五种不同检测方法检测牛布鲁氏菌病结果比较

（河北省围场满族蒙古族自治县动物疫病预防控制中心，河北围场 068450）

布鲁氏菌病是一种世界性的人畜共患病，对经济和公共健康都有重大影响。牛、羊和山羊感染光滑流产布鲁氏菌和羊种布鲁氏菌，是人类疾病的共同来源，该病主要危害人畜生殖系统，人与人之间几乎不传播，患病动物是主要的传染源，其中病羊感染人的比例较高[1]。目前疫苗免疫是布鲁氏菌病防控的重要手段之一，尤其布鲁氏菌病高发地区。

尽管近几年人间布病的发病率呈逐年减少的态势，但究其根本原因来自畜间的布鲁氏菌病，若想从根本上解决此问题，必须控制畜间重点是牛、羊间布鲁氏菌病的传播。

本实验从围场县境内规模化羊场采集血清样本855份，经虎红平板凝集试验（RBT）、补体结合反应试验（CFT）、间接酶联免疫吸附试验（iELISA）、竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）、试管凝集试验（SAT）五种方法检测比较结果后分析。建立敏感性强、特异性高、技术简单、成本低的诊断技术替代和补充现有的临床诊断方法。

1 实验材料

在河北省某地境内采集未实施布病免疫的奶牛血清855头份，每份血清对应标记家畜耳标号。

2 试验方法

采用RBT、SAT、iELISA、cELISA、CFT试验方法对每份血清进行平行检测。RBT、SAT、CFT具体试验方法见国标，iELISA、cELISA按照试剂盒说明进行操作。

3 试验结果

以SAT为标准，其他检测方式和其比较计算敏感性及特异性。急计算公式：敏感性=真阳性/（真阳性+假阴性），特异性=真阴性/（真阴性+假阳性）。

通过5种方法检测，全部为阳性的是真阳性178头，全部为阴性的是真阴性496头。iELISA敏感性（178/248）71.77%、特异性（496/607）81.71%；RBT的敏感性（178/296）60.14%、特异性（496/565）87.79%；SAT的敏感性（178/312）57.05%、特异性（496/543）91.34%；cELISA敏感性（178/313）56.87%、特异性（496/542）91.51%；CFT敏感性（178/337）52.82%、特异性（496/518）95.75%，结果见表1。

表1 五种方法检测相关性比较

4 试验结论

在OIE参考手册中，CFT为牛布病国际贸易指定试验和血清学的确诊试验。与CFT相比，其余四种方法都有一定的假阳性和假阴性。在我国现行标准中，SAT仍作为确诊试验，但由于其敏感性及特异性较低，实验过程比较复杂，不适合大批样品初步检测，对牛布病的检测结果并不理想，OIE在国际贸易中已经放弃使用该方法[2]。

本试验五种检测方法敏感性比较由高到低是iELISA ＞ RBT ＞SAT ＞ cELISA ＞ CFT。iELISA是最敏感的检测方法，仅需酶标仪等简单仪器，适于基层普遍应用；与敏感性其次的RBT方法相比，技术和操作要求简单，酶标仪读数，减少了主观判断和经验等人为因素影响，适用于基层布病大规模筛查。

而不同方法特异性比较由高到低：CFT ＞ cELISA ＞ SAT ＞iELISA ＞ RBT。虽然CFT特异性最高，但操作过于复杂，技术要求高，基层难以应用；cELISA特异性其次且与CFT相当，同样仅需酶标仪，技术和操作要求简单，适用于基层对布病初筛阳性样品的确证。

从实验结果可以看出：对于经济价值较高的奶牛而言，实施布病防控净化，我们既希望尽可能多地把阳性牛检出，减少假阴性率，因而需要敏感性高的iELISA方法，又希望莫把阴性牛误判为阳性牛，减少假阳性率，因而需要特异性高cELISA方法。不同检测方法的组合满足此要求，大规模筛查采用iELISA方法，阳性样品确证采用cELISA方法，其组合既能降低阳性漏检率，又能降低阳性误判率，是适用基层奶牛布病检测的最佳组合。