白芍总苷与哌替啶联合使用的镇痛耐药性研究

尚晓宇 张楠 郭爱鑫 孙艳涛

【摘 要】目的：研究白芍总苷（TGP）与哌替啶（PD）联合使用的镇痛耐药性效果。方法：将60只小鼠随机平均分为对照组、TGP1组（3mg/ml）、TGP2组（6mg/ml）、TGP3组（9mg/ml）、PD组（3mg/ml）和联合注射组（TGP6mg/ml、哌替啶3mg/ml）。每只小鼠腹腔注射药物1.0mL药物。测量给药前及给药后不同时间（10、20、30、60min）小鼠的痛阈值。对上述对照组、TGP1组、TGP2组、TGP3组和联合注射组小鼠在连续8天给药并每天测痛，观察药物镇痛作用及耐受性。继续给药一天后，立即注射纳洛酮，观察小鼠的戒断反应。结果：白芍总苷与阈下剂量哌替啶配伍使用可显著提高小鼠痛阈。结论：白芍总苷与阈下剂量哌替啶合用可以增强镇痛效果，从而减少哌替啶的用量，具有一定的耐受性但不产生依赖性，降低其药物依赖性的发生率。

【关键词】白芍总苷；镇痛；耐受性；依赖性；哌替啶

[Abstract] Objective：To study the effect of analgesic drug resistance combined with TGP and pethidine （PD）.Methods The 60 mice were randomly divided into control group、TGP1 group （3mg/ml），TGP2 group （6mg/ml），TGP3 group （9mg/ml），PD group（3mg/ml）and combined injection group （TGP6mg/ml、PD3mg/ml）.Intraperitoneal injection of 1.2mL of drugs per mouse .The pain threshold of the mice was measured before and after the administration of the drug （10，20，30，60min）.The mice in the control group，TGP1 group，TGP2 group，TGP3 group and the combined injection group were given the drug for 8 consecutive days and the pain was measured daily to observe the drug analgesic effect and tolerance.One day after the drug was administered，naloxone was injected immediately to observe the withdrawal reaction of the mice.Results The combined use of total glucoside of paeoniae alba and subthreshold dose pethidine can significantly improve the pain threshold of mice.Conclusion Radix paeoniae alba total glycosides and subthreshold dose of dolantin share can enhance the analgesic effect，thus reducing the amount of pethidine，have certain tolerance but not become dependent，reduce the incidence of drug dependence.

[Key words] Radix paeoniae alba total glycosides； analgesic； tolerance； dependency； pethidine.

【中圖分类号】R730.5 【文献标识码】B 【文章编号】2095-6851（2018）04--01

癌症会给患者带来难以忍受的痛苦，尤其癌症晚期病灶较大，不断向附近组织器官进行浸润性生长，癌症疼痛的发生率大大提升。癌症性疼痛多为持续性疼痛，并随着病灶的增大而不断加剧，严重影响患者休息、睡眠，给患者带来极大的身心痛苦[1]。因此，解除癌症疼痛的方法主要是镇痛药物的使用。目前临床上使用的镇痛药主要有两类：一类是以吗啡为代表的麻醉性镇痛药，另一类是以阿司匹林为代表的非甾体抗炎药。前者效能较强，但易产生耐受性和依赖性，并伴有机体免疫功能的降低。后者虽无明显依赖性，但镇痛作用弱，不良反应较多。因此这两类药的应用均收到了限制。

白芍属于毛茛科植物芍药的一种干燥根，有效成分为白芍总苷，起到保护肝脏、抗炎等作用[2]。研究显示，TGP参与了众多的生理功能的调节，白芍总苷的药理及临床研究发现，白芍总苷具有多途径抑制自身免疫反应，对类风湿性关节炎有确切疗效等作用。同时，有研究表明，静脉滴注白芍总苷粉针剂可显著减少醋酸引起的小鼠扭体次数，揭示具有镇痛作用[3]。但尚未见进一步的研究。因此，我们拟进一步观察白芍总苷的镇痛作用，并且将白芍总苷与阈下剂量哌替啶合用，观察二者合用后的镇痛效果，为研制副作用少的中西医结合的镇痛复方制剂提供依据。

1 材料与方法

1.1 试剂、药物与仪器 白芍总苷（辽宁中医药大学药学院提供，批号：180101）临用前生理盐水稀释，盐酸哌替啶（青海制药厂有限公司产品）用生理盐水稀释，盐酸纳洛酮（naloxone，北京华素制药股份有限公司产品）临用前生理盐水稀释，生理盐水（辽宁中医药大学药学院提供），HH—4型快速恒温水浴箱。

1.2 实验动物及分组 健康雌性小鼠60只，体重（20±2）g，由辽宁中医药大学实验动物中心提供。实验过程中室温控制在（22±1）℃。60只实验动物随机分为对照组、TGP1（3mg/ml）、TGP2（6mg/ml）、TGP3（9mg/ml）、PD组（3mg/ml）和联合注射组（TGP6mg/ml、PD3mg/ml），每组动物10只。腹腔注射给药，每只小鼠每天不同浓度给药1.0ml。分别进行以下实验和检测，共9天。

1.3 实验方法 参照药理实验方法学热板法[4]，控制恒温水浴装置的水温在（55±0.5）℃，将小鼠置于热板上，记录至舔足时间作为痛阈，基础痛阈要求在10～30s之間，以60s作为高痛阈极限，超过60s者弃之不用。室温（22±1）℃。给药前测2次痛阈（间隔10min），取平均值作为小鼠基础痛阈。给药后分别在10、20、30、60min测小鼠痛阈值一次并记录。

1.4 药物耐受性测试 选用上述实验中的对照组、TGP1组、TGP2组、TGP3组、PD组和联合注射组小鼠，按照上述方法连续8天以同样的方式给药并测定各组小鼠痛阈，记录每天各组小鼠在不同时间的阴性后足数。

1.5 药物依赖性测试 第9天给药立即注射纳洛酮，观察小鼠的戒断反应，如全身震颤、搔耳、舔后足。10min内上述反应出现大于3次的即为阳性小鼠，记录各组阳性小鼠个数[2]。

1.6 统计学处理 在热板法痛阈的测试中，采用以表示，原始数据先做方差齐性检验，在依赖性测试中，数据用10 min内出现的阳性小鼠个数表示。计数资料组之间比较采用χ?检验（确切概率法）；计量资料采用方差分析，P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 药物镇痛作用 表1可以看出，白芍总苷与哌替啶本身都有一定的镇痛作用，但合用后可显著提高小鼠的痛阈，其镇痛效应显著强于单独用药组（P<0.05），差异有统计学意义。并且TGP质量浓度从3mg/kg递增至9mg/kg，其镇痛效果逐渐升高，说明TGP的镇痛效果具有明显的剂量依赖性。但是TGP1组与对照组差异无统计学意义。

PD组的镇痛作用明显高于TGP组，其中TGP2组中，各段间差异有统计学意义（P<0.05），联合注射组镇痛效果高于PD组（P<0.05，表1）。

与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与PD组比较，△P<0.05，△△P<0.01

2.2 药物耐受性 连续8天给药后，各组差异较显著，TGP2组、TGP3组、PD组和联合注射组的镇痛效果均有不同程度的降低（图1）。运用重复数据方差分析得出不同时间水平镇痛效果呈下降趋势，差异有统计学意义（P=0.002）。联合使用组优于PD组和TGP2组镇痛效果，差异有统计学意义（P=0.00），提示TGP和PD具有协同镇痛作用。第三天开始，各组出现耐受现象，联合注射组与PD组差异无统计学意义。第8天联合注射组效果显著高于PD组（P=0.00），提示联合注射组下降幅度要小于单独用药。

2.3 药物依赖性 第9天给药后，立即注射盐酸纳洛酮，PD组的戒断反应阳性体征小鼠数目显著高于对照组，且PD组的戒断反应阳性体征小鼠数目高于联合使用组（P<0.05），而TGP2组、TGP3组与对照组相比无统计学差异（P>0.05，表2）。提示TGP本身不具有依赖性，并且对PD的依赖性有改善作用。

3 讨论

TGP是毛茛科植物芍药的一种干燥根的有效成分，参与了体内多种生理功能的调节。孔霞[5]等研究证明了白芍总苷有显著的镇痛作用。王永祥等[6]研究发现白芍总苷在一定范围内呈剂量依赖性抑制小鼠扭体和嘶叫，提示白芍总苷对白细胞介素-2的抑制作用，可能参与其镇痛机制。本实验结果显示TGP从低浓度到高浓度，镇痛效果逐渐升高。

同时，本实验进行TGP与PD联合使用的镇痛效果研究：PD的镇痛效果显著高于TGP。近期研究发现，芍药苷对于由脂多糖（LPS）等刺激诱导的小胶质细胞相关炎症具有显著的抑制作用[7]。同时，芍药苷可显著减轻由阿片介导的神经系统小胶质细胞活化以及神经炎症的产生[8]。本实验结果显示，TGP和PD联合使用后镇痛效果显著高于单独使用PD或TGP（P<0.05）。本实验结果提示了TGP与PD具有协同作用，TGP显著增强了PD的镇痛效果，其机制可能与白芍总苷减轻神经炎症有关。

在癌症疼痛的治疗中，以吗啡为代表的麻醉性镇痛药效很强，但容易产生依赖性[9]，而未见TGP具有依赖性的研究。本实验连续注射TGP的小鼠产生了耐受性，TGP的镇痛效果随注射次数逐步降低，但是与PD组的比较结果显示，TGP镇痛作用下降较PD平缓。本实验结果显示，TGP与PD合用，可以明显延缓耐受性，使PD的镇痛效果持续更长时间。

PD一旦产生了依赖性，停药后会出现明显的戒断反应。本实验也予以证实，在给小鼠连续注射PD九天后，立即注射阿片类受体阻断剂纳洛酮，小鼠出现了明显的戒断反应症状。而连续注射TGP九天后的小鼠在注射纳洛酮后并未出现显著的戒断反应，提示TGP不具有依赖性（成瘾性）。本实验中，联合注射连续九天的小鼠戒断反应减弱，表明TGP对PD的依赖性产生了改善作用。

本实验通过对小鼠单独注射TGP、PD与联合注射TGP和PD后测量小鼠痛阈值，证实TGP具有明显的镇痛作用，并且与PD有协同作用。这可能与白芍总苷减轻神经炎症有关，增强了哌替啶的镇痛作用，这为临床研制镇痛的中西医结合用药提供了新思路。

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