郭建超 李 亮 许华钊 樊福好*
(1农业部种猪质量监督检验测试中心,广东广州 510500;2广东省畜牧技术推广总站,广东广州 510500)
猪圆环病毒2型(PCV2)是圆环病毒科的成员之一,属共价闭环单股DNA病毒,口鼻传播是该病毒的主要传播途径,感染猪的口鼻分泌物、唾液、乳汁、尿液和精液中亦有病毒检出[1],现已证实是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的重要病原之一。PMWS症状的出现可能必须有其他因素的参与,如猪瘟病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒等,这些病原的共同感染或其他应激因素刺激才会导致PCV2感染猪发展为PMWS。PCV2现呈隐性感染趋势,对猪的生产性能的正常发挥有着极大的影响,Young[2]研究表明注射PCV2疫苗的猪群比未注射疫苗的猪群每头猪可多获益5.90美元。
调查的样品来自2017年下半年华南地区26个规模化养殖场的保育猪,用颈静脉抽血的方法采集血液样品,并用动物血液保护液保存于4℃冰箱。
采用POCKIT智能型手提式核酸分析仪,DNA与RNA共同提取套组(tacoTMDNA/RNA Extraction Kit),检测试剂组采用POCKIT PCV2 Detection Kit POCKIT(猪圆环病毒二型检测试剂组)、POCKIT PRRSV-CN Detection Kit POCKIT(猪生殖与呼吸综合症病毒-中国株检测试剂组)、POCKIT PRRSV-NA Reagent Set POCKIT(猪生殖与呼吸综合症病毒-北美株检测试剂组)。
核酸提取按照金瑞鸿捷公司提供的DNA与RNA共同提取套组(tacoTMDNA/RNA Extraction Kit)操作手册进行,核酸的扩增按照1.2中三种不同试剂组的操作要求进行。
本次共检测来自26个猪场的375份血清学样品,感染PCV2的阳性场有23个,阳率性88.46%;阳性场中猪只PCV2的感染率从0.00%~85.71%;检测的375份样品中,有142份检测到PCV2病毒,总体感染率达37.87%,检测情况见表1。
由图1可知,抗原阳性率7周龄为26.92%(7/26)、8周龄为 46.48%(33/71)、9周龄为 38.83%(73/188)、10周龄为 32.20% (19/59)、11周龄为32.26%(10/31),感染趋势呈先升后降。抗体阳性率7周龄为73.08%(19/26)、8周龄为95.77%(68/71)、9周龄为 94.68%(178/188)、10周龄为 98.31%(58/59)、11周龄为90.32%(28/31),总体抗体阳性率为93.60%(351/375)。
图1 PCV2感染率、抗体阳性率随日龄变化情况结果
PRRSV抗原阴性猪只有178头,其中PCV2阳性猪只57头,PCV2感染率为32.02%;PRRSV抗原阳性猪只有197头,其中PCV2阳性猪只85头,PCV2感染率为43.15%。表明不同猪群感染率不同,PRRSV阳性群体PCV2感染率更高。
大白猪、杜洛克猪、长白猪PCV2抗原阳性头数分别为63头、45头、34头,感染率分别为40.91%(63/154)、32.61%(45/138)、40.96%(34/83)。
目前猪圆环病毒可分为3个基因型PCV1、PCV2、PCV3,其中PCV1无致病性,PCV2是当今流行的基因型。根据基因组大小不同,PCV2又分为PCV2a、PCV2b、 PCV2c、 PCV2d、 PCV2e, 其 中 PCV2c、PCV2e很少被报道,PCV2b和PCV2d为国内的优势流行株。覃艳然[3]2015年对广西地区的284份猪淋巴结及肺组织样品检测,结果显示PCV2阳性率达50.7%,对45份阳性样品测序得知有6株为PCV2a、39株为PCV2b。徐朋丽等[4]2016年对来自河南的21份PCV2阳性样品分析发现,16株属于PCV2d、5株属于PCV2b。曹启明[5]在2015至2016年间采集病死猪病料用PCR技术检测发现27株PCV2,其中7株属于PCV2b型、1株属于PCV2a型,其余19株为PCV2d。PCV3作为新型猪圆环病毒,已在国内流行传播。Zhai等[6]对全国各地PCV3的流行情况调查显示,吉林为100%(8/8)、广东为44.29%(62/140)、山东为7.69%(2/26)、甘肃为 3.75% (6/160)、广西为 8.82%(3/34)、四川为 13.85% (9/65)、云南为 1.04%(1/96)、内蒙古为23.33%(7/30)。其中广东地区感染率最高,需要引起重视,该地区大型种猪企业较多,PCV3的流行可能与从海外引进种猪有着千丝万缕的关系。
表1 PCV2病毒感染情况统计表
本次检测华南地区健康猪只的375份血清样品中PCV2感染率达37.87%,26个场中有23个阳性场,场内感染率最高的达85.71%。另据报道,2014至2015年江苏、浙江、安徽3省的健康猪群的感染率为31.20%[7]。可见国内一些地区PCV2感染率已相当高,防控形势严峻。PCV2的隐形感染状态,相当于在猪群中埋藏了一颗不定时炸弹,其他病原感染或猪群应激都有可能成为导火索。研究表明PRRSV、细小病毒和猪支原体均能增加PCV2阳性猪体内病毒的复制,诱发表现出圆环病毒病相关的临床症状[8,9]。本文对不同PRRSV群体PCV2感染情况的调查,也印证了上述研究,在PRRSV阳性群体中PCV2的感染率相应增高。
本文对PCV2抗体阳性率和日龄关系的研究发现,从7周龄开始抗体阳性率上升,在8、9周龄趋于稳定,10周龄阳性率达到高峰,11周龄略有下降。从7周龄PCV2病原感染率开始上升,8周龄达到高峰后下降,11周龄稍有升高,8周龄感染率较高可能由于7周龄时抗体阳性率较低,病原感染压力高,病毒在猪群内迅速传播导致;8周龄后随抗体阳性率升高稳定,抗原阳性率开始降低。
本文的调查结果表明,猪对圆环病毒的易感程度与品种有关,长白猪可能最易感(40.96%),杜洛克猪抵抗力最高(32.61%)。周继勇等[10]2004年应用间接免疫荧光技术检测血清,发现长白猪阳性率为44.83%,杜洛克猪为33.33%,大约克猪介于其间。Opriessnig等[11]也研究发现,与杜洛克、大白猪相比,长白猪对 PCV2相关疾病易感性较高。可见不同品种的猪对同一病原的易感性不同。