趋化因子CXCL12及CXCR4在子宫内膜癌组织中mRNA及蛋白表达水平临床研究

陈晓璐　赵秀敏

[摘要] 目的 通過对比分析趋化因子CXCL12及CXCR4在子宫内膜癌组织中mRNA及蛋白表达水平，为治疗子宫内膜癌提供理论依据。 方法 选取自2014年6月～2017年6月本科室接诊的100例患者为研究对象。患者年龄为29～77岁，平均（56.8±9.8）岁。应用组织芯片技术、免疫组化法和RT-PCR法检测患者CXCL12和CXCR4表达水平。观察记录患者的姓名、年龄等基本信息，记录患者趋化因子CXCL12及CXCR4表达水平等指标。 结果 CXCL12在子宫内膜癌组患者体内阳性表达率76.8%，明显高于不典型内膜增生组、单纯性内膜增生组和正常内膜组患者阳性表达率18.8%、50.0%、35.7%，差异有统计学意义（P<0.05）；CXCR4在子宫内膜癌组患者体内阳性表达率71.4%，明显高于不典型内膜增生组、单纯性内膜增生组和正常内膜组患者阳性表达率56.3%、42.9%、28.6%，差异有统计学意义（P<0.05）；CXCL12 mRNA在正常内膜组和子宫内膜癌组患者体内表达水平分别为（0.587±0.022）、（1.132±0.041），差异有统计学意义（P<0.05）；CXCR4 mRAN在正常内膜组和子宫内膜癌组患者体内表达水平分别为（0.253±0.035）、（0.522±0.258），差异有统计学意义（P<0.05）。CXCL12表达与患者的肿瘤临床分期、年龄等无关，差异无统计学意义（P>0.05），CXCR4的表达与患者的肿瘤临床分期密切相关，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 CXCL12及CXCR4在子宫内膜癌患者体内表达水平明显升高，CXCR4表达与患者肿瘤临床分期密切相关，为子宫内膜癌患者提供准确的治疗时机，同时，为广大医护人员积累了经验，值得临床广泛推广和应用。

[关键词] CXCL12；CXCR4；子宫内膜癌；mRNA

[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）13-0028-05

Clinical study of mRNA and protein expression level of chemokines CXCL12 and CXCR4 in endometrial carcinoma

CHEN Xiaolu ZHAO Xiumin

Department of Obstetrics and Gynecology， Taizhou First People 's Hospital， Taizhou 318020， China

[Abstract] Objective To provide a theoretical basis for the treatment of endometrial cancer by comparing the mRNA and protein expression levels of CXCL12 and CXCR4 in endometrial carcinoma. Methods A total of 100 patients admitted to the department from June 2014 to June 2017 were selected as the study subjects. Patients were at the age of 29-77 years， mean age（56.8±9.8） years. The expression of CXCL12 and CXCR4 was detected by tissue microarray， immunohistochemistry and RT-PCR. Observed and recorded the patient's name， age and other basic information， recorded patient treatment efficacy. Results The positive expression rate of CXCL12 in endometrium group was 76.8%， which was significantly higher than that in atypical endometrial hyperplasia group， simple endometrial hyperplasia group and normal endometrium group whose positive expression rates of CXCL12 were 18.8%， 50.0%， 35.7% respectively， the differences were statistically significant（P<0.05）. The positive expression rate of CXCR4 in endometrium group was 71.4%， which was significantly higher than that in atypical endometrial hyperplasia group， simple endometrial hyperplasia group and normal endometrium group whose positive expression rates of CXCR4 were 56.3%、42.9%、28.6% respectively， the differences were statistically significant（P<0.05）. The expression levels of CXCL12 mRNA were （0.587±0.022） and （1.132±0.041） in the normal endometrium group and the endometrial carcinoma group respectively（P<0.05）. The expression levels of CXCR4 mRNA were （0.253±0.035） and （0.522±0.258） in the normal endometrium group and endometrial cancer group respectively， and the difference was statistically significant（P<0.05）. The expression of CXCL12 was not related to the clinical stage and age of the tumor， and the difference was not statistically significant（P>0.05）. The expression of CXCR4 was closely related to the clinical stage of tumor， and the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The expression of CXCL12 and CXCR4 in patients with endometrial carcinoma was significantly increased. The expression of CXCR4 was closely related to the clinical stage of the tumor which provided accurate timing for the treatment of patients with endometrial cancer. At the same time， the majority of medical staff accumulated abundant experience from and these indicators can be widely applied.

[Key words] CXCL12； CXCR4； Endometrial cancer； mRNA

子宫内膜癌是一种发生于女性子宫内膜上皮、严重影响女性身体健康的恶性肿瘤，发病率居各种女性常发恶性肿瘤第6位，死亡率居女性常发各种恶性肿瘤第5位[1]。近年来，随着人们寿命的延长和外源性雌激素的大量应用，子宫内膜癌在全世界范围内的发病率逐步提高，尤其是欧美国家，其发病率已达女性恶性肿瘤的第一位，给广大的女性带来严重伤害[2]。子宫内膜癌发病隐匿，一般患者发现时均处于胃癌晚期，给治疗带来极大困难。趋化因子是细胞因子家族中的一员，CXCL12是一种参与神经元细胞形成、B淋巴细胞生成、心血管内皮细胞的发展和骨髓髓系细胞生成的趋化因子[3]。CXCR4是CXCL12的特异性受体，主要在中枢神经细胞、血液和免疫细胞表达。趋化因子CXCL12和它的受体CXCR4构成的CXCL12/CXCR4生物学轴在肿瘤细胞的侵袭、转移、分化等方面有着重要的作用[4]。目前，国内外的医学工作者投入大量精力和时间来研究子宫内膜癌的诊断、治疗及预后，虽然取得一定的成果，但是预后结果仍然距人们要求有较大差距，5年生存率仅为17%左右[5]。为更深入分析了解趋化因子CXCL12及CXCR4在子宫内膜癌组织中mRNA及蛋白表达水平，本次采取控制单一变量方法进行研究分析，为诊断治疗子宫内膜癌提供新的依据，现将结果报道如下。

1 对象与方法

1.1研究对象

选取自2014年6月～2017年6月本科室接诊的100例患者为研究对象，其中确诊为子宫内膜癌并在本科室实施治疗的患者56例，单纯性内膜增生患者14例，不典型内膜增生患者16例，正常内膜14例。患者年龄29～77岁，平均（56.8±9.8）岁。<50岁的35例，≥50岁的65例。各组患者的年龄、身高、体重和病程等临床资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性，见表1。

1.2 纳入、排除标准

纳入标准：确诊为子宫内膜癌患者；未患有影响本次研究的其他疾病；入院之前未进行放疗、化疗、激素等治疗；同意参加本次研究。

排除标准：患者诊断、治疗等病历资料不全者；手术之前经评估肿瘤无法完整切除的患者；无法参与研究者；中途退出研究者[6]。

1.3研究方法

应用组织芯片技术和免疫组化法检测正常内膜、子宫内膜癌、单纯性内膜增生和不典型内膜增生四组患者CXCL12和CXCR4表达水平，应用RT-PCR法检测子宫内膜癌和正常内膜患者CXCL12和CXCR4 mRNA表达水平。制作的芯片均由具有10年以上阅片经验的医师阅片。当患者细胞膜内或细胞质内出现棕黄色着色颗粒，即为CXCL12和CXCR4阳性表达。

1.4 观察指标

观察记录患者的姓名、年龄、身高、体重、病程、肿瘤部位等基本信息，密切观察患者的病情变化，记录患者手术过程中出现的不良反应、手术时间等情况，及时监测患者生化指标，记录患者CXCL12和CXCR4等指标。

1.5统计学方法

采用SPSS 21.0软件对数据资料进行统计学分析。计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CXCL12在各组患者中的表达情况

CXCL12在子宫内膜癌组患者体内阳性表达率为76.8%，明显高于不典型内膜增生组、单纯性内膜增生组和正常内膜组患者的阳性表达率18.8%、50.0%和35.7%，差异有统计学意义（P<0.05），不典型内膜增生组CXCL12阳性表达率低于正常内膜组患者阳性表达率，差异有统计学意义（P<0.05），单纯性内膜增生组CXCL12阳性表达率与不典型内膜增生组、正常内膜组患者阳性表达率差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

2.2 CXCR4在各组患者中的表达情况

CXCR4在子宫内膜组患者体内阳性表达率71.4%，明显高于不典型内膜增生组、单纯性内膜增生组和正常内膜组患者阳性表达率56.3%、42.9%、28.6%，差异有统计学意义（P<0.05），不典型内膜增生组患者的CXCR4阳性表达率与正常内膜组者阳性表达率差异无统计学意义（P>0.05），见表3。

2.3 CXCL12在子宫内膜癌组患者中的表达情况及与患者病理关系的分析

CXCL12表达情况与患者肿瘤临床分期、年龄等病理情况无关，差异无统计学意义（P>0.05），见表4。

2.4 CXCR4在子宫内膜癌组患者中的表达情况及与患者病理关系的分析

CXCR4表达情况与患者肿瘤临床分期密切相关，差异有统計学意义（P<0.05），见表5。

2.5 CXCL12 mRNA表达情况分析

CXCL12 mRNA在正常内膜组和子宫内膜癌组患者体内表达水平分别为（0.587±0.022）、（1.132±0.041），差异有统计学意义（P<0.05），见表6。

2.6 CXCR4 mRNA表达情况分析

CXCR4 mRNA在正常内膜组和子宫内膜癌组患者体内表达水平分别为（0.253±0.035）、（0.522±0.258），差异有统计学意义（P<0.05），见表7。

表7 CXCR4 mRNA表达情况分析（x±s）

3讨论

近年来，我国癌症发病人数及发病速度均在不断增多和加快[7-8]。癌症已经成为严重影响和制约我国人民身体素质发展的重要因素。影响癌症发展的主要有肿瘤细胞分化程度、肿瘤细胞浸润深度、淋巴结转移程度等[9-11]。及早发现，及早治疗，是能有效治疗和控制癌症的最为有效的方法[12-14]。但是，一般情况下，癌症患者发现患病即为癌症中晚期，给治疗带来极大困难。尤其是子宫内膜癌，前期发现较难，患者一般在偶然检查中发现，给患者及家属带来巨大的精神压力和经济负担[15-17]。能尽快而且很方便地诊断癌症已是广大医护人员和患者的最大呼声。近几年，大量的医护人员通过检测CXCL12及CXCR4在子宫内膜癌组织中mRNA及蛋白表达水平来诊断分析子宫内膜癌及研究癌细胞的迁移变化[18]。CXCR4和CXCL12之间具有高度的特异性和亲和力，在肿瘤细胞转移中发挥着重要的作用[19-20]。随着科学技术和医学水平的发展和提高，人们对癌症的认识正在逐步加深。目前，国内外的大量医护人员和科研机构仍然在对子宫内膜癌的诊断、发展、治疗和预后进行研究，力争早日有突破性的进展，为广大患者带来福音。随着人们研究的深入和重视程度的加深，人们必将找到一种科学的安全的诊断治疗方法，为子宫内膜癌患者及其家属减轻精神压力和经济负担。

本次研究表明，患者的身高、体重、年龄、病程等分布差异无统计学意义，对子宫内膜癌细胞的分化、迁移等影响不明显。CXCL12在子宫内膜癌组患者体内阳性表达率76.8%，明显高于不典型内膜增生组、单纯性内膜增生组和正常内膜组患者阳性表达率18.8%、50.0%、35.7%，不典型内膜增生组CXCL12阳性表达率低于正常内膜组患者阳性表达率16.9个百分点，单纯性内膜增生组CXCL12阳性表达率与正常内膜组患者阳性表达率无明显差异。CXCL12与CXCR4形成的生物学轴，对细胞的迁徙、浸润以及器官发育有重大影响。CXCR4在子宫内膜癌组患者体内阳性表达率71.4%，明显高于不典型内膜增生组、单纯性内膜增生组和正常内膜组患者阳性表达率56.3%、42.9%、28.6%，不典型内膜增生组患者CXCR4阳性表达率与正常内膜组者阳性表达率无明显差异，通过诊断检测CXCL12与CXCR4的含量水平，能有效的诊断患者子宫内膜癌病情发展情况。CXCL12表达情况与患者肿瘤临床分期、年龄等病理情况无关，CXCR4表达，与患者肿瘤临床分期密切相关，肿瘤分期越深，其肿瘤细胞转移越多、越快，其CXCL12与CXCR4水平会有明显波动，会对肿瘤病情有较明显的预示作用。CXCL12 mRNA在正常内膜组和子宫内膜癌组患者体内表达水平分别为（0.587±0.022）、（1.132±0.041），具有明显差异，随着子宫内膜癌症的发展，患者体内CXCL12 mRNA水平明显升高，肿瘤细胞通过人体机体作用，刺激患者细胞，致使 CXCL12 mRNA高表达，这也是诊断肿瘤病情的重要标志。CXCR4 mRNA在正常内膜组和子宫内膜癌组患者体内表达水平分别为（0.253±0.035）、（0.522±0.258），具有明显差异，与国内部分专家的研究结果基本一致[21]。

综上所述，CXCL12及CXCR4在子宫内膜癌患者体内表达水平明显升高，CXCR4表达与患者肿瘤临床分期密切相关，在一定程度上能准确反映患者肿瘤状态及预后，为子宫内膜癌患者提供准确的治疗时机，给患者及家属减轻精神和经济负担，同时为广大医护人员积累了经验，值得广泛推广和应用。

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（收稿日期：2018-01-13）