我国部分地区猪流行性腹泻、传染性胃肠炎及猪轮状病毒感染的流行现状及防控措施

王艳丰，张丁华，李爱心，程 征，刘守铉

(1.河南农业职业学院 牧业工程学院，河南中牟 451450；2.河南农业职业学院 疫病快速诊断中心，河南中牟 451450)

引起猪病毒性腹泻的病原有猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissinle gastroenteritis virus，TGEV)、猪轮状病毒(Porcine rotarvirus，PoRV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)、猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus，PRV)、猪博卡病毒(Porcine Bocavirus，PBoV)、猪嵴病毒(Porcine Kobuvirus，PkoV)等，其中以PEDV、TGEV、PoRV最常见且危害最严重。不同阶段的猪对3种病毒均易感，但以仔猪危害最大，病死率最高，即使猪耐过存活，康复后也会导致生长缓慢，饲料报酬降低，饲养成本增加，经济效益下降。特别是近年来PEDV在美洲、亚洲和欧洲造成了巨大的经济损失，2013年-2015年暴发导致美国养猪业每年损失9亿～18亿美元[1]，韩国约40%的猪场受到影响[2]。

1 病原变异

我国中东部部分地区分离的PEDV毒株与国内疫苗毒株CV777、韩国弱毒疫苗株DR13同源性分析，结果见表1。从表1可以看出，我国不同地区分离的PEDV毒株与近年来中国毒株、韩国毒株及泰国毒株亲缘关系较近，90%的流行毒株都属于G2群，但与国内疫苗毒株CV777、韩国AttenuatedDR13弱毒株亲缘关系较远，疫苗株属于G1群，表明流行毒株与传统毒株(2012年之前)的基因相比存在较大变异，这也是疫苗毒株CV777在各地免疫保护力不佳的主要原因[3-5]。目前国内除流行与PEDV疫苗株相同的毒株外，还存在新基因型的PEDV株[4]，且为强毒株[6]。因此，应高度关注当前PEDV毒株的遗传变异情况，从中筛选出新的疫苗候选毒株，尽快研制新的疫苗以控制我国PED疫情[7]。TGEV不同地区来源的各毒株间S基因差异性不大，S基因变异仍较低且相对比较稳定，这有可能是目前TGEV感染率较低的原因[8-9]。孙秋艳等[10]将山东分离株与Bank中公布的13株TGEV毒株的S基因序列进行同源性比较，发现核苷酸同源性在98.2%～77.7%，虽然分离毒株与其他13株TGEV毒株核苷酸同源性差异较大，但氨基酸同源性却很高(96.0%～99.4%)，说明S基因点突变很多应该是无意义突变。A群PoRV基于VP4和VP7的抗原性不同，将其分为血清型P型和G型。目前全球优势流行株为G1占42.9%，G2占11.8%，G3占11.1%，G4占8.2%，G9占14.4%，共计88.2%，我国的优势流行株与全球流行趋势一致[11]。杨娟等[12]对分离的PoRV广东株鉴定发现，VP7和VP4基因都与典型的A群轮状病毒OSU株在同一分支上，属于比较流行的毒株，与轮状病毒疫苗毒株LLR进化距离较远，表明其不属于疫苗毒株。

表1 我国部分地区分离的PEDV毒株与CV777株、DR13株同源性分析

注：参考毒株①疫苗株CV777；②韩国弱毒疫苗株DR13。

Note：Reference strains of vaccine strain CV777，South Korea attenuated vaccine strain DR13.

2 流行现状

2015年-2017年我国部分地区猪场病毒性腹泻流行病学调查情况，结果见表2。从表2可以看出，各地区猪场分离的PEDV阳性率最高，其次是PoRV，最后是TGEV，表明自2010年10月以来，全国各地猪群暴发的腹泻疫情，PEDV是猪病毒性腹泻的主要病原[13]，在我国的猪腹泻病病原中仍占主导地位。此外，也分离出其他相关病毒，如PKV、PBoV、PRV、PCV-2、CSFV、BVDV等，可能与PEDV具有协同致病性。PEDV常与TGEV、PoRV、PRV、PCV-2等双重感染或三重感染，但不同地区混合感染存在差异，如东北地区以PEDV/PoRV的双重感染为主，山东地区主要为PEDV/PRV混合感染，但TGEV/PoRV混合感染较少。大量调查发现，即使同一猪场不同时期感染的病原也可能不同。一年四季均可发生，以冬春寒冷季节多发，6月～9月份发病较少，表明环境应激是诱发因素，但杜娟等[14]报道北京地区PEDV、TGEV近年来受季节因素影响不明显，PoRV在夏季受环境条件影响更为高发。哺乳仔猪发病率和死亡率最高，后备猪、母猪或育肥猪呈一过性腹泻，发病率较低。

3 防控策略

3.1 预防

3.1.1 饲养管理 精心饲养管理，初生仔猪及时吃初乳。保持产房和产床适宜温度和湿度，适当通风换气。产房、产床和保温箱要经常消毒。加强生物安全，如限制场内外的车辆、人员、设备、物料、猪只等的转移，进场人员和车辆须严格消毒，新进猪只严格隔离观察，确定健康后方可混群等。

3.1.2 免疫预防 目前，商品化的疫苗有猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联灭活疫苗(WH-1株+AJ1102株)，猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪轮状病毒(G5型)三联活疫苗(弱毒华毒株+弱毒CV777株+NX株)，猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗(HB08株+ZJ08株)3种。徐宏军等[15]分别以PEDV悬浮灭活苗、转瓶灭活苗、流行株组织灭活苗产前30 d免疫经产母猪，母猪产后14 d进行仔猪攻毒保护试验，3种疫苗的保护率分别为80%、20%、10%。代洪波等[16]以分离株制备灭活疫苗免疫母猪，以免疫母猪所产仔猪进行攻毒保护试验，仔猪保护率为87.5%～100%。王娟萍等[17]对山西省10个规模化猪场母猪疫苗免疫情况调查显示，未免疫疫苗的猪群乳猪死亡率为61.70%，而母猪产前40 d、20 d后海穴注射胃流轮三联活苗，肌注胃流二联灭活苗的猪群乳猪死亡率为10.26%；母猪产前40 d、20 d后海穴注射胃流轮三联活苗，3日龄乳猪后海穴注射胃流轮三联活苗的猪群乳猪死亡率为9.63%。吕雪峰等通过对断奶仔猪人工诱发试验和疫苗保护效果试验表明，猪腹泻三联活疫苗免疫后的仔猪均能够抵抗TGEV、PEDV的攻击，无死亡病例和相关临床症状出现，且疫苗无明显的不良反应。于俊勇等通过攻毒模型对比免疫反应、断奶前死亡率来评估 PEDV灭活疫苗在阴性和感染过 PEDV母猪群的免疫效果，结果显示能显著提高母猪、一定程度提高仔猪(母源抗体)血清中IgG的水平，但未能有效提高IgA的水平。Baek P S等[18]利用分离株制成PEDV 灭活疫苗，妊娠母猪产前6周和3周各接种1次，对新生仔猪6日龄攻毒保护试验，存活率达到92%。

注：①11个省市分别是黑龙江省、吉林省、辽宁省、内蒙古自治区、河北省、山东省、山西省、江苏省、湖南省、北京市、天津市；②牛病毒性腹泻病毒(BVDV)；③猪圆环病毒2型(PCV-2)。

Note：①11 provinces and cities are Heilongjiang,Jilin,Liaoning,Inner Mongolia,Hebei,Shandong,Shanxi,Jiangsu,Hunan,Beijing,Tianjin；②BVDV；③PCV-2.

3.2 治疗

3.2.1 中药疗法 3种病毒性腹泻多发于寒冷季节，多为毒邪湿气蕴积体内所致，治宜清热解毒、健脾祛湿、收涩止泻。由白头翁、黄芩、秦皮、党参、苍术、甘草、当归、肉桂、厚朴、诃子、山楂等组成的复方治疗PED，平均4.42 d治愈，治愈率86.67%，复发率为0，体重最大下降0.59%，11 d增重22.44%[19]。由穿心莲、无花果、大青叶、马齿苋、黄芪等组成的复方治疗PED，有效率和治愈率均达到50%，并且控制仔猪体重流失、恢复食欲及维持仔猪血液中钙、磷、镁的水平较为突出[20]。尹宝英利用党参、白术、茯苓、木香、黄芪、煨诃子、代赭石(方Ⅰ)，藿香、黄芩、茯苓、泽泻、肉豆蔻、乌梅、煨诃子、姜黄、车前子(方Ⅱ)，对PED的治愈率和有效率分别在52%以上和80%以上。此外，许多植物提取物如甘草甜素、银杏多糖、槲皮素-7-鼠李糖苷、槲皮素、木犀草素、香豆素、艾草精油等都具有较强的抗PEDV活性。国内学者采用MTT法结合细胞病变方法研究发现，黄芩苷、穿心莲内酯、大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素甲醚、苦参碱、氧化苦参碱和苦马豆素[21]，连翘苷、连翘苷元、绿原酸、咖啡酸、丁香酚、丹皮酚[22]对TGEV体外增殖均有抑制作用，以黄芩苷和咖啡酸作用最好。此外，朱砂七多糖、浒苔多糖、黄芪多糖等对TGEV亦有抑制作用。

3.2.2 干扰疗法 干扰素(interferon，IFN)是一类具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等多种作用的糖蛋白，有明显的种属特异性。赵永旭等[23]利用重组猪α干扰素口服治疗PED，仔猪存活率50%～70%，同时进行腹腔或/和口服补液，仔猪存活率从53%提升到71%，但不同猪场防治效果差异较大(存活率37.5%～70.0%不等)，可能与初生仔猪感染程度不同有关。对于严重病例疗效不佳，原因是仅用重组猪α干扰素不能缓解脱水和酸中毒症状，总体来说用于预防的效果优于治疗，母猪和仔猪联用效果好于母猪或仔猪单用，但防治成本较高。韩国英等利用重组猪α干扰素治疗PED，治愈率为92%。但干扰素必须在病毒感染早期使用效果才佳，且需反复多次使用。目前，市场上商品化干扰素有正规兽药批准文号的厂家较少，选择和使用时需注意甄别。

3.2.3 返饲疗法 返饲是模拟自然感染方式，将病猪的粪便、病料或含有病原的其他材料经口感染未发病猪，以达到全群同期感染并同期恢复的目的。简义虎等用育肥后期猪模拟母猪返饲(攻毒)试验，试验猪在返饲后第2、3 d相继出现腹泻并检测到PEDV，11 d猪血清中IgG抗体明显上升，攻毒后20 d IgA与IgG检测值均达到峰值，15 d唾液与粪便均检测不到病毒，表明母猪在产前15 d～30 d返饲效果较好，病毒感染仔猪的风险最低，但返饲整个过程尽量控制在2 h内。一般以返饲后3 d～5 d，未发病猪出现食欲减少、呕吐或腹泻等症状视为返饲成功。7 d后对在上次饲喂时未出现腹泻的母猪再次投喂。有的猪场返饲效果不理想，可能与返饲对象不合适、病料选择不合理、返饲的病毒量不足及返饲时间不当等有关。由于猪场一般很少做病毒分离鉴定，病料中所含病毒的毒力和含量都不确定，因此，返饲效果有时难以保障，同时也存在暴发疫病或散毒的风险及免疫应激大等缺点。

3.2.4 特异疗法 卵黄抗体(IgY)是鸡(或禽类)经特定抗原免疫后产生相应的抗体。研究表明，IgY能提高猪采食量、饲料转化率及生长性能，有效降低由大肠埃希菌、沙门菌、TGEV、PEDV等引起的腹泻。以TGE+PED二联灭活苗免疫产蛋鸡，待卵黄抗体效价达到1∶64时收集卵黄，采用氯仿抽提和硫酸铵盐析法纯化卵黄抗体，通过人工感染治疗试验和临床应用，人工感染治愈率为100%，临床应用治愈率为88.0%，但早期病猪治疗效果较好，随着病程延长，口服吸收率下降，治愈率逐渐降低[24]。李冰等[25]通过攻毒治疗试验和临床治疗试验检测抗PEDV卵黄抗体的治疗效果，仔猪存活率均达到60%，但由于仔猪个体免疫力的差别，部分仔猪仍因严重脱水及营养不良而死，并且建议应尽量在仔猪出生5 d以内使用。潘孝成等利用PEDV卵黄抗体，人工感染治疗试验显示，一次、二次抗体治疗组可分别减少死亡率50.0%、83.3%，在3个自然发病猪场，相较于对照组，抗体治疗组可减少仔猪死亡率分别为67.7%、57.0%和77.5%。目前市场上尚无批准的商品化卵黄抗体，多为一些高校和科研院所制备，由于缺乏统一的质量标准，各地使用效果存在差异。

3.2.5 对症疗法和防止继发感染 3种病毒性腹泻均会引起肠绒毛萎缩，导致脱水和酸中毒，因此，必须采取收敛止泻、补液强心和纠正酸中毒等对症治疗，这是降低死亡率的关键。

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