探讨3种不同检验方法在不同时期梅毒检测中的敏感性及特异性

吴丽娜 黄丽芳 黄翠梅 赖玉玲 胡雪梅

梅毒的病原体为梅毒螺旋体, 对于其病原体的直接检测目前尚存在困难［1］, 因此, 梅毒的血清学检测在梅毒的早期发现与筛检中应用很广, 并且不同的检测方法具有不同的特点, 对于各个临床时期的梅毒患者检测方法也不尽相同［2-4］。本研究比较TPPA、梅毒螺旋体免疫荧光法抗体定量检测、RPR3种不同的梅毒临床检测方法对于不同时期梅毒检测的敏感性和特异性, 从而为筛选敏感性和特异性较高的诊断方法提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年6月～2017年7月间本院收治的梅毒确诊患者共60例作为阳性组。纳入标准：梅毒各期患者, 尚未进行驱梅治疗。排除标准：不愿意参加者, 凝血功能障碍者。在这60例样本中包括一期梅毒35例, 二期梅毒22例, 胎传梅毒3例。另选取同期60例非梅毒患者作为阴性组, 包括类风湿性关节炎患者28例, 新生儿4例, 孕妇15例, 健康人13例。

1.2 方法 在征得受试者同意后, 采集受试者血样3 ml, 静置待血液凝固后使用离心机(白洋离心机B600A)4000 r/min分离血清后分别进行TPPA、梅毒螺旋体免疫荧光法抗体定量检测和RPR实验, TPPA检测试剂选取日本富士株式会社生产的梅毒螺旋体明胶凝集试验试剂盒进行, 梅毒螺旋体免疫荧光法抗体定量检测试剂由苏州新波技术有限公司提供。RPR检测试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供。检测操作由专门的实验人员严格按照试剂说明书进行。实验结果一式两份, 由2名组员使用Epidada 3.0 双录入, 后经数据核查后输出到SAS 9.4进行统计分析。

2 结果

2.1 梅毒阳性组的一般情况 梅毒阳性组共60例, 其中男36例, 女24例；年龄4周～53岁；一期梅毒35例, 二期梅毒22例, 胎传梅毒3例。见表1。

2.2 3 种检测方法对于梅毒的检测正确率 RPR检测正确率为81.67%, TPPA检测正确率为90.83%, 免疫荧光法抗体定量检测正确率为85.00%。见表2。

2.3 3 种检测方法的敏感性与特异性比较 3种检测方法中特异性最高的是TPPA检测, 为88.3%；一期梅毒的检测敏感性最高的是TPPA检测与免疫荧光法抗体定量检测, 均为97.1%, 正确指数最高的是TPPA检测, 为85.4%；二期梅毒的检测敏感性最高的是TPPA检测, 为100.0%, 正确指数最高的是TPPA检测, 为88.3%；胎传梅毒的检测敏感性最高的是免疫荧光法抗体定量检测, 为100.0%, 正确指数最高的是免疫荧光法抗体定量检测, 为73.3%。见表3。

表1 梅毒阳性组的一般情况(n, %)

表2 3种检测方法对于梅毒的检测结果(n)

表3 三种检测方法的敏感性与特异性比较(%)

3 讨论

本研究的结果对于临床不同分期的梅毒检测具有一定的指导意义, 在研究中观测到对于一期梅毒的检测, TPPA与免疫荧光法抗体定量的敏感性最高, 而对于二期梅毒TPPA的正确率最高。对于胎传梅毒的检测, RPR与TPPA的正确指数都不高, TPPA为对于梅毒血清免疫球蛋白G(IgG)检测为特异性最高的手段［5-8］, 但是由于其无法区别IgG的胎体或母体来源故而敏感性并不高, 但对于胎儿年龄＜1岁并且未接受治疗者的检测结果为阴性或胎儿母体反映为阴性者可作为排除诊断［9-11］。

相比之下, 免疫荧光法抗体定量的检测结果更加可靠,此外对于免疫球蛋白M(IgM)的检测结果更为可靠, 相比之于IgG, IgM无法通过胎盘, 且胎儿从24周时便可以产生特异性的IgM, 故阴性的IgM无法排除胎传梅毒, 但IgM的阳性结果可以作为胎传梅毒感染的确切证据［12-14］。但由于其对实验室条件与人员技术水平的要求较高, 而且所用试剂比较昂贵,因此并不适合梅毒的初筛, 并且由于类风湿因子等因素的干扰, 其特异度并不高［15，16］。相比之下各项敏感性与特异性都一般的RPR的操作简单, 应用试剂盒便可完成。故而比较适用于下级医院或是偏远地区的梅毒筛查。

梅毒螺旋体由于无法进行实验室培养, 且针对其病原体的检测较为困难(兔接种试验要求时间过长, 而暗视野显微镜检测螺旋体方式需在实验室中进行［17,18］。但由于多数梅毒感染者为无症状或皮损症状为一过性, 故而梅毒的血清学检测应用更加广泛。梅毒阳性组男36例，女24例；年龄4周～53岁；一期梅毒35例，二期梅毒22例，胎传梅毒3例。对于梅毒检测，RPR检测正确率为81.67%，TPPA检测正确率为90.83%，免疫荧光法抗体定量检测正确率为85.00%。3种检测方法中特异性最高的是TPPA检测，为88.3%；一期梅毒的检测敏感性最高的是TPPA检测与免疫荧光法抗体定量检测，均为97.1%，正确指数最高的是TPPA检测，为85.4%；二期梅毒的检测敏感性最高的是TPPA检测，为100.0%，正确指数最高的是TPPA检测，为88.3%；其中针对胎传梅毒的检测3种方法的正确指数均不高，正确指数最高的是免疫荧光法抗体定量检测，为73.3%，RPR与TPPA的正确指数分别为13.3%、0，这可能与样本量过少有关系。在一项综述［19］中报告对于胎传梅毒, RPR的灵敏度仅有4%～13%。因此对于胎传梅毒的早期检测, 对于IgM的血清学检测可能更为可靠, 在一项研究中显示［20］, 对于IgM的免疫印迹法, 其灵敏度较高, 而且特异度为100.0%。

综上所述, 对于不同阶段的梅毒, 3种方法的灵敏度与特异度不全相同, 因此对于不同时期梅毒检测的应用, 应当根据患者情况以及当地的流行情况慎重选择检查方法。