培养瓶上的塑料瓶盖进行炼苗。将组培苗从瓶内移出，洗净沾附在根部的培养基，将其栽入不同基质配比的穴盘中。移栽15 d后统计成活率，观测植株长势，确定最适栽培基质配方。

2 结果与分析

2.1 增殖培养基

将无菌化获得的带芽茎段接种到添加不同植物生长调节剂的增殖培养基中，每瓶接种5株，每处理10瓶。30 d后，依据试管苗的增殖系数和生长势筛选出最适培养基。

由表1可知，随着细胞分裂素BA浓度的增高，匍匐筋骨草分化速度加快、增殖系数增高。其中处理4增殖率最高，达10以上。当BA浓度为3.0时，植物出现不同程度的玻璃化，影响品质。从增殖苗的增殖系数和生长情况综合分析，匍匐筋骨草最适的增殖培养基为MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1。

表1 不同培养基对匍匐筋骨草增殖的影响

2.2 生根培养基

选取生长健壮的匍匐筋骨草无根试管苗，接种到附加不同浓度的NAA(萘乙酸)的1/2MS培养基中[4]，30 d后观察试管苗的生根情况。由表2和图1可知，匍匐筋骨草极易生根，在不添加任何激素的1/2MS培养基中生根良好，平均根数为5.3条，根长6.2 cm，生根率达100%。随着生根素的加入，植株茎基和叶腋会出现增殖现象，且增殖苗细弱量少，干扰生根苗健壮。所以匍匐筋骨草适宜的生根培养基为1/2MS。

表2 不同培养基对匍匐筋骨草生根的影响

A、B为匍匐筋骨草在增殖培养基MS+BA2.0 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1上生长20 d时，茎基和叶腋萌生新芽，同时地下部分会萌生少量新根。C为匍匐筋骨草在生根培养基1/2MS上生长20 d生根情况图1 匍匐筋骨草的组培苗

2.3 移栽基质

由表3可知，不同移栽基质对匍匐筋骨草组培苗成活及生长状况影响不一。处理3基质配方为蛭石∶草炭∶珍珠岩为1∶1∶1时效果最佳，成活率达96%，其幼苗抽发新叶最早，长势最为强健。选用河沙时，幼苗移栽成活率最低为64%，且幼苗长势较慢，可能是由于基质不保水所致。移栽小环境的高湿是移栽幼苗成活的关键因素。

表3 不同移栽基质对出瓶组培苗成活及生长的影响

3 小结

匍匐筋骨草以带芽茎段为外植体进行增殖和生根较为适宜，最佳的增殖培养基为MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1，增殖率可达10.6，增殖率高，能很好地满足快繁的要求。生根阶段最佳培养基为1/2MS，生根率高达100%，植株强健，根长而壮。加入生根素反而会造成组培苗再度增殖，削弱生根苗的生长势。炼苗移栽的基质为蛭石∶草炭∶珍珠岩

1∶1∶1时，移栽成活率高达96%，试验证明，移栽小环境的高湿是移栽幼苗成活的关键因素。通过观察，匍匐筋骨草勃艮第之光通过组培繁殖方法能够保持其特性，为以后大规模工厂化组培苗生产提供参考。