妊娠滋养细胞疾病患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平变化及临床意义

刘亚敏，陈燕，黎元莉

(三亚市人民医院，海南三亚 572000)

妊娠滋养细胞疾病主要包括葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛癌和部分少见的胎盘部位滋养细胞肿瘤。有数据显示，大约15%的良性葡萄胎患者可进展成为侵蚀性葡萄胎或子宫外转移，并可能经过侵蚀性葡萄胎进展成为绒毛癌[1，2]。目前，虽然妊娠滋养细胞疾病的治疗已取得较为满意的疗效，但其发病机制、恶变因素仍未得到明确阐明[3]。变异型细胞间黏附分子(CD44v6)是一种具有多结构、多功能的细胞表面黏附分子，在机体的多种生理病理过程中均有参与，近年来国内外均有报道指出，其对妊娠的维持和发展可产生一定影响作用[4，5]。此外，有学者指出，由于基质金属蛋白酶(MMP)系统在细胞外基质的降解中发挥着重要作用，而滋养层细胞和肿瘤细胞的具有类似的增值、分化、侵袭能力，并认为MMP系统可能在滋养细胞的生理病理过程中有所参与[6，7]。因此，本研究旨在探讨在妊娠滋养疾病患者中血清CD44v6、MMP-2、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)的表达，并分析其对葡萄胎恶变的预测价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2013年10月～2015年10月本院收治妊娠期滋养疾病患者60例(观察组)，年龄23～45(31.79±5.72)岁，其中葡萄胎47例，侵蚀性葡萄胎9例，绒毛膜癌4例。60例患者均符合《妇产科病理学》[8]的相关诊断标准并通过病理学切片检查确诊，同时排除合并其他恶性肿瘤、未完成随访及临床资料不完整者。另选择同期在本院体检健康妇女30例作为对照组，年龄22～47(32.03±5.40)岁，均无心、肝、肾、肺等功能障碍，妇科检查无异常；其性别、年龄构成与观察组比较无统计学差异(P均>0.05)。

1.2 检测方法 采集两组受试者清晨空腹静脉血5 mL，室温下静置30～60 min后以5 000 r/min离心10 min，提取上层血清置于冷冻箱内储存进行检测。血清CD44v6的检测使用酶联免疫吸附法，试剂盒购于美国Bender Med Systems公司；血清MMP-2、TIMP-2的检测使用放射免疫法，试剂盒购于北方免疫试剂研究所。操作方式均严格参照试剂盒说明书实施。

2 结果

2.1 不同类型妊娠滋养细胞疾病患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2变化 观察组不同类型妊娠滋养细胞疾病患者及对照组间血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平均有统计学差异(P均<0.05)。葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛癌患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平呈逐渐升高状态，组间比较均有统计学差异(P均<0.05)。见表1。

表1 观察组及对照组血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平比较±s)

注：与对照组比较，△P<0.05；与绒毛膜癌比较，#P<0.05；与侵蚀性葡萄胎比较，*P<0.05。

2.2 葡萄胎恶变和未恶变者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平变化 47例葡萄胎患者随访2年，参照《妇产科病理学》[8]诊断标准，发生恶变10例，未发生恶变37例，葡萄胎恶变患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平均高于葡萄胎未恶变患者(P均<0.05)。见表2。

表2 葡萄胎恶变和未恶变者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平比较±s)

注：与未恶变比较，*P<0.05。

2.3 葡萄胎恶变患者的危险因素 将葡萄胎是否恶变作为因变量，血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2作为协变量，Logistic回归分析结果显示血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平升高均是葡萄胎恶变的危险因素(P均<0.05)。见表3。

表3 葡萄胎恶变危险因素的Logistic回归分析

2.4 葡萄胎患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2相关性 Pearson直线相关性分析结果显示，血清CD44v6水平与血清MMP-2、TIMP-2水平均呈正相关(r分别为0.721、0.882，P均<0.05)。

3 讨论

恶性肿瘤细胞最重要的生物学特征之一是细胞和细胞之间、细胞和细胞外介质之间出现黏附异常，这种黏附异常可使肿瘤细胞由原发部位脱落并向周围组织转移、侵袭。CD44是近年来备受学者关注的细胞表面黏附分子，作为高度异质性的单链跨膜糖蛋白，其广泛分布于机体各个部位，可与透明质酸等多种配体相互结合。CD44主要有标准型(CD44s)和变异型(CD44v)两种类型，后者由于选择性拼接方式的不同又包含着多种类型，其中作用最为关键的则是CD44v6[9，10]。CD44v6最早在动物实验中发现。将大鼠转移性胰腺癌细胞株的CD44vDNA转染到非转移的BSP73AS癌细胞株后，结果显示后者出现了转移，经检查发现CD44v6是转移性胰腺癌细胞株中表达最强的CD44v[11]。Zavros[12]进一步研究发现，在胃癌、肠癌、肝癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中均检测出CD44v6不断升高，且和肿瘤的转移、侵袭之间存在着密切联系。但目前关于CD44v6在妊娠滋养疾病中的作用相关报道仍较少。本研究显示，在葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛癌患者中，CD44v6的表达呈不断增长趋势，且葡萄胎恶变患者CD44v6的表达明显比未恶变的患者高。滋养细胞的浸润过程和肿瘤十分相似，CD44v6表达的增加可导致滋养细胞浸润过度；CD44v6可与透明质酸等配体相结合，获得黏附性，更利于从水泡样胎块中获得生长因子，进一步促使滋养细胞的恶性增长和血管内皮细胞的黏附，加重疾病严重程度。

胎盘滋养细胞疾病的共同点是滋养层出现异常。MMPs是一组对细胞外介质具有降解作用高度保守的蛋白水解酶，可通过调节黏附、激活等方式参与体内各种生理病理过程，尤其是肿瘤的转移和侵袭，其中MMP-2是分布最为广泛的类型[13，14]。而TIMPs可与MMPs之间发生非共价结合，对MMPs发挥特异性抑制作用。在机体正常状态下，MMPs和TIMPs处于相对平衡的状态，维持着细胞外介质的更新和自稳功能；但若细胞内环境被打破后，这种平衡也会被随之打破，加速基质降解过程[15]。本研究显示，妊娠滋养细胞疾病患者血清MMP-2、TIMP-2水平正常对照组明显升高，且葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌呈逐渐升高趋势。葡萄胎恶变患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平均高于葡萄胎未恶变患者。患者血清MMP-2、TIMP-2水平的不断升高，可通过降解细胞外介质等途径促使滋养细胞不断向子宫内膜侵袭，导致滋养细胞出现过度增殖、增生，促进疾病不断进展。陆瑞等[16]研究也指出，MMP-2、TIMP-2在滋养细胞疾病中出现高表达的原因和滋养细胞的高侵袭能力相关，并认为二者是滋养细胞肿瘤浸润转移的重要分子标志物。本研究Pearson直线相关性分析显示，血清CD44v6水平与血清MMP-2、TIMP-2水平均呈正相关，三者相互协同共同参与妊娠滋养细胞疾病的发生和发展。因此，研究妊娠滋养细胞疾病患者血清CD44v6和MMP-2、TIMP-2水平变化可为早期预测葡萄胎恶变提供新的思路。