高效液相色谱/二极管阵列法快速测定炒瓜子中糖精钠与安赛蜜

◎ 颜 慧，杨 嘉，王 帅，于 浩

（扬州市产品质量监督检验所，江苏 扬州 225000）

瓜子是日常生活中常见的休闲炒货食品[1]。糖精钠和安赛蜜因其甜度高的特点被广泛地添加到食品中，从而增加食品的甜味，提高口感度，但过量添加食用有害人体健康[2]，因而我国规定了糖精钠、安赛蜜的使用限量和检测方法[3]。目前检测甜味剂的方法有非水滴定法[4]、荧光检测法[5]、分光光度计法[6]、液相色谱法[7]、离子色谱法[8]、色谱-质谱仪联用法[9]超高效液相色谱-串联质谱法[10]等。在食品的检测工作中，国家标准规定的糖精钠的检测方法为GB 5009.28-2016[11]，安赛蜜的检测方法为GB/T 5009.140-2003[12]，暂时还没有针对瓜子样品的分离方法，致使在检测炒瓜子中的糖精钠时，易形成重叠峰[13]，影响分离和定量。本法完善部分色谱条件，对炒瓜子中糖精钠、安赛蜜进行液相色谱分离测定，8 min分离一个样，可得到满意的结果。

1　材料与方法

1.1　试剂与仪器

甲醇（色谱纯）；乙酸锌、亚铁氰化钾均为分析纯；糖精钠（GBW15001）、安赛蜜（GBW1001711601）标准储备液；实验室用水均为一级去离子水；乙酸铵溶液（0.02 mol/L）：称取乙酸铵1.54 g，加水定容至1 000 mL，0.22 μm微孔滤膜过滤。

Agilent1260型高效液相色谱仪；色谱柱：Agilent C18柱4.6 mm×150 mm；超声振荡器；真空泵（附抽滤装置）；电子分析天平：感量0.000 1 g；0.22 μm水相微孔滤膜；高速离心机。

1.2　色谱条件

Agilent C18柱4.6 mm×150 mm；检测波长230 nm；柱温25 ℃；进样量10 μL；甲醇-乙酸铵流动相比例为16∶84（V/V），流速0.60 mL/min。

1.3　样品前处理

瓜子连壳打碎、混匀，称取约2.5 g样品（精确到0.000 1 g）于50 mL比色管中，加水30 mL，斡旋震荡2 min，超声萃取20 min，分别加入乙酸锌溶液（220 g/L）和亚铁氰化钾溶液（106 g/L）2.5 mL，加水定容至刻度，静置沉淀30 min，取上清液10 000 r/min离心5 min，过0.22 μm微孔滤膜，滤液待液相色谱上机测定。

1.4　测定

1.4.1糖精钠和安赛蜜标准溶液配制

依次吸取糖精钠溶液标准物质GBW15001（1.00 mg/mL）、安赛蜜溶液标准物质GBW1001711601（1.00 mg/mL）各 0.05、0.10、0.25、0.50、1.00 mL 和1.50 mL于10 mL容量瓶中，定容至刻度，再从配制成0.01 mg/mL的容量瓶中吸取100 μL、500 μL溶液定容至10 mL，配制成糖精钠、安赛蜜混合标准溶液系列浓度为 0.000 1、0.000 5、0.005、0.010、0.025、0.050、0.100 mg/mL和0.150 mg/mL。

1.4.2样品测定

取样品处理液自动进样10 μL，以保留时间定性，根据外标法峰面积定量。

计算公式：

公式中，X为样品测得的含量，单位g/kg；C为由标准曲线得出样液中待测物浓度，单位mg/mL；V为样品定容体积，单位mL；M为样品质量，单位g；0.7563为两结晶水糖精钠标准物质与无结晶水糖精的换算系数。

2　结果与分析

2.1　液相色谱图

所得糖精钠、安赛蜜标准色谱图及试样图如图1、图2所示。

图1　糖精钠、安赛蜜标准品的液相色谱图（0.000 1 mg/mL）

图2　含糖精钠、安赛蜜的瓜子试样的液相色谱图

2.2　标准曲线线性关系

糖精钠、安赛蜜混合标准溶液系列浓度为0.000 1、0.000 5、0.005、0.010、0.025、0.050、0.100 mg/mL 和0.150 mg/mL，进样10μL进行高效液相色谱分析，用峰面积与浓度进行线性回归，糖精钠回归方程分别为Y=41053.4382Amt+0，R=0.99997；安赛蜜回归方程为Y=54678.1382Amt+0，R=0.99995，方程线性关系良好。

2.3　最低检出限

取相对浓度较低的标准样品进行20次检测，用峰面积计算标准偏差，以3倍标准差，计算出最低检出限为0.002 g/kg。

2.4　样品精密度实验

连续用此方法平行测定样品，进行6次测定，结果见表1，相对标准偏差为3.11%～5.33%。

表1　精密度测定结果表

2.5　样品加标回收率测定

称取2.5 g均匀样品在标准曲线范围内加入低、中、高3个浓度的2种标准物质，按照1.3进行样品前理。对样品连续分析2次，2种标准物质加标回收率实验结果见表2。糖精钠低浓度添加水平回收率为96.9%，中浓度添加水平回收率为98.7%，高浓度添加水平回收率为99.4%，安赛蜜低浓度添加水平回收率为101.7%，中浓度添加水平回收率为98.3%，高浓度添加水平回收率为97.8%，结果表明该方法回收率在95%～110%，符合实验室准确度要求。

表2　样品加标回收实验结果表

2.6　市场抽样检测结果

采用本方法，从市场上抽取30份炒瓜子样品，对样品中的糖精钠和安赛蜜进行了检测，每次样品平行测定2次，结果保留两位有效数字，其测定结果见表3。

表3　实际样品的测定结果表（n=2，g/kg）

3　结语

在优化后的色谱条件下，本方法对炒瓜子中糖精钠、安赛蜜进行色谱分析，能够快速测定瓜子中糖精钠与安赛蜜的含量，很好解决了国标方法中测定炒瓜子中糖精钠峰拖尾和分离不全的问题，并且该方法样品处理简单，重复性和选择性好，适用于快速测定炒瓜子中的糖精钠与安赛蜜，可满足日常快速检测需求。