非小细胞肺癌多途径标本检测EGFR基因突变研究进展

王晓薇　李文新

【摘 要】肺癌是目前发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌是其主要组成部分，可以占到肺癌患者总数的80%以上。随着分子学的高速发展，驱动基因突变成为了肺癌治疗领域的研究热点，非小细胞肺癌的治疗已经进入了个体化靶向治疗的时代。酪氨酸激酶抑制剂是分子靶向治疗的代表药物，研究发现其疗效和EGFR基因突变密切相关。肿瘤组织是EGFR基因检测的金标准，临床上许多患者初诊时已为中晚期，可能无法获得足够的肿瘤组织标本。本文就非小细胞肺癌多途径标本检测EGFR基因突变的对比进行综述。

【关键词】非小细胞肺癌；多标本；EGFR基因检测

【中图分类号】R734.2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2018）05-03--01

引言

非小细胞肺癌是肺癌的常见组织类型。以往，晚期非小细胞肺癌只能规律使用铂类药物进行化疗，化疗与支持治疗相比，虽然在一定程度上延长了患者的总生存期，但化疗的反应率较低，也仅局限于20%的反应率（1）。近来，人们对肺癌驱动基因的研究越来越多。已知EGFR基因通过激活其下游的信号通路，引起细胞的恶性转化。有研究发现，EGFR基因突变率与人种密切相关，在欧美人群中突变率约为10%；在东亚人群中突变率约为30%-50%，其中在亚洲、女性、不吸烟患者中 EGFR突变率更高，可达到60%-70%。因此，进行EGFR基因检测对非小细胞肺癌患者具有十分重要的临床意义。现就非小细胞肺癌多途径标本检测EGFR基因突研究进展综述如下。

1 原发灶肿瘤组织EGFR基因突变的检测

基因检测的金标准是肿瘤组织，其常见的获取方式包括手术切除、支气管镜活检、肺穿刺活检等。2004年，美国的 Lynch和 Paez等（2-3）提出了吉非替尼的疗效与 EGFR基因的第19和第21号外显子密切相关，该两处外显子有突变的患者对吉非替尼反应率高。随后在日本，Kosaka等（4）进行了有关 EGFR基因突变的研究，在选取的277例患者中有111例患者存在基因突变，突变率为40%，其中主要的基因突变发生在第19号和第21号外显子上。在韩国，Han等（5）的有关研究也指出EGFR基因突变主要集中在第19-21号外显子，这与之前的研究结果一致。Han的研究还发现，EGFR基因突变型的患者预后更好，他们对分子靶向药物的反应率更高。已有研究（6-8）证实了EGFR基因突变型的患者使用EGFR-TKI的有效率高达70%以上，大部分患者的中位生存时间高达20-30个月。对于EGFR基因突变型的患者，使用靶向药物可明显提高其生活质量。中国的 Huang等（9）做了有关研究，EGFR基因的总突变率为38.6%，在101例基因突变的患者中，有13例为第19号外显子突变，有4例为第20號外显子突变，有22例为第21号外显子突变。在2005年，北京协和医院的Mu等（10）对76例肺癌患者进行EGFR基因检测，其总突变率为39.8%。

大多数晚期患者无法获得足够的肿瘤组织进行基因检测，此外，EGFR基因突变情况可能随着治疗和病程发生变化，这就使得基因检测变得困难，同时限制了患者进行靶向治疗。所以我们需要探寻合理的代替品来做EGFR基因突变检测。

2 转移淋巴结EGFR基因突变的检测

相比与肿瘤组织，淋巴结取材更为简便，患者受痛苦较小。2015年，刘毅等（11）通过收集非小细胞癌患者原发灶和相应的纵膈转移淋巴结标本 100例，其中原发灶EGFR基因突变有37例，纵隔转移淋巴结EGFR基因突变有34。随后对100例患者同时检测原发灶和纵隔转移淋巴结的基因突变情况，结果发现原发灶和纵隔转移淋巴结同时存在 EGFR基因突变的概率为95.77%，同时不存在EGFR基因突变的概率为97.67%。其中3例患者原发灶有基因突变，但是纵隔转移淋巴结无基因突变，肺癌原发灶和纵隔淋巴结EGFR基因突变一致率高达97%。也就是说EGFR基因突变率在原发灶和纵隔转移淋巴结十分相似，两者具有较好的同一性。另外，有Meta结果分析显示（12），非小细胞肺癌患者原发灶和转移淋巴结的EGFR基因突变一致率高达84%（RR=0.90，P=0.45）。EGFR基因突变的异质性无论在原发灶、转移灶还是复发灶中均比较少见，因此我们需要不断提高检测方法的敏感性，更便利地辅助临床诊治。

3 外周血EGFR基因突变的检测

循环DNA主要来源于细胞凋亡和细胞坏死。肺癌在进展的不同阶段伴随着特定基因的改变，这些改变的基因片段会进入血液循环中。目前已有研究利用外周血进行EGFR基因突变检测。在西班牙，SLOG研究显示（13），外周血和肿瘤组织EGFR基因突变的一致率为59.1%。在国内，何诚等（14）收集了术后病理确诊为非小细胞肺癌的组织蜡块标本和外周血标本，实验表明，453例肿瘤组织样本中有185例存在EGFR基因突变，突变率为40.84%，229例外周血样本中有66例存在EGFR基因突变，突变率为28.82%。研究对象中包括配对样本132例，在配对实验中外周血有35例存在EGFR基因突变，肿瘤组织有54例存在EGFR基因突变，两样本同时存在EGFR基因突变有34例，其基因突变的一致率为84.09%。目前利用血液标本检测基因突变还有很多问题有待解决，随着临床检测手段的不断成熟，血液标本的发展前景会越来越好。

4 胸腔积液EGFR基因突变的检测

恶性胸水是晚期非小细胞肺癌患者的常见并发症，获取胸水相对较容易，胸水中包含的肿瘤信息更加丰富。2015年，我国王斯等（15）进行了有关研究，他选取了非小细胞肺癌患者72例，利用胸腔积液和活检组织对比检测EGFR基因。研究表明，在胸水组，EGFR基因突变率为48.61%；在活检组织组，EGFR基因突变率为51.39%，两者差异无统计学意义。魏冰等（16）检测109例肺癌患者胸腔积液及配对肿瘤组织中 EGFR基因突变，实验表明，两样本基因突变的一致率较高，胸水可以代替肿瘤组织进行EGFR基因检测，从而为更多的晚期患者带来治疗机会。

5 展望

分子靶向药物是肺癌研究的热点，这是非小细胞肺癌治疗的新领域，目前肿瘤组织仍是检测驱动基因的金标准，但在很多时候，我们要利用肿瘤组织的代替品，不管是转移淋巴结、外周血、还是胸水，都需要更多的研究来证实其检测结果的准确性，从而为临床提供更可靠的依据。

参考文献

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