子宫内膜样腺癌中酪氨酸蛋白激酶受体A7和星形胶质细胞上调基因-1的表达及相关性

金艳霞 张晓兰 冶俊玲

(青海大学附属医院肿瘤妇科，青海 西宁 810001)

子宫内膜癌中最常见的类型是子宫内膜样腺癌，是由子宫内膜异型增生转变而来，这种转化伴有基因和蛋白的表达失常〔1〕。酪氨酸蛋白激酶受体(Eph)蛋白构成最大受体酪氨酸激酶亚家族，EphA7是家族中最重要的成员，参与发育过程，可以调节细胞黏附和细胞增殖过程〔2〕。星形胶质细胞上调基因(AEG)-1是近年发现的癌基因，通过核因子(NF)及相关信号通路表达在多种肿瘤组织中〔3〕。本文检测子宫内膜样腺癌术后组织中EphA7和AEG-1的表达特征，分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 2016年1～12月青海大学附属医院妇产科收治的子宫内膜样腺癌并行手术根治的患者为观察组57例，年龄41～81岁，平均56.2岁。诊断均经病理医师确诊，并符合WHO中的诊断标准及分型。排除标准：①林奇综合征；②伴有生殖系统畸形。子宫内膜复杂性增生伴不典型增生21例为对照组1，年龄35～70岁，平均54.3岁。子宫内膜复杂性增生不伴不典型增生21例为对照组2，年龄40～68岁，平均50.9岁。子宫脱垂后行子宫全切后15例为对照组3，年龄56～80岁，平均60.2岁。4组均留取术后子宫内膜的蜡块组织。4组年龄构成差异无统计学意义，均知情同意。

1.2EphA7和AEG-1检测 术后标本常规甲醛溶液固定，常规取材，石蜡包埋，切取4 μm切片，采用免疫组化SP法检测EphA7和AEG-1表达，行二氨基联苯胺(DAB)显色。严格质量控制，并设阳性对照，严格按说明书操作，尽量减少误差。

1.3结果判断方法 EphA7定位于细胞质，AEG-1定位于细胞核和(或)细胞质，以出现淡黄色-棕褐色为显色；按显色强度分4个等级：0分，无显色；1分，淡黄色；2分：棕黄色；3分，棕褐色。根据高倍镜下(400倍视野)阳性细胞数的不同分为5个等级：0分，<5%；1分，5%～25%；2分，26%～50%；3分，51%～75%；4分，76%～100%。将显色强度×阳性细胞数的得分作为最终评定标准，0～3分为阴性，>3分为阳性。

1.4统计学方法 应用SAS6.12统计软件进行χ2检验，线性相关分析。

2 结 果

2.14组EphA7和AEG-1阳性率比较 4组EphA7和AEG-1阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 4组EphA7和AEG-1阳性率的比较〔n(%)〕

2.2观察组不同临床特征中EphA7和AEG-1阳性率的比较 EphA7和AEG-1表达与肿瘤增殖指数、肿瘤最大径相关；AEG-1的表达与肿瘤的浸润深度密切相关。二者均与年龄、肿瘤分化及淋巴结转移无明显相关性。见表2。

2.3观察组中EphA7和AEG-1相关性 EphA7和AEG-1呈正相关(r=0.46，P=0.047)。

表2 观察组不同临床特征中EphA7和AEG-1阳性率的比较〔n(%)〕

3 讨 论

子宫内膜样腺癌的恶性腺体类似于正常增生期子宫内膜腺体，具有恶性细胞学特征，同时还具有融合筛状生长、缺乏单个腺体完整性、绒毛腺管状结构，多数肿瘤是1、2级，即分化较好，但是少数肿瘤分化较差。病变形成中具有肿瘤基因的表达失常〔4，5〕。根据序列相似性将Eph受体分为两种，即EphA和EphB，共有14个Eph受体，8个Ephrin配体，EphA7是重要成员〔6，7〕，其控制着一系列不同细胞间的相互作用，EphA7与相应的配体结合后可以引起其结构变化，能有效活化细胞质内的酪氨酸激酶，引起自身的磷酸化，并活化底物分子，引发受体细胞的正向信号传导，发挥生物学作用〔8，9〕。孟祥瑞等〔10〕通过观察非小细胞肺癌中EphA7的表达，发现EphA7在肿瘤中高表达，同时与肿瘤纤维化和肿瘤大小有关，并对肿瘤细胞增殖有一定的影响。AEG-1的基因定位于染色体8q22上，包含11个内含子和12个外显子，分子量为80 kD。AEG-1可促进肿瘤细胞增殖、侵袭和转移，同时可以使肿瘤细胞逃逸凋亡的过程，促进肿瘤细胞的侵袭和播散〔11，12〕。余剑琴等〔13〕通过观察AEG-1在子宫颈癌中的表达，发现AEG-1的表达水平与脉管浸润和淋巴结转移有关，认为AEG-1能促进子宫颈癌间质的微血管生成，其机制可能与NF-κB信号途径引起血管内皮生长因子(VEGF)上调有关。

本研究结果提示在子宫内膜腺体异型增生和癌变过程中，EphA7和AEG-1高表达起明显的促进作用，即子宫内膜复杂性增生-不典型增生-癌变过程中的趋势性作用强。本文提示EphA7和AEG-1高表达可以促进肿瘤细胞的繁殖和肿瘤的生长，此时肿瘤细胞异型性明显，失控性增生明显，细胞数量增多，细胞生长加速，肿瘤的体积增大〔14，15〕。本文结果提示AEG-1高表达可以促进肿瘤向肌层浸润，也提示肿瘤处于进展状态(高侵袭性)。本实验提示EphA7和AEG-1二者对细胞由幼稚到成熟过程可能无明确的影响，也不对肿瘤的淋巴管形成及淋巴道播散有影响。EphA7和AEG-1二者具有正向协同作用，二者并无结构上的同源性及互补性，但是二者均对肿瘤细胞的增殖有影响，也对肿瘤血管的新生有影响，因此二者的协同作用可能是与对细胞增殖和血管生成的间接桥梁作用实现的，但是其具体机制有待更多实验证实。也有学者认为EphA7和AEG-1表达的变化能使肿瘤的浸润模式发生改变，使肿瘤生长时细胞极性及构象发生明显异常，细胞的体积小，易于浸润和直接蔓延〔16，17〕。

4 参考文献

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10孟祥瑞，陆 鹏，刘桂举，等.酪氨酸蛋白激酶EphA7蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达〔J〕.肿瘤基础与临床，2014；27(3)：193-6.

11Srivastava J，Siddiq A，Gredler R，etal.Astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) and c-Myc cooperate to promote hepatocarcinogenesis〔J〕.Hepatology，2015；61(3)：915-29.

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13余剑琴，周 清，王汉楚，等.AEG-1在子宫颈癌组织中的表达及与微血管生成的相关性〔J〕.中华全科医学，2016；14(5)：796-8.

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15Yu C，Chen K，Zheng H，etal.Overexpression of astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) is associated with esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) progression and pathogenesis〔J〕.Carcinogenesis，2009；30(5)：894-901.

16刘 志，张 晴，徐 玥，等.受体酪氨酸激酶EphA7在乳腺癌中的表达及其临床意义〔J〕.临床与实验病理学杂志，2016；32(11)：1207-10.

17Rajasekaran D，Srivastava J，Ebeid K，etal.Combination of nanoparticle-delivered siRNA for astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) and all-trans retinoic acid (ATRA)：an effective therapeutic strategy for hepatocellular carcinoma (HCC)〔J〕.Bioconjug Chem，2015；26(8)：1651-2.