日粮添加槲皮黄酮对蛋鸡生产性能、蛋品质及蛋黄抗氧化性能的影响

杜晓霞，丁孟松，吴光兴，王俊珍，范文东，解红梅，姜八一*

（1.山东畜牧兽医职业学院宠物科技系，山东潍坊 261061；2.山东省潍坊市动物疫病预防与控制中心，山东潍坊 261041；3.山东省泰安市东平县畜牧兽医局，山东东平 271500；4.山东省无棣县畜牧兽医局畜禽遗传资源工程中心，山东滨州 251900）

近年来，多酚在动物上的应用引起了研究人员的广泛关注，对动物具有潜在功能。多酚类化合物具有抗氧化功能，同时对人的一些疾病如慢性炎症、心血管疾病、癌症和糖尿病等具有抑制作用（Acosta-Estrada等，2014）。此外，多酚还具有提供葡萄糖耐受性、降低血脂水平和控制肥胖等功能（Nichols等，2011）。黄酮类化合物是多酚中数量最多的一种，被认为是天然的抗氧化剂（Balasundram等，2006）。黄酮类化合物的抗氧化活性可归因于一种或多种，其分子中含有芳香族羟基，可以清除自由基；同时在植物中广泛分布，本身及其次生代谢产物具有抵御感染和应激的影响，如紫外线、病原体和物理损伤等（Robbins，2003）。槲皮黄酮是一种植物性化合物，属于黄酮醇的子类，在苹果、洋葱及其副产品等多种水果和蔬菜中普遍存在。槲皮黄酮已被证明是一种极好的体外抗氧化剂（Boots等，2008）。在肉鸡方面的研究已经表明，槲皮黄酮及其代谢产物糖苷可提高肌肉氧化稳定性（Goliomytis等，2014）。目前，关于槲皮黄酮对蛋鸡蛋黄抗氧化性能的研究报道较少，本试验以蛋鸡为试验动物，考察日粮中添加不同水平的槲皮黄酮对蛋鸡生产性能、蛋品质及蛋黄氧化稳定性的影响，为槲皮黄酮在蛋禽中的应用及适宜添加水平提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 槲皮黄酮（96%纯度）购自上海甄准生物科技有限公司。

1.2 试验日粮与分组 选取健康、产蛋率相近的70周龄罗曼褐壳蛋鸡720只，随机分成4组，每组6个重复，每个重复30只。试验日粮参考NRC（1994）及《中国鸡饲养标准 NY/T33-2004》配制，基础日粮为玉米-豆粕型日粮，试验日粮分别在基础日粮中添加0.1、0.2和0.4 g/kg槲皮黄酮。试验日粮均为粉料，基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.3 饲养管理 试验鸡只采用三层阶梯笼养，每笼3只鸡。光照采用人工光照和自然光照相结合，光照时间为16 h（10 lx），舍内相对湿度为60%～65%。试验鸡只全期自由采食和饮水，按照常规程序免疫和消毒。试验开始预饲1周，正式期4周。

1.4 测定指标

1.4.1 生产性能 试验期间每天按重复记录产蛋个数，称量蛋重，每周按重复记录采食量，计算产蛋率、平均日采食量、蛋重和料蛋比。

1.4.2 蛋品质测定 分别在试验结束时，每组按重复随机选6枚鸡蛋进行蛋品质测定。蛋品质指标采用日立全自动蛋品质分析仪测定（DET-6000，日本日立）。

1.4.3 血清和蛋黄胆固醇含量 试验结束时，每个重复随机选择4只鸡翅下静脉采血5 mL，3000 r/min离心10 min后，Epperdoff 管-80℃保存。每组随机选择36枚鸡蛋，分离蛋黄和蛋清。采用南京建成生物工程有限公司的胆固醇试剂盒测定血清和蛋黄中胆固醇的含量。

1.4.4 蛋黄抗氧化性能 分别于试验第7、14和28天每组分别收集18枚鸡蛋测定蛋黄中丙二醛含量。在试验第10天每组分别收集18枚鸡蛋4℃冰箱贮存，分别于第28和80天测定蛋黄中丙二醛含量。丙二醛含量采用试剂盒法测定，试剂盒购自南京建成生物工程有限公司。

1.4.5 数据统计与分析 采用SPSS 19.0版多因素方差分析（Muti-way ANOVA）处理数据，各处理间的平均值比较采用Tukey’s多重比较进行差异显著性检验。以P＜0.05作为差异显著标准。

2 结果与分析

2.1 日粮槲皮黄酮水平对蛋鸡生产性能的影响由表2可知，日粮槲皮黄酮水平对蛋鸡平均日采食量、产蛋率和料蛋比均无显著影响（P＞0.05）。日粮添加0.2 g/kg槲皮黄酮较0.1和0.4 g/kg槲皮黄酮组蛋鸡平均日采食量显著提高（P＜0.05），且日粮槲皮黄酮水平对蛋鸡平均日采食量的影响呈现显著的二次曲线效应（P＜0.05）。

2.2 日粮槲皮黄酮水平对鸡蛋品质的影响 由表3可知，日粮槲皮黄酮水平对蛋形指数、蛋壳强度、蛋壳厚度均无显著影响（P＞0.05）。随着日粮槲皮黄酮添加水平的增加，蛋黄重量线性增加（P＜0.05）。日粮添加0.2 g/kg槲皮黄酮较0.1和0.4 g/kg槲皮黄酮组显著提高蛋壳重量（P＜0.05），但与对照组无显著差异（P＞0.05）。随着日粮槲皮黄酮水平的增加，蛋黄重量线性增加（P ＜ 0.05）。

2.3 日粮槲皮黄酮水平对蛋鸡血清和蛋黄中胆固醇含量的影响 由表4可知，蛋黄中胆固醇的含量随日粮槲皮黄酮添加水平的增加线性增加（P＜0.05），其中0.2和0.4 g/kg槲皮黄酮组蛋黄胆固醇含量显著高于对照组和0.1 g/kg槲皮黄酮组（P＜0.05），同时0.2和0.4 g/kg槲皮黄酮组鸡蛋总胆固醇含量显著高于对照组和0.1 g/kg槲皮黄酮组（P＜0.05）。日粮槲皮黄酮添加水平对蛋鸡血清胆固醇含量无显著影响（P＞0.05）。

2.4 日粮槲皮黄酮水平对蛋黄抗氧化性能的影响 由表5可知，不同试验时间及贮存期蛋黄抗氧化性能表示为每克蛋黄中丙二醛的含量（ng/g蛋黄）。随着日粮槲皮黄酮添加水平的增加，蛋黄中丙二醛的含量显著线性降低（P＜0.05）。与对照组相比，0.1、0.2和0.4 g/kg槲皮黄酮组第7、14和28天蛋黄丙二醛含量显著降低（P＜0.05）。日粮槲皮黄酮水平和时间对蛋黄胆固醇含量的影响无显著交互作用（P＞0.05）。鸡蛋贮存28和80 d后，与对照组相比，日粮添加0.1、0.2和0.4 g/kg槲皮黄酮蛋黄胆固醇含量显著降低（P＜0.05），蛋黄胆固醇含量与日粮槲皮黄酮水平呈显著线性和二次曲线关系（P＜0.05）。0.4 g/kg槲皮黄酮组较其他各组蛋黄丙二醛含量显著降低（P＜0.05）。日粮槲皮黄酮水平与贮存时间对蛋黄丙二醛含量的影响具有显著交互作用（P＜0.05）。

3 讨论

3.1 日粮添加不同水平的槲皮黄酮对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响 本研究结果发现，日粮添加槲皮黄酮对蛋鸡生产性能的影响仅表现在采食量上，日粮添加0.2 g/kg槲皮黄酮较其他各组显著提高蛋鸡的平均日采食量。蛋鸡采食量的增加与蛋壳重量提高的结果一致。采食量提高，蛋鸡摄入的钙水平相应提高；钙是蛋壳的主要组成成分，因此蛋壳重量相应提高。Liu等（2014，2013）研究发现，日粮添加槲皮黄酮可以显著提高蛋鸡产蛋率和降低料蛋比，其中日粮添加0.2和0.4 g/kg槲皮黄酮表现最好，其认为这与槲皮黄酮具有植物雌激素的活性功能有关。Liu等（2013）同样认为，槲皮黄酮可以改善蛋壳质量，因为雌激素对钙代谢具有调控作用，这与本试验添加槲皮黄酮提高蛋壳重量的研究结果一致。

表2 日粮槲皮黄酮水平对蛋鸡生产性能的影响

表3 日粮槲皮黄酮水平对鸡蛋品质的影响

表4 日粮槲皮黄酮水平对蛋鸡血清和蛋黄中胆固醇含量的影响

表5 日粮槲皮黄酮水平对蛋黄抗氧化性能的影响 ng/g

3.2 日粮添加不同水平的槲皮黄酮对蛋鸡血清和蛋黄胆固醇含量的影响 本研究发现，蛋黄胆固醇含量随日粮槲皮黄酮添加水平的升高而升高，而血清胆固醇水平呈现上升趋势，但差异不显著。蛋黄胆固醇水平的升高通常被人们认为与心血管疾病风险有关。但胆固醇是动物机体必需的一种物质，参与合成细胞膜、维生素D、激素等，适量的胆固醇能维持身体的正常生理功能。当动物摄入高胆固醇食物时，机体会控制吸收量并降低胆固醇的合成量；相反，当摄入低胆固醇时，机体会合成足够的胆固醇（张旭等，2011）。本研究发现，当日粮槲皮黄酮水平达到0.2 g/kg时，蛋黄中胆固醇含量才表现为显著升高。Zhao等（2011）研究发现，日粮添加0.5%槲皮黄酮可以显著提高血清低密度脂蛋白胆固醇的水平，说明槲皮黄酮可以调控胆固醇代谢，这与本试验研究结果一致。但也有相关报道与本试验结果存在差异，如Liu等（2013）、Iskender等（2016）在蛋鸡日粮中添加槲皮黄酮发现，其降低了蛋黄和血清胆固醇水平。作者推测这可能与不同品种蛋鸡蛋黄胆固醇含量不同有关，同时不同基因型蛋鸡与日粮槲皮黄酮添加水平可能存在交互作用，但具体作用机制还有待进一步研究。

3.3 日粮添加不同水平的槲皮黄酮对蛋黄抗氧化性能的影响 本研究通过在日粮中添加不同水平的槲皮黄酮，考察其对在不同时间收集的鸡蛋及贮存期间鸡蛋蛋黄抗氧化性能的影响。研究结果发现，不同水平的槲皮黄酮能显著提高蛋黄氧化稳定性，最长可达80 d，且日粮槲皮黄酮添加水平与贮存时间对蛋黄抗氧化性能的影响存在显著交互效应。此外，在整个实验期间，通过连续测定蛋黄中丙二醛的含量发现，蛋鸡采食含槲皮黄酮的日粮第7天时就可以改善蛋黄的氧化稳定性。槲皮黄酮对蛋黄的抗氧化作用影响可能与其可以清除自由基，终止蛋黄中自由基链反应有关（Van Acker等，2000）。Fayyaz 等（2016） 研究发现，蛋黄中槲皮黄酮平均水平为6.9 μg/mL。Goliomytis等（2014）研究发现，槲皮黄酮具有类似α-生育酚抗氧化活性功能，可以延长鸡肉保存期，日粮中摄入的槲皮黄酮或其代谢产物可以沉积进入肌肉，从而促进肉质的氧化稳定性，本研究结果中鸡蛋在贮存期间蛋黄氧化稳定性的结果可能与槲皮黄酮或其代谢产物沉积在蛋黄中从而降低脂质过氧化有关。

4 结论

日粮中添加0.1、0.2和0.4 g/kg槲皮黄酮可以提高蛋鸡的生产性能，改善蛋黄氧化稳定性。蛋鸡采食含槲皮黄酮的日粮可以提高鸡蛋新鲜度，延长保质期。综合蛋鸡生产性能和蛋黄氧化稳定性，日粮中槲皮黄酮适宜添加水平为0.2 g/kg。

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