十八反药对甘草与甘遂配伍前后及其相应经方甘遂半夏汤对大鼠脏器及生化指标影响的研究

王嘉琛，叶 花，刘 培，王鹏飞，刘炳辰，段秀俊

（山西中医药大学，山西太原030024）

“十八反”是中药的传统配伍禁忌，自张子和在《儒门事亲》总结“十八反”以来，一直沿用至今，但自古以来破禁者屡见不鲜，如医圣张仲景、药王孙思邈、国医大师朱良春等。甘草配伍甘遂是十八反药对之一，张仲景《金匮要略》中的甘遂半夏汤即含有甘草与甘遂，功在濬痰逐饮，用于治疗留饮脉伏，其人欲自利，利后虽自觉轻快，但心下仍然坚满者。现代常用于治疗肝硬化腹水、肿瘤等重症急症，也有独特的疗效［1］。

本实验选甘草与甘遂药对及其相应经方甘遂半夏汤作为研究对象，通过考察甘草与甘遂配伍前后及其回归到方剂对大鼠脏器指数及血清生化指标的影响，循单药→对药→全方的路径探究十八反药对配伍的毒性变化情况，以期为十八反药对的配伍研究及临床应用提供一定的实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 清洁级健康8 w龄Wistar大鼠50只，雌雄各半，体质量180～220 g，由山西医科大学医学动物中心提供，合格证：SCXK2009-0001。

1.1.2 仪器与试剂 FB124型分析天平（赛多利斯科学仪器有限公司）、HC-2518高速离心机（科大创新股份有限公司中佳分公司）、BCD-196TMBA冰箱（青岛海尔股份有限公司）、移液器（购自上海盛创医疗器械有限公司椒江分公司），DNM-9602酶标分析仪（北京普朗新技术有限公司）、TU-1810型紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）及白蛋白（ALb）试剂盒均由中生北控生物科技股份有限公司提供。

1.1.3 实验药材 甘遂为大戟科多年生草本植物甘遂的块根，购自安国市康达中药材有限公司；甘草为豆科植物甘草的干燥根，购自安国市康达中药材有限公司；半夏为天南星科植物半夏的干燥块茎，购自亳州市万珍中药饮片厂；白芍为毛茛科植物芍药的干燥根，购自安国市神禾中药材饮片有限责任公司。以上药材均由山西中医药大学裴香萍副教授鉴定为正品。

1.2 实验方法

1.2.1 药液的制备 按甘遂半夏汤处方比例（炙甘草、甘遂、半夏、芍药质量比为 2∶1∶3∶5），精密称取甘草、甘遂单味药、甘草与甘遂对药、甘遂半夏汤全方，分别加水煎煮2次，每次30 min，合并煎液，分别浓缩至甘草2 kg/L，甘遂1 kg/L，甘草+甘遂3 kg/L，甘遂半夏汤11 kg/L，4℃保存备用。

1.2.2 分组与给药 健康Wistar大鼠50只，自由取食饮水，室内温度20℃～25℃，相对湿度40%～65%。适应性饲养2 d。采用随机区组法分为5组，每组10只，分别为生理盐水组（对照组）、甘草组、甘遂组、甘遂+甘草组及甘遂半夏汤组。每天以0.2 mL/10 g的给药体积灌胃各组药液1次，连续灌服7 d，之后腹腔注射水合氯醛麻醉，腹腔主动脉取血，以3 000 rpm离心15 min，分离血清。按照试剂盒方法检测血清肝功能指标。同时取心、肝、肾、脾称重，计算脏器指数。

1.3 统计学方法

采用SPSS18.0统计学软件进行统计分析，所有数据均以均数±标准差（±s）表示，采用方差分析，t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 对脏器指数的影响

各组之间大鼠心、肝、肾、脾脏器指数相比差异无统计学意义。结果见表1。

表1 对大鼠各脏器指数的影响 （g/100 g，±s）

表1 对大鼠各脏器指数的影响 （g/100 g，±s）

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2.2 对血清生化指标的影响

甘草+甘遂组与对照组及甘遂半夏汤组比较，ALT 和 AST 明显增高（P＜0.05），差异有统计学意义。ALP、TP及ALb各组之间比较差异无统计学意义。结果见表2。

表2 对大鼠血清生化指标的影响 （±s）

表2 对大鼠血清生化指标的影响 （±s）

注：与对照组比较，1）P＜0.05；与甘遂半夏汤组比较，2）P＜0.05

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3 讨 论

甘遂，始载于《神农本草经》，因其有毒，被列为下品。具有泻水逐饮、破积通便功效，临床上广泛用于治疗手术后粘连性肠梗阻［2］、重症急性胰腺炎［3］、肝硬化所致腹水［4］等。然而甘遂对口腔、胃肠道、眼、皮肤黏膜等具有严重的刺激性，并有促发炎症［5］、肝毒性［6］等副作用，尤其是在与甘草的合用中，常有争议［7-9］。故实验选择了甘草-甘遂作为研究对象，考察其于配伍前后及回归到方剂中的毒性变化情况。

由实验结果可见甘遂单味药组中各项结果与对照组结果相差不大，可以推测甘遂单味药在适宜剂量内对脏器影响并不明显；甘草组中TP与对照组比较变化较明显，可能与甘草的甜腻作用，使血液中的水分相对量减少相关［10］；甘草+甘遂组与对照组相比血清ALT和AST含量显著增高，而甘遂半夏汤组与甘草+甘遂组相比血清ALT和AST含量显著降低，表明十八反药对甘遂、甘草配伍对大鼠肝细胞有损伤作用，配伍之后毒性增加，属于配伍禁忌，与传统中医药理论相吻合。但甘遂半夏汤的全方配伍又可显著降低十八反药对甘草配伍甘遂对肝细胞的损伤，也从实验的角度说明十八反药对只要合理配伍也可用于临床，研究结果也为十八反药对自古至今的广泛使用提供了一定的实验依据。

肝脏作为人体最大的解毒器官，对于蛋白质、糖类、脂肪、维生素等多种物质的代谢起着重要的作用，是维持机体内环境平衡必不可少的环节。因此实验除采用脏器指数来表征十八反药对甘草-甘遂及甘遂半夏汤对动物脏器的毒性影响外，主要采用多种生化指标来表征对肝脏的毒性影响。实验选择脏器指数作为考察指标主要是通过考察其是否有增生、充血、肥大等现象和萎缩、退化性行为等来评价甘草对甘遂及甘遂半夏汤对各脏器的毒性影响，实验采用ALT表征肝细胞的损伤程度，AST表征对肝细胞能量代谢的影响，ALP来表征肝外胆管等部位是否有水肿、梗阻等情况，用TP和ALb来表征血液中蛋白含量的变化。如此通过脏器指数及血清生化指标综合评价甘草对甘遂及甘遂半夏汤对大鼠的毒性，实验结果的说服力较强。