秦宇
(青海大学生态环境工程学院,西宁 810016)
过氧化氢酶(CAT)在各类生物的抗氧化防御系统中占据着重要的地位,可以催化H2O2和其他氧化物在体内分解代谢,具有保护机体的作用[1]。丙二醛(MAD)是在机体的膜结构中的物质受到氧自由基攻击时产生的一类物质,与机体受氧自由基攻击的程度密切相关。
Cr6+是一种剧毒类物质,对机体有致癌作用。当Cr6+进入机体后,能够被还原为Cr3+,伴有Cr5+中间体及大量自由基的产生[2]。
目前为止,尚未见有关重铬酸钾对小鼠不同组织内过氧化氢酶和丙二醛的影响的报道,因此本实验以小鼠心、肝、肺及肾离体组织为实验材料,探究重铬酸钾对小鼠不同组织内过氧化氢酶和丙二醛的影响[3]。
1.1.1 实验动物
昆明白化小鼠购置于兰州大学动物研究中心。
1.1.2 试剂及仪器
CAT试剂盒(南京建成)、MDA试剂盒(南京建成)、匀浆器(T18BS25)、漩涡混匀器(MVS-1)、可见紫外分光光度计(722S)。
1.2.1 实验动物处理
将实验动物处死,立即取出心、肝、肺及肾4种组织,生理盐水冲洗并剪碎,以质量体积比1∶9 的比例加入生理盐水,冰浴条件下匀浆,4℃、8000 r/min下离心13 min,取其上清液[4]。将不同动物不同组织分为4个组,即高、中、低3个染毒组和一个对照组,高剂量组的组织内铬离子达到8 mg/g,中剂量组和低剂量组分别为4 mg/g和2 mg/g。
1.2.2 总蛋白质浓度的测定(采用BCA法进行测定)
参照蛋白定量测试盒进行测定并计算总蛋白量。
1.2.3 CAT和MDA活性测定
参照试剂说明书进行测定。
1.2.4 数据处理
在SPSS软件进行数据分析,实验数据以平均值±标准差(±S)表示,并用t-检验进行差异性分析。
实验结果见表1和表2。
表1 Cr6+对CAT活性的影响
表2 Cr6+对MDA活性的影响
在本实验中Cr6+使小鼠心、肾、肺和肝4种组织中CAT和MDA活性显著提高,与对照组相比差异极显著(P<0.01);且随着Cr6+浓度的增加4种离体组织中CAT活性增强,MDA含量也增加。文献报导经重金属Cd处理后的小鼠其肾脏中CAT活性增强[5]。CAT对有害环境因子所表现出来的这样的生态效应被认为是生物体在有害因子作用下的一种自身保护性反应。生物体内的脂质过氧化程度与CAT活性和MAD含量密切相关,一定程度上反映出Cr6+对生物机体的毒害作用。对小鼠体内加入重铬酸钾使其体内的CAT活性和MDA含量发生变化的具体原因有待进一步研究。