包华琼 孙 岚 杨学妞 丁 杰 马世原 杨 柳 徐小鸥
重庆市人口和计划生育科学技术研究院附属医院,重庆市出生缺陷与生殖健康重点实验室(重庆 400020)
随着国家免费孕前优生筛查工作的深入开展,育龄人群在怀孕前对自身生殖健康状况关注度增强,怀孕前自愿到医院进行孕前检查育龄夫妇越来越多。男性作为为子代提供一半遗传信息的生育主体,他们的生殖健康也越来越受到重视。生育前,对男性进行生殖系统体格检查和精液质量检查,了解男性的生殖健康状况,对男性生育力进行健康评估,越来越被育龄夫妇所接受。为了解重庆市孕前男性生殖健康现状及其影响因素,我们对来我院生殖中心自愿要求孕前检查的男性为研究对象,通过健康调查表询问、体格检查和精子质量检测方式,评估我市孕前男性精液质量现状及影响因素,为我市育龄夫妇生育前的正确指导提供参考。
所有研究对象来自本院生殖中心2016年8月至2017年8月期间自愿孕前检查的男性自愿者,共401人。年龄20~50岁(32.32±6.15)岁,全部填写“健康调查表”,表内内容包括人口学特征(体质量、身高、年龄、文化程度及职业);烟、酒、茶等嗜好情况;工作强度情况;生活压力情况;睡眠、久坐及电脑使用情况;体育运动情况;热水浴及一次性泡沫容器使用情况;由专职男科医生进行体格检查和病史询问;由生殖实验室人员按照健康调查表罗列内容询问自愿者并填写;所有的自愿者签署知情同意书。
按照WHO人类精液检查与处理实验手册第5版标准[1],所有自愿者禁欲2~7d[(4.16±2.02)d]。手淫法在门诊取精室取精于有刻度的无菌痰杯里,水浴锅孵育液化。液化后充分混匀全部精液,初步肉眼观察精液颜色、黏稠度后,检测精液量和pH值,记录液化时间。初步镜检,确定精液稀释倍数后,采用西班牙SCA精子质量分析系统检测精子浓度、总活力、精子存活率。采用低渗肿胀实验检测精子存活率。采用Diff-Quick快速染色法(珠海贝索公司生产的精子形态染色试剂盒),伟力形态分析系统结合人工修正分析法检测精子形态正常率,每个标本计数≥200。
采用深圳博锐德公司生产的精子DNA碎片检测试剂盒(SCD法),按照试剂盒操作说明书测试精子DNA碎片指数。
采用深圳华康公司生产的精浆果糖试剂盒,精浆锌试剂盒,按照操作说明书检测精浆中果糖和锌的含量。
所有数据采用SAS9.4统计软件分析,中位数和四分位数描述,精液质量参数与研究对象的生活习性的相关性采用Spearman分析;数据分组若两组则采用T检验分析;若大于两组的则采用方差分析描述;P<0.05为有显著性。
发现自愿者中有323人(80.6%)拥有本科以上的学历,346人(86.2%)职业为从事专业技术;自愿者的文化水平较高。病史询问中发现有7人(1.74%)曾患有腮腺炎;13人(3.24%)曾患有生殖道感染性疾病;有2人(0.50%)有性生活障碍。体格检查时发现有6人(1.50%)有轻度精索静脉曲张;4人(1.0%)为小睾丸;1人(0.24%)一侧睾丸隐睾;自愿者平均年龄(32.32±6.15)岁,20~29岁的占35.41%,30~39岁占50.87%,40岁以上只有13.71%,整体生育年龄偏大,30岁以上的占64.58%。根据体质量指数,只有49.87%的男性体质量正常,近一半的自愿者不是偏瘦就是趋于肥胖,偏胖和肥胖的占了47.84%。41.15%的自愿者每天使用电脑超过5h,超过2h的也有23.94%,导致久坐和熬夜等不良生活习惯增加,超过5h以上的坐者竟达到57.36%。41%的男性具有吸烟史,每天吸烟超过10支的自愿者达到25.87%;47.29%的人具有饮酒史;将近一半的人员感觉工作强度和生活压力偏大;36%的自愿者经常热水浴。所有孕前检查男性的基本情况和生活习性调查,见表1。
参照WHO第五版精液分析标准,对401例研究对象的精液标本进行精子质量检查、精浆锌和精浆果糖含量检测。其中7人精液中未见精子,复查后诊断为无精子症。
WHO第五版精液正常值参考标准:精液量≥1.5mL,精子浓度≥15×106/mL,前向运动精子(PR)≥32%,精子总活力≥40%,精子存活率≥58%,精子总数≥39×106,精子形态正常率≥4%,精子DNA 碎片指数正常率≥75%,精浆锌≥2.4μmol /次,精浆果糖≥13μmol/次。测得的精液量中位数为3.0mL,精子浓度中位数为71.7×106/mL,PR中位数为36.3%,精子总活力和存活率中位数分别是46.5%和49.1%,精子形态正常率中位数为3.1%,精子DNA碎片指数正常率90.92%。
表1 孕前检查男性的基本情况和生活习性调查(n=401)
将检测到的精子质量参数与WHO第五版[1]颁布的精液质量参数的正常参考值比较发现:90%以上的孕前男性精液量、精子浓度和精子总数、精浆锌含量、精浆果糖含量都在正常范围;但精子的PR,总活力和存活率合格率较低,分别只有53.8%,63.6%和68.1%;精子形态正常率符合率只有54.9%,只有一半多点的孕前男性精子活力和形态正常。精子DNA碎片指数符合率87.4%,符合率较高。孕前男性精液参数及符合率详细情况见表2。
表2 孕前检查男性精液参数及WHO参考值符合率(n=401)
排除7名无精子孕前检查男性,将余下394例自愿者纳入分析。采用Spearman分析孕前检查男性精液质量参数与其生活习惯的关联性,发现吸烟、饮酒、生活压力和经常热水浴将会影响精子质量。吸烟和精液量(P=0.00364)、精子浓度(P=0.04902)、精子DNA碎片指数(P=0.02770)、精浆锌的含量(P=0.00224)和精浆果糖的含量(P=0.00029)呈现显著负相关;生活压力与精子活力(P=0.02662)、精子形态(P=0.03805)和精子DNA碎片率(P=0.02715)呈现显著负相关。经常热水浴也显著影响精子总数(P=0.04384)和精浆锌(P=0.00011)的含量;使用泡沫容器对精浆锌(P=0.03384)的含量存在显著性影响。孕前检查男性精液质量参数与生活习惯关联分析详细情况见表3。
表3 孕前检查男性精液质量参数与生活习惯关联性分析(n=394)
自2010年国家试点孕前优生免费筛查以来,到2015年止已在各省市全面开展。免费孕前筛查项目主要是将女方纳入免费检查,而作为生育主体之一的男方检查项目很少。男方为子代提供一半的遗传物质,其生殖健康也是影响子代健康的重要因素。据报道:环境污染、生存压力、吸烟、饮酒、辐射、熬夜等因素[2-6]可引起男性精子活力降低、形态畸形、精子DNA损伤、胚胎发育不良、着床失败,引起流产、死胎或畸形发生,导致男性不育[7, 8]。男性生殖健康在优生优育中的作用越来越受到关注。随着孕前优生宣教工作的深入开展,越来越多的孕前夫妇自愿参与孕前筛查,在医生指导下孕育健康宝宝。
本研究对象来源于自愿孕前检查的男性,他们85%以上拥有本科以上的学历;86.2%从事专业技术职务,文化素质较高;平均年龄(32.32±6.15)岁,20~29岁组只占35.41%;30~40岁组占比50.87%,生育年龄偏大。在孕前检查中发现部分男性曾患腮腺炎、生殖道感染性、性功能障碍、精索静脉曲张、小睾丸、隐睾、无精子症、少弱精子症等导致男性不育的疾病,需专业医生根据他们的情况作出针对性处理,方能正常生育。精液质量检查发现:重庆市孕前检查男性精液质量参数精液量的中位数为3.0mL,精子浓度中位数为71.7×106/mL,PR中位数为36.3%,精子总活力和存活率中位数分别是46.5%和49.1%,精子形态正常率中位数为3.1%,精子DNA 碎片指数正常率中位数90.92%。各类精子质量参数与WHO第五版提供的精液参数正常参考值相比:90%以上的孕前检查男性的精液量、精子浓度和精子总数、精浆锌含量、精浆果糖含量都正常;但精子的PR,总活力和存活率符合率较低,分别只有53.8%,63.6%和68.1%;精子形态正常率符合率只有54.9%;精子DNA 碎片指数正常率的符合率为87.4%。重庆市孕前男性精液质量较差。我们获得的精子质量参数与刘太秀等[9]在重庆市大学生精液质量调查中除精子浓度以外,精液量、精子PR、总活力和存活率都低,精子PR,总活力和存活率符合率也低很多,但和嘉兴市一项有关孕前男性精子质量检查[10]的研究报道的符合率相近。这可能主要是因为我们面对的受检对象年龄不一样,大学生平均年龄22岁(21~23),而孕前检查的男性平均年龄32岁(20~42),这进一步说明年龄是影响质量的重要因素。周平[11]在研究南阳市孕前男性精子质量也发现精子质量随着年龄增大,精子质量下降,表现在精液量、精子总活力、浓度、存活率下降和pH值异常。这些精液质量指标下降是导致男性不育的重要因素。在我们401例孕前检查的男性中,其中就发现了7例无精子,8%的少精子,37%的弱精子和45%的畸精子,这些孕前男性必须在专业医生指导下方能正常生育。因此, 加强对男性孕前检查的宣传,让更多的育龄男性参与孕前检查显得尤为重要,这是保证育龄夫妇生育健康后代,提高人口素质的重要举措。
近年研究发现吸烟、饮酒、熬夜、久坐等不良生活生活习惯[4, 12]影响男性精液质量,造成男性精液质量下降。烟草中有害物质不但影响睾丸和附睾功能,降低睾酮合成和改变附睾中生化条件,影响精子生成和成熟;还可致使精浆内活性氧含量增多,引发精子DNA链断裂,导致精子DNA损伤,引起男性生育能力降低[5]。过量饮酒也会影响精子生成和精子成熟,损伤男性精子 DNA 的完整性[13]。我们的研究结果发现吸烟与精液量、精子浓度、精子DNA 碎片指数、精浆锌含量、精浆果糖含量显著负相关(P<0.05);饮酒与精子总数显著负相关(P<0.05)。这证实吸烟可致使孕前检查男性的精子数量减少,活力下降,使精子DNA 碎片指数增高;吸烟和饮酒还可以精浆中锌和果糖含量,从而进一步影响孕前男性精子质量。
经常桑拿或热水浴会使睾丸局部温度过高,影响睾丸的生精功能;过分温热还能使储存在附睾内的精子出现胞质小滴,影响精子成熟,降低精子总活力。经常久坐会使睾丸、附睾和精索静脉长期受到挤压,致使会阴和阴囊静脉回流障碍,导致睾丸组织局部缺氧、代谢废物聚积,造成精子生成障碍[13]。我们的关联性分析发现热水浴和精子总数和精浆锌含量显著负相关。但我们未发现久坐和精液质量参数存在显著关联,这与阮衍泰等得出“久坐是影响精子质量的独立因素”的结论不一致[15]。这可能和我们的样本数量较少有关。有研究报道生活压力过大会降低精子浓度和精子前向运动能力,增加畸形精子数量[14]。我们的研究结果也表明压力过大可致使精子前向运动能力明显降低,增加精子形态畸形和引起精子DNA损伤。同时,在关联性分析中也发现生活压力与性生活次数显著负相关。这可能是这部分男性迫于压力过大,禁欲时间偏长,疏于锻炼;或者依赖烟酒减压,养成不良生活习惯,综合因素导致精子质量下降。
综上所述,通过这项孕前男性精液质量调查,我们发现重庆市孕前男性精液质量较差,主要表现在精子活力下降和形态畸形。生活压力过大和不良习惯中吸烟、饮酒、热水浴等可能是影响他们精液质量下降的原因。所以,加强孕前优生宣传,鼓励孕前男性积极参与孕前优生筛查,及时发现影响生育的疾病;改变吸烟、饮酒、热水浴等不良生活习惯和减轻生活压力对提高男性精子质量,生育健康后代尤显重要。