5种生物杀虫剂对4种天敌昆虫的安全性评价

尹园园， 吕 兵， 林清彩， 陈 浩， 翟一凡， 于 毅， 郑 礼山东省农业科学院植物保护研究所/山东省植物病毒学重点实验室，天敌与授粉昆虫研究中心，山东 济南 250100

随着植保绿色防控技术的发展以及高端产品的要求，对生物杀虫剂和天敌昆虫的需求在增长(杨普云和任彬元，2018)。用天敌昆虫防治害虫见效慢但持效期长，生物杀虫剂见效快但持效期短。因此，使用生物杀虫剂与天敌昆虫结合的方式防治害虫，效果更好。

丽蚜小蜂EncarsiaformosaGahan、东亚小花蝽Oriussauteri(Poppius)、食蚜瘿蚊Aphidoletesaphidimyza(Rond.)、巴氏新小绥螨NeoseiulusbarkeriHughes均是目前应用比较广泛的天敌昆虫。丽蚜小蜂对温室粉虱有良好的防控效果，是全球传统生物防治的成功典范之一(Liuetal.，2015; Thoemingetal.，2003)。东亚小花蝽是一种在我国北方分布极为广泛的天敌昆虫，对蓟马类有很强的控制能力(郭建英和万方浩，2001; 孙晓会等，2009； 张安盛等，2007)，在害虫综合治理中具有较大的应用价值(刘文静等，2011a，2011b)。食蚜瘿蚊是蚜虫的重要捕食性天敌，可以捕食60余种蚜虫(Harris，1973)。巴氏新小绥螨是害虫(螨)的捕食性天敌之一，已经被美国和欧洲许多国家用于防治叶螨、蓟马等吸汁性害虫(螨)。苦参碱(matrine)、桉油精(cineole)、鱼藤酮(rotenone)、除虫菊素(pyrethrin)、橄榄鲨(potassium laurate)为5种生物杀虫剂，用于防治蔬菜上的蚜虫、粉虱、蓟马、叶螨、斑潜蝇等害虫。

使用对害虫高效且对天敌昆虫安全的药剂是害虫综合治理的关键(Wright & Verkerk，1995)。研究表明，0.6%烟碱·苦参碱乳油对捕食性天敌瓢虫具有一定的安全性(王彦阳，2017)；除虫菊素、苦参碱适宜在烟蚜Mgzuspersicae(Zulzer)防治中与异色瓢虫Harmoniaaxyridis(Pallas)交替或组合使用(潘悦等，2013)；但也有研究表明，生物杀虫剂会杀伤天敌昆虫(王庆森等，2014)。因此，在同时使用生物杀虫剂与天敌昆虫时，需明确生物杀虫剂对天敌昆虫的影响。苦参碱、桉油精、鱼藤酮、除虫菊素和橄榄鲨这5种生物杀虫剂对丽蚜小蜂、东亚小花蝽、食蚜瘿蚊和巴氏新小绥螨等4种天敌昆虫的安全性尚不明确，本实验对此进行研究，以期为生物杀虫剂和天敌昆虫的联合使用提供依据。

1 材料与方法

1.1 供试天敌昆虫

丽蚜小蜂、食蚜瘿蚊、东亚小花蝽由山东鲁保科技开发有限公司提供，巴氏新小绥螨由首伯农(北京)生物技术有限公司提供。

1.2 供试药剂

0.5%苦参碱水剂(北京三浦百草绿色植物制剂有限公司)，5%桉油精可溶液剂(北京亚戈农生物药业有限公司)，5%鱼藤酮可溶液剂(云南南宝科技有限责任公司)，1.52%除虫菊素水溶剂(云南南宝科技有限责任公司)，49%橄榄鲨软皂水剂(深圳百乐宝生物农业科技有限公司)。

1.3 方法

根据田间推荐使用浓度，确定各药剂的实验浓度：1.8×103mg·L-10.5%苦参碱水剂，3.3×103mg·L-15%桉油精可溶液剂，6.7×103mg·L-15%鱼藤酮可溶液剂，6.0×103mg·L-11.52%除虫菊素水溶剂，1.0×104mg·L-149%橄榄鲨软皂水剂。将各药剂按实验浓度用蒸馏水进行稀释，作为备用药液。

本实验于温度26 ℃、光周期16L∶8D、相对湿度(60±5)%的人工气候箱内进行。

1.3.1 5种生物杀虫剂对丽蚜小蜂的影响 (1)对成蜂的影响。参照《化学农药环境安全评价试验准则》(蔡道基，1991)，采用玻璃管药膜法，在指形管内(高10.5 cm、内径3 cm、内表面102.3 cm2)加入1 mL经稀释的药液，充分滚吸直至晾干制成药膜管。将准备好的24 h内羽化的供试丽蚜小蜂成蜂放入药膜管中爬行1 h后转入无药管中，并饲喂10%蜂蜜水，用黑布封紧管口。以蒸馏水处理作对照。每个处理5次重复，每个重复(50±10)头丽蚜小蜂。分别于24和48 h后检查并记录死亡(用小毛笔轻触不动即为死蜂)和存活蜂数。

(2)对蛹的影响。将收集的3日龄丽蚜小蜂蛹制成蜂卡。将备用药液置于准备好的烧杯中，将准备好的蜂卡在药液中浸渍10 s后取出，空气中自然晾干，放于恒温室中自然发育。以蒸馏水浸渍蜂卡为对照，每个处理约100个蜂蛹，每个处理重复5次。10～15 d后记录蛹的羽化数量。

1.3.2 5种生物杀虫剂对东亚小花蝽成虫的影响 采用玻璃管药膜法进行测定，玻璃管药膜的制备与1.3.1相同。接入10头东亚小花蝽成虫，1 h后将其移入干净的试管内，每个处理重复5次。调查并记录1、24 h后各处理东亚小花蝽的死亡数量。用毛笔轻触东亚小花蝽身体，以虫体不动为死亡标准。以蒸馏水处理为对照。

1.3.3 5种生物杀虫剂对食蚜瘿蚊幼虫的影响 在直径9 cm的培养皿内放入直径9 cm的滤纸，取1 mL药液使其均匀分布于滤纸上，用勾线笔分别挑取个体大小一致、健康活泼的食蚜瘿蚊2龄幼虫于滤纸上，每个处理接虫10头，每个处理5次重复。分别于24和48 h后在双目解剖镜下检查、记录食蚜瘿蚊幼虫死亡数。

1.3.4 5种生物杀虫剂对巴氏新小绥螨成螨的影响 方法同1.3.3，取健康活泼的巴氏新小绥螨于滤纸上，每个处理接虫10头，每个处理4次重复。分别于24和48 h后在双目解剖镜下检查、记录巴氏新小绥螨成螨死亡数。

1.4 数据分析

采用SPSS 20.0数据处理软件分析实验数据的差异显著性，不同药剂对几种天敌昆虫的影响均采用单因素方差分析，多重比较采用Tukey法，显著性水平为0.05。当对照组死亡率大于5%时，对死亡率进行校正。

校正死亡率/%=(处理组死亡率-对照组死亡率)/(1-对照组死亡率)×100。

根据国际生物防治组织(IOBC)的评价标准，将农药对昆虫的影响分为4个等级：一级(无害)，死亡率<30%；二级(轻微有害)，30%≤死亡率<79%；三级(中度有害)，79%≤死亡率≤99%；四级(极度有害)，死亡率>99%(Hassan，1992)。

2 结果与分析

2.1 5种生物杀虫剂对丽蚜小蜂的影响

实验结果(表1)表明，5种生物杀虫剂在药后24 h(F5，24=498.21，P<0.01)和48 h(F4，20=220.53，P<0.01)对丽蚜小蜂成蜂产生显著影响。与对照相比，苦参碱、鱼藤酮、除虫菊素这3种药剂对丽蚜小蜂成蜂的影响较大，药后24 h死亡率均在96.83%以上，48 h死亡率在98.65%以上；橄榄鲨对丽蚜小蜂成蜂的危害最小，药后48 h校正死亡率仅为21.86%。根据 IOBC 的评价标准，橄榄鲨对丽蚜小蜂成虫无害，桉油精对丽蚜小蜂成虫轻微有害，鱼藤酮对丽蚜小蜂成虫中度有害，苦参碱和除虫菊素对丽蚜小蜂成虫极度有害。

表1 5种生物杀虫剂对丽蚜小蜂成蜂、食蚜瘿蚊幼虫和巴氏新小绥螨成螨的影响Table 1 Effects of five biological insecticides on adults of the parasitoid Encarsia formosa, the larvae of the predatory midge, Aphidoletes aphidimyza, and the adults of the predatory mite Neoseiulus barkeri

同列数据(平均值±标准误)后附不同小写字母者表示差异显著 (P<0.05, Tukey)。

The data (means±SE) in the same column with the different letters indicate significant differences (P<0.05, Tukey-test).

不同生物杀虫剂对丽蚜小蜂羽化率的影响显著不同(F5，24=207.12，P<0.01，图1)。蒸馏水处理丽蚜小蜂伪蛹的羽化率为91.89%；鱼藤酮、除虫菊素对丽蚜小蜂伪蛹的杀伤力较强，羽化率均低于10%；苦参碱和橄榄鲨处理后的羽化率分别为58.69%和73.34%；桉油精对丽蚜小蜂蛹的杀伤力最小，羽化率为85.68%。

2.2 5种生物杀虫剂对东亚小花蝽成虫的影响

实验结果(表2)表明，5种生物杀虫剂在药后1 h(F5，24=441.16，P<0.01)和24 h(F4，20=43.21，P<0.01)对东亚小花蝽产生显著影响。除虫菊素对东亚小花蝽的影响最大，药后1 h的死亡率就达到100%；苦参碱影响次之，药后24 h东亚小花蝽死亡率为40.91%；桉油精、鱼藤酮、橄榄鲨对东亚小花蝽的影响较小，药后24 h东亚小花蝽死亡率在2.27%～15.91%之间。 根据 IOBC 的评价标准，鱼藤酮、橄榄鲨、桉油精对东亚小花蝽无害，苦参碱对东亚小花蝽轻微有害，除虫菊素对东亚小花蝽极度有害。

图1 5种生物杀虫剂对丽蚜小蜂羽化率的影响Fig.1 Effects of five biological insecticides on the eclosion rate of the parasitoid Encarsia formosa柱上不同小写字母表示差异显著 (P<0.05, Tukey)。Different letters on the column indicate significant differences (P<0.05, Tukey-test).

表2 5种生物杀虫剂对东亚小花蝽成虫的影响Table 2 Effects of five biological insecticides on adults of the predatory heteropteran, Orius sauteri

同列数据(平均值±标准误)后附不同小写字母者表示差异显著 (P<0.05, Tukey)。

The data (means±SE) in the same column with the different letters indicate significant differences (P<0.05, Tukey-test).

2.3 5种生物杀虫剂对食蚜瘿蚊幼虫的影响

实验结果(表1)表明，5种生物杀虫剂在药后24 h(F5，24=364.31，P<0.01)和48 h(F4，20=66.15，P<0.01)对食蚜瘿蚊产生显著影响。鱼藤酮对食蚜瘿蚊幼虫的影响最大，药后24 h食蚜瘿蚊幼虫死亡率就达到100%；苦参碱、桉油精、除虫菊素、橄榄鲨对食蚜瘿蚊的影响均较小，药后48 h食蚜瘿蚊幼虫死亡率在4.44%～15.56%之间。根据 IOBC 的评价标准，鱼藤酮对食蚜瘿蚊幼虫极度有害，苦参碱、桉油精、除虫菊素、橄榄鲨对食蚜瘿蚊幼虫无害。

2.4 5种生物杀虫剂对巴氏新小绥螨成螨的影响

实验结果(表1)表明，5种生物杀虫剂在药后24 h(F5,24=82.88，P<0.01)和48 h(F4,20=49.68，P<0.01)对巴氏新小绥螨产生显著影响。桉油精、鱼藤酮、除虫菊素对巴氏新小绥螨的影响较大，药后48 h死亡率均达到100%；苦参碱对巴氏新小绥螨的影响最小，药后48 h死亡率为15.91%。 根据 IOBC 的评价标准，桉油精、鱼藤酮、除虫菊素对巴氏新小绥螨极度有害，橄榄鲨对巴氏新小绥螨轻微有害，苦参碱对巴氏新小绥螨无害。

3 结论

肖达等(2014)研究表明，噻嗪酮可与捕食性天敌昆虫异色瓢虫、东亚小花蝽、智利小植绥螨PhytoseiuluspersimilisAthias-Henriot和寄生性天敌松毛虫赤眼蜂TrichogrammadendrolimiMatsumura、丽蚜小蜂、中红侧沟茧蜂MicroplitismediatorHaliday联合使用；甲氧虫酰肼和茚虫威可与天敌昆虫蚜茧蜂AphidiuscolemaniViereck、食蚜瘿蚊、胡瓜钝绥螨Neoseiuluscucumeris(Oudemans)联合使用(Staraetal.，2011)；生物杀虫剂印楝素可与赤眼蜂联合使用(Lingathuraietal.，2015)。本研究结果表明，橄榄鲨可与丽蚜小蜂、东亚小花蝽、食蚜瘿蚊一起使用，桉油精可与东亚小花蝽、食蚜瘿蚊一起使用，苦参碱可与食蚜瘿蚊、巴氏新小绥螨一起使用，鱼藤酮可与东亚小花蝽一起使用，除虫菊素可与食蚜瘿蚊一起使用。

本研究在实验室条件下进行，而在田间的实际应用过程中可能会由于环境条件的不同或药剂实际用量的不同导致对天敌昆虫杀伤力的变化。因此，为了全面评价农药对天敌昆虫的安全性，应当开展相关的田间试验。

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