炎症性肠病患者血清学抗体与临床表型的相关性研究

王玉萍 王承党

（1 福建医科大学附属第一医院消化内镜中心，福建 福州 350005；2 福建医科大学附属第一医院消化内科、消化系病研究室，福建 福州 350005）

炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）包括克罗恩病（Crohn's disease，CD）和溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）。二者临床表型存在差异，可能与某些血清学抗体密切相关。目前抗核周型中性粒细胞胞质抗体（perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody，p-ANCA）、抗酿酒酵母抗体（anti-saccharomyces cerevisiae antibody，ASCA）、抗小肠杯状细胞抗体（anti-intestinal goblet cell antibody，GAB）、抗胰腺外分泌腺抗体（anti-pancreatic antibody，PAB）与IBD临床表型关系的研究结果差异较大。鉴于此，本研究通过检测以上四种抗体，旨在探讨它们与IBD临床表型的可能相关性，为临床工作提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料：收集2014年10月至2015年4月就诊福建医科大学附属第一医院IBD患者79例，诊断标准采用《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见》（2012年，广州），并排除合并肿瘤、自身免疫性疾病、其他胃肠道疾病及感染性疾病。其中UC组32例，男19例，女13例，平均年龄为（44.0±15.8）岁，CD组47例，男30例，女17例，平均年龄为（30.6±13.4）岁。

1.2 实验方法：空腹采静脉血2 mL，离心取血清。间接免疫荧光法（IIF法）检测p-ANCA、ASCA、PAB和GAB抗体，试剂购自德国欧蒙公司。生物薄片中的基质分别为：乙醇固定的中性粒细胞、酿酒酵母菌、猴小肠组织和猴胰腺组织。操作按说明书要求，取25 μL稀释血清于加样板上，覆上生物薄片，室温孵育30 min，取出用PBS冲洗后浸泡5 min。将20 μL荧光标记的抗人球蛋白于另一反应平板，从PBS中取出生物薄片，按要求覆于反应平板，室温孵育30 min。取出生物薄片，予PBS冲洗后放入PBS中浸泡5 min封片，荧光显微镜观察。

1.3 统计学分析：运用SPSS 20.0统计学软件。用χ2检验行样本率的比较，分析抗体与IBD临床表型的关系。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 p-ANCA、ASCA、GAB和PAB与UC临床表型的关系：见表1。UC患者的性别、年龄、病程长短、临床类型、病变范围、病变程度与四种抗体的表达均无显著关系（P＞0.05）。

2.2 p-ANCA、ASCA、GAB和PAB与CD临床表型的关系：见表2。CD患者诊断年龄为A1、A2、A3组的p-ANCA阳性率分别是0.0%、0.0%、25.0%，组间比较差异有统计学意义（χ2=6.133，P=0.026）。CD患者疾病行为是B1、B2、B3组的ASCA阳性率比较差异有统计学意义（9.1% vs 20.0% vs 60.0%，χ2=5.813，P=0.042）。男性、女性CD患者GAB阳性率分别为40.0%、76.5%，二者比较差异有统计学意义（χ2=5.797，P=0.016）。CD患者p-ANCA、ASCA、PAB、GAB阳性与否与病变部位、程度、是否肛周病变、是否肠外表现及是否IBD相关手术均无关（P＞0.05）。

表1 p-ANCA、ASCA、GAB和PAB与UC临床表型的关系[n（%）]

表2 p-ANCA、ASCA、GAB和PAB与CD临床表型的关系[n（%）]

3 讨 论

炎症性肠病（IBD）的病因学及临床表现的复杂多样增加了其诊断难度。目前IBD的确诊及其部分临床表型的评估需依赖有创的内镜检查及病理活检等。血清学抗体能否作为IBD临床表型的评估指标仍有待进一步认识。近几年，血清学抗体ANCA、ASCA、GAB、PAB与IBD临床表型的关系日益受关注，但现有的研究结果差异较大。结合本研究结果，本文将对这4种抗体与IBD临床表型的关系一一进行讨论。

3.1 ANCA：p-ANCA阳性与否与UC、CD的临床表型是否相关或呈何种关系，目前研究结果不一[1-4]。本研究中，对UC患者而言，p-ANCA阳性与否与其临床表型、性别、诊断年龄、临床类型、病程长短、病变范围及病变程度均无关。对CD患者而言，本研究发现诊断时年龄＞40岁的患者p-ANCA阳性率高于≤40岁者，提示ANCA阳性的CD患者起病时间晚。本研究中p-ANCA阳性率与CD患者其他临床表型：性别、病变程度、疾病行为、病变部位、有无肠外表现、有无肛周病变及是否手术无关，这与多数研究结果相同。

3.2 ASCA：ASCA在CD患者中有较高的阳性率，其与CD临床表型的研究多见。国外多数研究表明，ASCA阳性与狭窄和穿孔相关[5]。本研究发现狭窄型或穿透型CD患者ASCA阳性率较高。既往研究报道：ASCA阳性的CD患者大多为幼年时起病[6]；ASCA阳性者肛周瘘管发生率高[7]；ASCA阳性者手术率高于阴性者[8]。而本研究发现ASCA阳性与CD患者诊断年龄、有无肛周病变、肠外表现及是否手术无关，显示ASCA不能作为CD评估预后、手术风险等的指标。对于ASCA阳性与病变程度是否相关，有研究[1]显示重度CD患者的阳性率明显高于轻中度者，提示ASCA阳性与其严重度相关。而另一研究显示CD患者经过治疗后、随着时间的推移，其ASCA的滴度仍保持稳定[9]，提示ASCA阳性与CD患者病变程度无关。本研究中ASCA与CD患者病变程度无关。本研究显示ASCA与UC任何临床表型均无关，可能与本研究UC患者ASCA阳性率低相关。

3.3 GAB：研究[3]显示GAB与UC患者的性别、年龄、病变部位、病变程度及有无肠外表现等临床表型均无关。本研究也未发现GAB与UC任何临床表型有关，但发现GAB与CD患者性别相关，女性CD患者GAB阳性率高于男性。未发现GAB阳性与CD患者其他临床表型相关。因GAB在IBD中的低阳性率，其与IBD临床表型的关系研究在国内少见，今后需更大样本、更多的研究，以进一步证实。

3.4 PAB：目前PAB阳性与CD患者的疾病行为是否相关或存在何种关系仍有争议，它们间呈正相关或负相关或无关，均有研究报道[10-11]。中外均有文献报道，PAB阳性与CD患者低发病年龄有关[3]。本研究提示PAB阳性与CD、UC患者任何临床表型均无关，PAB不能作为IBD临床表型的评估指标。

综上所述，免疫因素在IBD发病过程中起重要作用，血清学抗体对IBD亚型的判断以及与UC、CD特异性表现如狭窄、穿孔、肛周病变、是否肠外表现等的相关性各研究结果差异较大，仍需进一步研究血清学抗体与IBD临床表型的关系。