安健 ,陈百尧 ,路吉坤 ,郑义 ,唐兴本 ,伏光辉 ,张祖禹
条斑紫菜是黄渤海沿海主要栽培种类,而江苏连云港是主产区,从苗种生产、海上养殖到紫菜加工,形成了一条完整的产业链,产业商业化程度较高[1-3]。条斑紫菜壳孢子作为紫菜叶状体的苗源是人工育苗的关键,壳孢子的质量、放散的数量、附着效果直接影响到紫菜育苗效果,从而对紫菜苗种质量和养殖产量造成影响。因此开展对紫菜采苗期间,壳孢子放散和附着研究非常必要。
2017年9月28日—10月20日,在连云港市连云区宏瑞紫菜育苗场条斑紫菜采苗期间,以贝壳丝状体作为研究材料,同期分别开展了对壳孢子的放散量和附着情况研究,比较分析了温度和海水盐度变化对壳孢子放散的影响,以及对壳孢子附着的影响,为条斑紫菜采苗生产提供理论支撑。
收集长势良好的孢子囊枝比例高(80%以上)的文蛤壳,将贝壳刷洗干净,用新鲜的灭菌海水置于24℃下先培养2d,光强50~60μmol/(m2·s),光周期10L/14D,海水盐度28,pH值为 8.0,日换海水温差±0.1℃。将贝壳敲成面积约为2cm2的小块随机取贝壳块,称重25g置于500mL的烧杯中,加海水300mL,用于以下试验。
每日7:00通过升降温处理,温度变化设置为14℃、16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃七个温度梯度,11:00分别统计各试验组壳孢子放散量,每试验组设3个平行,连续测定10d。
每日7:00将预先培养好的贝壳,分别置于盐度为 20、22、24、26、28、30、32 七个盐度梯度的灭菌海水中,于11:00分别统计各试验组壳孢子放散量,每试验组设3个平行,连续测定10d。
将用于壳孢子采苗的维尼纶网绳剪成2cm长的网绳,于每日7:00分别置于14℃、16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃七个温度梯度处理组,11:00分别统计各试验组壳孢子附着量,在10×10倍的显微镜下对网绳上附着的壳孢子随机选取10个视野进行计数,每试验组设3个平行,连续测定10d。
将用于壳孢子采苗的维尼纶网绳剪成2cm长的网绳,于每日 7:00 分别置于 20、22、24、26、28、30、32七个盐度梯度处理组,11:00分别统计各试验组壳孢子附着量,在10×10倍的显微镜下对网绳上附着的壳孢子随机选取10个视野进行计数,每试验组设3个平行,连续测定10d。
如图1所示,在10d试验期内,16℃、18℃、20℃3个温度组壳孢子放散量相对较大,均有2个明显的壳孢子放散高峰,18℃、20℃温度组高峰期分别出现在第3天和第7天,16℃温度组高峰期分别出现在第3天和第8天,其中18℃温度组壳孢子放散效果最好,其余温度组壳孢子放散量相对较少,也无明显的放散高峰。
图1 温度变化对壳孢子放散的影响
如图2所示,在10d试验期内,盐度28、30、32,3个盐度组壳孢子放散量相对较大,出现2个明显的壳孢子放散高峰,高峰期均出现在第3天和第7天,其余盐度组壳孢子放散量相对较少,也无明显的放散高峰。
图2 海水盐度变化对壳孢子放散的影响
如图 3所示,在10d试验期内,16~22℃ 4个温度处理组壳孢子均能正常附着,其中18℃、20℃2个温度组壳孢子附着量相对较大,出现较为明显的壳孢子附着高峰,壳孢子附着量显著高于其他温度处理组,14℃、24℃、26℃温度组壳孢子附着量均较低,也无明显的附着高峰。
如图 4所示,在10d试验期内,7个盐度处理组壳孢子均能正常附着,其中盐度28、30、32,3个盐度组壳孢子附着量相对较大,出现较为明显的壳孢子附着高峰,壳孢子附着量显著高于其他盐度处理组,盐度20、22盐度组壳孢子附着量较低。
图3 温度变化对壳孢子的附着影响
图4 海水盐度对壳孢子附着的影响
在紫菜栽培生产中,壳孢子采苗是重要环节之一,现阶段,条斑紫菜采苗生产主要还是以采集贝壳丝状体放散出的壳孢子作为种苗,因此,壳孢子的放散量和附着程度是紫菜采苗的基础,直接影响到海区栽培生产的顺利进行。
杨玲等[4]较为系统地研究了温度对条斑紫菜贝壳丝状体生长发育的影响,表明20℃条件下最适宜丝状体壳孢子放散和附着。任国忠等[5]研究表明条斑紫菜壳孢子放散和附着适宜温度为15~20℃。本试验通过设置7个温度组比较研究了不同温度对壳孢子放散和附着的影响。结果表明,18℃、20℃两个温度适宜壳孢子大量放散和附着,且在试验阶段内,可出现2次明显的壳孢子放散和附着高峰期,其中18℃温度组壳孢子放散和附着效果最好,与杨玲、任国忠等的研究结果基本一致。
海水盐度也是壳孢子放散与附着重要环境因素之一,王洪斌等[6]研究认为,壳孢子放散和附着适宜的盐度范围是23~32之间。崔广法等[7]认为盐度26~32范围内适宜壳孢子放散和附着。本试验研究发现,海水盐度在28~32盐度范围内最适宜贝壳丝状体壳孢子放散和附着,且会出现明显的壳孢子放散和附着高峰期,盐度高于或低于此范围,均会对壳孢子放散和附着产生一定的抑制作用。
条斑紫菜壳孢子放散和附着方面的研究报道较多,但多数局限于实验室模拟自然环境条件展开研究[8-9]。该试验在条斑紫菜采苗阶段,结合生产实际情况系统的研究了温度和海水盐度变化对条斑紫菜壳孢子放散和附着影响,为条斑紫菜采苗阶段育苗场环境因子的调控提供了一定的数据支撑,便于紫菜采苗有序开展。