不同月份产羔奶山羊初乳免疫球蛋白和常乳乳成分检测

赵晓娥, 孙念琴，宋爱爱，魏 强, 徐明辉，李延华, 王军宁, 马保华*

(1.西北农林科技大学 动物医学院/ 农业部动物生物技术重点实验室,陕西 杨凌 712100; 2.许昌百益奶山羊养殖场, 河南 许昌 461000；3.富平县畜牧技术推广中心, 陕西 富平711700；4.富平县动物疫病预防控制中心，陕西 富平 711700)

泌乳是哺乳动物重要的生理机能，为哺育仔畜、繁衍种族所必需[1]。母畜生产后，母乳是仔畜重要的营养物质来源，乳汁的质量和产量对仔畜的生长发育很重要。母羊乳汁质量越好，羔羊生长发育也就越好，尤其是哺乳前期。初乳中含有丰富的免疫球蛋白、乳铁蛋白、维生素等，可防止感染和增强免疫机能[2]。常乳中含有乳蛋白、乳糖、脂肪、无机元素、氨基酸、酶类和维生素等[3]。研究表明哺乳动物产奶量受遗传、胎次、环境、营养水平等因素的影响[4-5]，乳成分与泌乳期、胎次、日粮组成、环境及管理等因素相关，其成分含量存在明显差异[6]。奶山羊在不同季节产羔后，季节性变化是否引起母羊乳中免疫球蛋白和其他乳成分含量的变化还不是很清楚。因此，本研究收集不同月份产羔母羊的乳样，通过乳中免疫球蛋白及不同乳成分含量的比较分析，为后期调整奶山羊日粮组成以保证不同月份产羔母羊的乳品质提供数据基础。

1 材料与方法

1.1 试验动物及管理

关中奶山羊，年龄1.5～4岁，体况良好，无繁殖及传染性疾病，发情周期正常，于当年8月、10月、12月、翌年2月同期发情、配种处理，翌年的1月、3月、5月和7月产羔、产奶。随机抽出1月、3月、5月和7月产羔的关中奶山羊各10只，共40只奶山羊作为本研究的试验动物。每批次的10只试验羊在同一条件下舍饲饲喂，常规管理。

1.2 主要试剂

山羊免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒，山羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒(上海邦奕生物科技有限责任公司)。

1.4 乳样的收集与处理

每批10只奶山羊，分别于产羔后的0，2，5 d 和7d收集两个6～8 mL初乳样品，用于IgA和IgG水平测定。2 000 r/min离心初乳样品，收集上清液保存于-20 ℃冰箱内待测。山羊初乳中IgA和IgG的浓度用ELISA试剂盒检测[7-9]，上海邦奕生物科技有限责任公司代测。

在泌乳期的7，9，30，60，90，120，150 d和180 d，每只试验羊每次采集45 mL乳样，重复收集两个乳样，贮于-20 ℃冰箱保存，用于乳成分(乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和总脂固形物)测定。乳成分及其含量用全自动乳样分析仪(MilkoScan FT120，FOSS Corporation, Denmark)分析。测试时，首先对全自动乳样分析仪进行校正，预温40 min，将乳样提前置于40 ℃水浴缸中进行水浴解冻，待乳样温度达到30 ℃左右时将乳样上下颠倒轻晃，然后将全自动乳样分析仪吸头置于乳样中检测，乳样分析仪会对乳样的主要成分、酸度、冰点和密度进行两次分析，分析后计算两次的平均值。

1.6 数据处理

2 结果与分析

2.1 奶山羊初乳中免疫球蛋白标准曲线

根据奶山羊初乳中IgA和IgG水平绘制标准曲线，见图1。由图1可以看出，IgA和IgG标准曲线的R2分别为0.9991和0.9994，表明检测方法正确、检测结果可靠。

2.2 不同月份产羔母羊初乳中免疫球蛋白的测定结果

不同月份产羔母羊初乳中IgA和IgG浓度的变化如图2所示。

图1 ELISA测定山羊初乳中IgA 和IgG的标准曲线Fig.1 Standard curves for the measurement of IgA and IgG in goat colostrum with ELISA kits

图2 不同月份产羔奶山羊初乳中IgA和IgG浓度的变化Fig.2 The concentration of IgA and IgG in colostrums of kidding goats in different months

由图2可以看出，1月、3月、5月、7月产羔母羊在相同的泌乳时间初乳中IgA和IgG水平无显著差异(P>0.05)；不同月份产羔母羊初乳中IgA和IgG水平动态变化趋势一致，IgA浓度0～2 d下降较快，5～7 d下降缓慢维持在较低水平；IgG浓度0～5 d下降较快，5～7 d下降缓慢维持在较低水平。0 d时，IgA浓度最高为1890.84±124.51 μg/mL，7 d时，下降到951.02±1.34 μg/mL；0 d时，IgG浓度最高为127.26± 4.47 mg/mL，7 d时，下降到8.56±1.44 mg/mL。

2.3 不同月份产羔母羊常乳中乳成分的测定结果

不同月份产羔母羊常乳中乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和总脂固形物测定结果见图3。由图3可以看出，1月、3月、5月、7月产羔母羊在6个月泌乳期间，常乳中的乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和总脂固形物(干物质)含量变化趋势一致，其均值变化范围为3.31%～3.45%，4.91%～5.77%，4.03%～4.20%，8.48%～8.88%， 13.72%～15.07%。 5月份生产的母羊，在泌乳的7 d、30 d、60 d时，羊乳中的蛋白质含量相对较低，在其它泌乳期，不同月份产羔母羊乳中的乳蛋白含量无显著差异(图3A)。5月份产羔母羊在泌乳的7 d、9 d羊乳中的脂肪含量高于7月份产羔母羊(P<0.05)，其他泌乳期，不同月份产羔母羊羊乳中的乳脂含量无差异性变化(图3B)。在相同的泌乳期，不同月份产羔母羊乳中的乳糖含量无差异性变化(图3C)。5月份产羔母羊在泌乳的150 d，羊乳中的非脂含量低于其他月份产羔母羊(P<0.05，P>0.05)。在泌乳的前期，7月份产羔母羊乳中的总脂含量显著低于1月份产羔母羊(P<0.05)，在泌乳的中期，5月份产羔母羊乳中的总脂含量低于其他月份产羔母羊(P<0.05，P>0.05)(图3E)。

图3 不同月份产羔母羊乳中乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和总脂固形物含量的变化Fig.3 The protein, fat, lactose, non-fat solid and total fat solid (TS) content in milk of kidding goats in different months

3 讨 论

3.1 不同月份分娩的奶山羊初乳中IgA 和IgG含量变化分析

母畜生产后，初乳中免疫球蛋白含量的高低对仔畜成活及生长很重要。免疫球蛋白不仅可以提高仔畜的免疫力，同时，IgG和IgA对其乳腺也有保护作用[10]。因此，奶山羊初乳中IgA和IgG的含量的高低对于羔羊的生长发育具有很大的影响。在奶山羊整个泌乳过程中，乳汁中的免疫球蛋白的浓度变化很大[11]，1～18 h内的初乳中免疫球蛋白的含量最高[12]，可达120 mg/mL，而泌乳高峰期则降至0.50～1 mg/mL。莎能奶山羊产后3 h和12 h，初乳中的IgG含量分别为72.01 mg/mL和 48.81 mg/mL[13]。本试验中，IgA和IgG的浓度0～2 d下降很快，5～7 d维持在较低水平，0 d时最高可达127.26 mg/mL，7 d时下降到8.56 mg/mL。初生羔羊对初乳中免疫球蛋白的吸收率最高约为50%[12]，刚出生的羔羊未吃初乳时外周血清中IgG和IgA含量极少，但羔羊哺食初乳后几个小时，其外周血清中免疫球蛋白含量很高[13]。本试验对不同月份产羔母羊初乳中IgA和IgG的含量进行了检测，发现1月、3月、5月、7月母羊产后初乳中IgA和IgG含量动态变化趋势一致，不同批次相同泌乳期乳中IgA和IgG的浓度无差异性变化，其动态变化趋势与陈祖秋报道的结果相符[12]。说明不同月份产羔对母羊初乳中IgA和IgG含量影响不大，其动态变化与泌乳时间有关。

3.2 奶山羊在不同月份分娩对母羊常乳乳成分含量的影响

山羊奶的主要营养成分有乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和总脂固型物等。在本研究中，1月、3月、5月、7月产羔母羊在产后7 d、9 d及1～6个月的泌乳期间，乳汁样品中的乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和总脂固型物含量动态变化趋势类似，乳糖和非脂固形物浓度动态变化幅度不大，乳蛋白、乳脂和总脂固型物表现为泌乳初期含量较高，随后逐渐下降，到检测的末期又有所上升，这种变化趋势是正常的，主要与泌乳期泌乳量的动态变化有关，产奶量越高，乳脂肪含量越低[14]。采样期间，从主要乳成分在乳样品中的绝对含量来看，蛋白质、乳糖和非脂固形物含量与文献报道的奶山羊乳汁中含量相符或稍高(3.31%～3.45%，2.98%～3.08%; 4.03%～4.20%，3.90%～3.96%；8.48%～8.88%，8.38%～8.61%)[15-16]，脂肪含量与总脂固形物均相对偏高[15]，可能是所在养殖场奶山羊食用较高比例粗纤维的缘故。张彦明等[17]提出奶山羊日粮中粗纤维含量的高低对乳中脂肪含量变化影响最大。山羊除了腺泡上皮细胞直接从血液中摄取一部分脂肪酸外，还可以利用日粮中的纤维素在瘤胃中发酵所产生的低级脂肪酸(如乙酸、丙酸和丁酸等)。因此，可以通过调整日粮来改变羊奶中的脂肪含量。另外，发现5月份产羔母羊在泌乳旺期(6～8月)乳中脂肪含量低于其他各组，可能是此羊场在每年的6～8月提供奶山羊大量青麦草导致泌乳母羊产奶量的增加，乳脂含量相对就会降低。尽管5月份产羔母羊乳脂含量相对偏低(4.91%)，但在正常范围之内，据报道羊奶中脂肪含量为3.6%～5.5%。而对1月、3月和7月产羔母羊来说，应加强青绿饲料的补充，以降低乳汁中的乳脂和总脂含量。总的来说，山羊奶中含有的脂肪酸大多是中、短链脂肪酸，容易代谢，不会造成脂肪堆积引起肥胖[18-19]。因此我们可以认为脂肪和总脂固形物含量偏高并没有降低羊奶的质量。

4 小 结

奶山羊在不同月份产羔并不影响初乳中IgA和IgG含量的变化，对常乳中乳脂、和总脂固形物有一定的影响，对乳蛋白和乳糖及非脂固形物影响不大，常乳中乳成分含量在部分泌乳期有变化，但并未降低羊奶的质量。

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