壮瑶药小槐花挥发油成分气相色谱-质谱联用分析

1.广西壮族自治区玉林市食品药品检验检测中心，广西 玉林 537000；2. 广西中医药大学，广西 南宁 530001；3.广西中医药研究院，广西 南宁 530022

小槐花Desmodiumcaudatum(Thunb.)DC. 为豆科山蚂蝗属植物，以根或全株入药。为广西壮、瑶民族常用药材，壮瑶名为棵文沾、瑶药名为握麻红，分布于广西、浙江、广东、湖北等地[1-3]。中医认为其味甘、苦，性凉，具有清热解毒、消积止痛、祛风透疹的功效，用于治疗感冒发热、疹出不透、脘腹疼痛、小儿疳积等病症[1-2]。壮医认为其味微甜、苦，性平，具有调龙路、通气道谷道、清热毒、止血的功效，用于治疗心头痛(胃痛)、白冻(泄泻)、贫痧(感冒)、月经不调、北嘻(乳痈)、喯疳(疳积)、狠尹(疖肿) 等病症[2]。瑶药认为其味苦，性凉，具有清热解毒、散瘀利水、消积、健脾开胃的功效，用于治疗咳嗽、吐血、水肿、小儿疳积、胃脘痛、跌打损伤、痈疮溃疡等病症[3]。近几年来对小槐花化学成分的研究主要集中在非挥发性化学成分。卢文杰等[4]从该药材中分离鉴定了12个化合物，分别为：豆甾醇、三十二烷酸、三十四烷酸、原儿茶酸、苦参碱、槐果碱、山柰酚、柠檬酚、异柠檬酚、桦木醇、5-羟基-N，N-二甲基色胺、N， N-二甲基色胺。吴瑶等[5]分离得到15个化合物，其中有豆甾醇、山柰酚、柠檬酚、黄槿酮D等化合物。成林等[6]用高效液相色谱法测定药材中山柰酚含量。陆国寿等[7]对小槐花的脂溶性成分进行了研究，分离了45个成分，确认了其中的29个成分，这些成分主要为脂肪酸类化合物，其中以十六烷酸、十八碳二烯酸、十八碳烯酸含量最高。现代药理学研究表明：小槐花水提物和醇提物具有明显的镇静催眠，镇痛，免疫增强和抗氧化作用，且毒性较低[8-9]。小槐花石油醚部位和乙酸乙酯部位对 α-葡萄糖苷酶活性抑制非常显著，具有开发治疗糖尿病降血糖药物的价值[10]。目前，关于该药材挥发油成分的研究鲜有报道。因此，该实验对小槐花的挥发油成分进行气相色谱-质谱联用分析研究，为合理利用小槐花植物资源及其深度研究开发提供实验依据。

1 仪器与试药

1.1 药材 小槐花药材采集于广西南宁，经广西中医药研究院卢文杰教授鉴定为豆科山蚂蝗属植物小槐花Desmodiumcaudatum(Thunb.)DC.的干燥全株。

1.2 仪器 Agilent 7890A-5975C 气相色谱-质谱联用仪(安捷伦科技有限公司)；挥发油提取器；ML3002电子分析天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)。

1.3 试剂 无水硫酸钠(分析纯，批号：20170321，广东光华科技股份有限公司)；乙酸乙酯(色谱纯，批号：UN1173，默克股份两合公司)，水为纯净水。

2 方法与结果

2.1 挥发油样品的制备[11-12]称取已粉碎至20目的小槐花药材粉末约100 g，置于2000 mL圆底烧瓶中，加10倍量蒸馏水，浸泡1 h后按 2015年版《中国药典》一部附录方法(不加二甲苯)进行水蒸气蒸馏，至馏出液无油珠止(约6 h)，得到有特殊香味的淡黄色油状物，用乙酸乙酯溶解并收集，以无水硫酸钠干燥，备用。

2.2 气相色谱-质谱联用分析条件

2.2.1 色谱条件 石英毛细管柱DB-1MS毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)，程序升温：起始温度60 ℃，保持1 min，以5 ℃/min升至250 ℃，保持5 min。载气为He(≥99.99%)，柱流量为1.0 ml/min，进样口温度为220 ℃，分流比为20∶1，进样量为1 μL，溶剂延迟3.0 min。

2.2.2 质谱条件 EI源，电子能量为70 eV，离子源温度为230 ℃，四级杆温度为150 ℃，质谱接口温度为280 ℃，全扫描(Scan)采集模式，质量范围m/z 50～400 amu，扫描间隔0.2 s。

2.3 测量方法 取“2.1”项下制备样品，加乙酸乙酯稀释，用无水硫酸钠除去水分，0.45 μm 微孔滤膜过滤， 按“2.2.1”项下色谱条件分析，测定小槐花挥发油的总离子流图，并通过Nist.08质谱数据系统检索，确定各色谱峰代表的化学成分[13]。

2.4 GC-MS分析结果 所得的色谱和质谱信息经数据处理系统与其内存谱库(Nist.08)自动检索和解析，并用峰面积归一法测定了各化学成分在挥发油中的相对百分含量[14]。由图1可见，从小槐花中鉴定了其中46个成分，占挥发油总量的89.50%，相对含量大于2%的有：薄荷脑(12.06%)、二苯甲酮(4.52%)、α-毕橙茄醇(3.92%)、邻苯二甲酸二异丁酯(8.15%)、己酸丁酯(5.66%)、棕榈酸(24.40%)、亚油酸(5.17%)、油酸(2.87%)(注：各峰的匹配度均大于80)。见表1。

表1 小槐花挥发油成分分析结果

续表 表1 小槐花挥发油成分分析结果

续表 表1 小槐花挥发油成分分析结果

3 讨论

小槐花是广西壮族和瑶族特有的一味重要的民族药，具有清热解毒、祛风利湿之功效，用于复方中药治疗胃肠道疾病有较好的疗效[9]。小槐花中的化学成分多样，包括黄酮类、菇类、生物碱类、甾体类等类型的化合物，具有消炎抗菌、抗氧化、保肝和抗肿瘤活性等作用[10]。

本实验通过采用水蒸气蒸馏法对小槐花挥发油成分分析鉴定及相对含量测定，从检测结果可以看出，已鉴定的化学成分类型主要是脂肪族类、芳香族类、萜类。其中，薄荷脑在医药上用作刺激药，外用可以消炎，止痛，止痒，驱赶蚊虫，促进血液循环，消肿等；内服以复方制剂中可缓解局部炎症及治疗感冒，并有健胃，驱风作用[15]。亚油酸具有降低血脂、软化血管、降低血压、促进微循环的作用，可预防或减少心血管病的发病率，特别是对高血压、高血脂、心绞痛、冠心病、动脉粥样硬化、老年性肥胖症等的防治极为有利，能起到防止人体血清胆固醇在血管壁的沉积，有“血管清道夫”的美誉，具有防治动脉粥样硬化及心血管疾病的保健效果[16]。二者均有着较高的开发利用价值。本研究可为建立小槐花挥发油提取方法提供参考，为阐述小槐花的药效奠定了物质基础。