补肾强督祛湿法治疗肾虚督寒型强直性脊柱炎疗效及对MMP-9、TIMP-1水平的影响

李远峰，宋寒冰，徐炜明，张大鹏，姜益常

(黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040)

强直性脊柱炎(AS)又名Marie-strümpell病、Von Bechterew病，是一种自身免疫系统疾病，多发于青少年男性，在中国的发病率约为0.25%[1]。该病属于西医风湿疾病范畴，首先侵犯骶髂关节，而后逐渐沿脊柱上行并可发展到颈椎，早期症状可有骶髂关节酸痛感、僵硬，活动后可改善，病情逐渐发展，可出现脊柱骨质破坏，引起脊柱段活动受限和畸形，导致脊柱强直僵硬，严重影响患者的生活质量[2-3]。目前西医临床上多采用非甾体抗炎药、糖皮质激素及生物制剂等治疗本病，但长期应用这些药物产生的不良反应和生物制剂昂贵的价格往往令患者难以接受。寻求中医中药治疗AS一直是人们研究的热点且深受患者青睐。本研究观察比较了补肾强督法治疗方案与洛索洛芬钠片治疗AS的疗效及对血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平的影响，旨在探讨补肾强督法治疗AS的相关作用机制。

1 临床资料

1.1一般资料 选择2016年1月—2017年1月在黑龙江中医药大学附属第一医院骨三科门诊确诊为肾虚督寒型AS患者80例，中医诊断标准参照《中药新药治疗强直性脊柱炎的临床研究指导原则》[4]。排除哺乳期妇女及妊娠者，其他血清阴性脊柱关节病者，严重脊柱关节畸形者，发病前2个月使用过非甾体抗炎药物者，酗酒或精神障碍者。将患者随机分为2组：中药组40例，男32例,女6例；年龄15～37(26.61±10.3)岁。西药组40例，男31例，女9例；年龄14～38(25.61±10.2)岁。2组性别、年龄比较差异均无统计学意义(P均>0.05) 。

1.2治疗方法 中药组:采用自拟补肾强督祛湿汤治疗。药物组成:鹿角胶10 g、附子10 g(先煎)、金毛狗脊30 g、桑寄生30 g、葛根30 g、白芍30 g、茯苓25 g、生甘草10 g、青风藤30 g、威灵仙15 g，以上药由本院统一煎制，每日1剂，每煎取汁150 mL，早、晚2次分服。西药组:洛索洛芬钠片(商品名：乐松，上海第一三共制药有限公司生产，国药准字H20030769，60 mg/片)口服，每次1片，每日3次。2组均以3个月为1个疗程,均治疗观察1个疗程。

1.3观察项目

1.3.1血清及上清中MMP-9 、TIMP-1水平 分别于治疗前及治疗3个月末采集2组患者晨空腹外周肘静脉血10 mL，在3 000 r/min下离心25 min，分离血清及上清，保存在1mL Eppendorf 管内，超低温(-80 ℃)冷冻。采用双抗体夹心ELISA法检测，人MMP-9 ELISA试剂盒购自大连泛邦化工技术开发有限公司；人TIMP-1 ELISA试剂盒购自北京冬歌博业生物科技有限公司按照说明书进行操作。

1.3.2血清C反应蛋白(CRP)水平及血沉(ESR)分别于治疗前及治疗3个月末采集2组患者晨空腹外周肘静脉血，采用ELISA法检测CRP水平，采用魏氏法检测ESR。

1.3.3中医证候评分 分别于治疗前及治疗3个月末对2组患者主症(腰骶臀胯僵痛、颈项脊背僵紧疼痛、四肢关节冷痛)和次症(四末不温、口不渴、大便溏泄)进行评分，其中主症按照轻重程度分级量化给予0分、2分、4分、6分，次症按照轻重程度分级量化给予0分、1分、2分、3分，评分越高提示症状越重[5]。

1.3.4临床疗效 参照《中药新药治疗强直性脊柱炎的临床研究指导原则》[4]拟定疗效评价标准。近期控制：治疗3个月主症、次症消失，病情控制；显效：治疗3个月主症、次症改善≥2/3，病情稳定；有效：治疗3个月主症、次症改善≥1/3；无效：治疗3个月主症、次症改善<1/3，且不稳定。

1.3.5不良反应 治疗过程中观察2组不良反应发生情况。

2 结 果

2.12组治疗前后血清MMP-9、TIMP-1水平比较 治疗前2组血清MMP-9、TIMP-1水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)；治疗后2组血清MMP-9、TIMP-1水平均明显降低(P均<0.05)，且中药组血清MMP-9、TIMP-1水平均明显低于西药组(P均<0.05)。见表1。

2.22组治疗前后上清中MMP-9、TIMP-1水平比较 治疗前2组上清中MMP-9、TIMP-1水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。治疗后中药组上清中MMP-9水平明显低于治疗前及西药组(P均<0.05)， TIMP-1水平有下降趋势，但与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)；西药组上清中MMP-9、TIMP-1水平与治疗前比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。见表2。

表1 2组治疗前后血清MMP-9、TIMP-1水平比较

注：①与治疗前比较，P<0.05；②与西药组比较，P<0.05。

表2 2组治疗前后上清中MMP-9、TIMP-1水平比较

注：①与治疗前比较，P<0.05；②与西药组比较，P<0.05。

2.32组治疗前后血清CRP水平及ESR比较 治疗后2组血清CRP水平及ESR均明显降低(P均<0.05)，但2组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。见表3。

表3 2组治疗前后血清CRP水平及ESR比较

注：①与治疗前比较，P<0.05。

2.42组治疗前后中医证候评分比较 治疗后中药组腰骶臀胯僵痛、颈项脊背僵紧疼痛、四肢关节冷痛、四末不温、口不渴、大便溏泄评分均明显降低(P均<0.05)，西药组仅腰骶臀胯僵痛、颈项脊背僵紧疼痛评分明显降低(P均<0.05)，且中药组四肢关节冷痛、四末不温、口不渴、大便溏泄评分均明显低于西药组(P均<0.05)。见表4。

表4 2组治疗前后中医证候评分比较分)

注：①与治疗前比较，P<0.05；②与西药组比较，P<0.05。

2.52组临床疗效比较 中药组控显率明显高于西药组(P<0.05)，2组总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表5。

表5 2组临床疗效比较

注：①与西药组比较，P<0.05。

2.62组不良反应发生情况 中药组有8例服药后出现轻微腹泻不适感，嘱其饭后服用，不良反应消失，不良反应发生率为20.0%；西药组出现恶心13例，腹泻3例，肝功能异常1例，采取停药及对症处理后消失，不良反应发生率为42.5%。中药组不良反应发生率明显低于西药组(P<0.05)。

3 讨 论

AS是一种慢性炎性疾病，其发病机制复杂，与遗传、感染、免疫、理化等因素有关[6]。中医学认为该病属“痹证”范畴，属于“脊痹”，症状为两胯活动受限， 严重者脊柱弯曲变形，甚至强直僵硬；或背部酸痛、肌肉僵硬沉重感， 阴雨天及劳累加剧[7-8]。治疗法则为补肾强督、扶正祛邪[9]。补肾强督祛湿法组方是本院经验方，方中金毛狗脊补肾通督强腰，附子、桑寄生祛风除湿,补肾强筋；葛根发散风寒；白芍缓急柔肝止痛；青风藤、威灵仙、茯苓祛风除湿，通络止痛；鹿角胶引诸药入督脉；生甘草缓急止痛，调和诸药。全方共奏散寒除湿、补肾强督之功。

现代研究发现，基质金属蛋白酶(MMPs)是体内主要的蛋白水解酶家族之一，对组织重构起着重要作用[10]。MMPs介导的基质降解涉及多种疾病过程，例如动脉硬化、血管重构、肿瘤转移及免疫炎症引起的关节和软骨的破坏。以往研究认为MMP-9与AS疾病活动度有关，可能是由于AS患者体内炎症刺激产生大量MMP-9，进而可降解明胶及存在于软骨中的其他胶原，从而破坏滑膜组织中破骨细胞进而造成软骨损伤，为疾病活动的有用标记物，可能是参与AS疾病活动和炎性骨破坏的重要因素[11]。组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)是一组低分子量蛋白，在体内分布广泛，正常情况下，MMPs与TIMPs保持相对平衡，这种平衡在组织修复中发挥着重要意义[12]。AS活动期时MMPs与 TIMPs 表达均上调，二者之间平衡被打破，导致细胞外基质(ECM)过度降解，促进其侵袭扩散，影响患者预后[13]。

本研究结果显示，治疗后中药组血清MMP-9、TIMP-1水平均明显低于西药组；中药组上清中MMP-9水平和腰骶臀胯僵痛、颈项脊背僵紧疼痛、四肢关节冷痛、四末不温、口不渴、大便溏泄评分均明显降低，西药组仅腰骶臀胯僵痛、颈项脊背僵紧疼痛评分明显降低，且中药组上清中MMP-9水平和四肢关节冷痛、四末不温、口不渴、大便溏泄评分均明显低于西药组；中药组控显率明显高于西药组，不良反应发生率明显低于西药组。提示补肾强督祛湿法治疗AS疗效更好，可明显改善患者相关症状，可能与明显下调MMP-9、TIMP-1水平有关。

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