盈江县高山大白菜根肿菌生理小种鉴定及抗源筛选

尹俊龙钱正益郑宇峰赵从新岳艳玲*

（1云南农业大学园林园艺学院，云南昆明 650201；2景东彝族自治县农业试验站，云南普洱 676299；3德宏州农业技术推广中心，云南芒市 679300）

大白菜根肿病是由芸薹根肿菌（Plasmodiophora brassicae Woron.）侵染所引起的一种世界性土传病害。该病菌最早发现于欧洲，目前流行于主要十字花科作物产区（伍文宪 等，2015）。根肿菌的休眠孢子能够在土壤中存活8 a以上（谭翀和岳艳玲，2013），一旦被侵染将很难再进行十字花科作物的种植。根肿菌自20世纪末传入我国，不断蔓延，目前已有多个省市土壤受到污染，损失惨重（田雅琳，2015）。近年来，随着对根肿病防控方法的深入研究，发现施用生石灰调节土壤pH能够在一定程度上减弱根肿病的为害（班静洁，2014），施用枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）生物制剂能够抑制土壤中90%的根肿菌孢子萌发（彭丽莎，2015），施用化学农药氟啶胺（福帅得）防治效果可以达到80%以上（王昌玉 等，2004）。但最为经济有效的绿色防控方法是使用抗病品种。由于根肿菌在不同的地区以不同致病性和不同类型的生理小种形式存在，造成抗病品种在不同地区栽培后所表现出的抗性也存在显著差异（谭翀和岳艳玲，2013）。盈江是云南省德宏州高山大白菜的重要产区，但土壤被根肿菌污染后生产受到严重威胁，产量损失严重，几近绝收，因此筛选适宜盈江地区栽培的抗病品种尤为重要。为了保障该地区大白菜生产的需求，对该地区根肿菌进行生理小种鉴定和抗源筛选，以期为盈江地区大白菜生产和新品种选育提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

根肿菌采自云南省德宏州盈江县油松岭大白菜产区。

Williams鉴别寄主4份，即2个结球甘蓝Jersey Queen、Badger Shipper和 2个 芜 菁 甘 蓝Laurentian、Wilhelmsburger，源自沈阳农业大学。

从国内外引进抗根肿病大白菜品种18份，品种名称及来源见表2；对照为感病品种鲁春白1号。

1.2 试验方法

试验于2016年8～10月在云南农业大学园林园艺学院蔬菜基地进行。利用Williams鉴别系统，采用菌土法（司军 等，2003）进行根肿菌生理小种鉴定和大白菜品种抗性鉴定。菌土的孢子浓度为1×107个·g-1（周永红 等，2007），每个品种接种100株，40 d后调查发病情况，计算发病率和病情指数。

根据十字花科作物根肿菌苗期病害分级标准（侯明生和蔡丽，2014）对不同品种大白菜植株发病情况进行鉴定和分级，分级标准：0级，根部无肿瘤；1级，侧根有小肿瘤；3级，主根肿大，其直径小于2倍茎基部；5级，主根肿大，其直径是茎基部的2～3倍；7级，主根肿大，其直径是茎基部的3～4倍；9级，主根肿大，其直径是茎基部的4倍以上或肿大的根部变黑。计算病情指数，病情指数=0记为免疫，病情指数＜10记为抗病，病情指数≥10记为感病。

2 结果与分析

2.1 盈江根肿菌生理小种鉴定

Williams 鉴别系统的4个寄主接种盈江根肿菌40 d后，病情指数分别为21、33、28、30，均大于10，且各寄主的发病率均为100%（表1）。根据Williams鉴别系统的分类标准，盈江根肿菌为4号生理小种。

表1 盈江根肿菌生理小种鉴定结果

2.2 大白菜品种抗性鉴定

从国内外引进的18个抗根肿病大白菜品种接种盈江根肿菌后，发病率和病情指数明显不同（表2）。其中尚品、CR铁甲1号、抗根911、泰能CR119、倍盛CR12、新抗根等6个品种的发病率和病情指数均为0，对盈江根肿菌表现免疫，占供试品种的33.3%；德高CR117、中华白菜王的发病率分别为17%和11%，病情指数分别为9.7和7.7，对盈江根肿菌表现抗病，占供试品种的11.1%；其他10个品种和感病对照鲁春白1号的发病率均为100%，病情指数在38.8～65.7之间，表现感病。

表2 18个抗根肿病大白菜品种对盈江根肿菌抗性鉴定结果

3 结论与讨论

3.1 盈江根肿菌是更复杂的根肿菌

本试验中，Willimas鉴别系统的4个寄主接种盈江根肿菌后全部发病，发病率均为100%；病情指数分别为21、33、28、30，均大于10，鉴定盈江根肿菌为4号生理小种。但是，抗4号生理小种的大白菜品种荣耀、亚菲4号和秋冠在接种湖北枝江和山东青岛2个地区的4号生理小种后均表现抗病（曾令益 等，2017），而在本试验中荣耀、秋冠和亚菲4号接种盈江根肿菌后的发病率均为100%，病情指数均大于10，表现为感病，说明盈江根肿菌4号生理小种与湖北枝江和山东青岛根肿菌4号生理小种不同，盈江根肿菌致病性更强，可能是Willimas鉴别系统鉴别不到的生理小种，也可能是含有多个生理小种的混合菌，具体小种组成还需要进一步进行单孢分离侵染鉴定。

3.2 盈江根肿菌抗病种质资源相对丰富

本试验引进的18个抗根肿病大白菜品种接种盈江根肿菌后，尚品、CR铁甲1号、抗根911、泰能CR119、倍盛CR12、新抗根等6个品种的发病率和病情指数均为0，对盈江根肿菌表现免疫；德高CR117、中华白菜王的发病率分别为17%和11%，病情指数分别为9.7和7.7，对盈江根肿菌表现抗病。说明这8个品种可能含有抗盈江根肿菌的抗性基因，可利用这些遗传资源，针对该地区特殊的生理小种，将抗病基因转育到适宜生态类型品系中，培育符合当地栽培园艺性状需求的大白菜抗病新品种。

3.3 筛选符合当地生产需求的大白菜新品种

盈江县是云南省德宏州高山大白菜重要产区，已有20 a的栽培历史，大白菜夏秋季生产是当地农民创收的重要项目。随着土壤被根肿菌污染，根肿病发生为害越来越严重，给当地大白菜生产造成了巨大的损失。近几年来，德高CR117在该地区进行推广应用，初步取得了较好的防控效果。但是，盈江地区主要是进行夏秋季栽培，温度高、雨水大，德高CR117软腐病的发生率为10%～13%，而且该品种球形偏大，不太符合当地市场需求。本试验筛选出6个对盈江根肿菌表现免疫的大白菜品种，可通过进一步试种，对其在当地的表现进行综合评价，以筛选出适宜当地气候条件和市场需求的抗病品种，丰富盈江地区大白菜的品种类型。