乐果与氧乐果在露地芹菜中的残留动态及安全性评价

郭春景，王建忠，李 广，林秋君

（辽宁省农业科学院/农业部农产品质量安全风险评估实验室（沈阳），沈阳110161）

0 引言

蔬菜农药残留问题是菜篮子的隐形杀手，关乎百姓利益、产业发展、国家安全。近年来对辽宁省芹菜农药残留情况的调查发现，氧乐果的检出率和超标率较高，属于高敏农药。其他省份芹菜中也存在氧乐果检出超标情况[1-3]。产生这一问题的最大原因可能是在芹菜生长过程中施用乐果而代谢产生的高毒氧乐果[4-5]。乐果[6]是内吸性有机磷杀虫剂，通过抑制乙酰胆碱酯酶，阻碍神经传导导致害虫死亡，主要用于防治蚜虫[7-10]。根据《食品中农药最大残留限量(GB 2763—2016)》要求，乐果在芹菜上的允许最大残留限量值（MRL值）为0.5 mg/kg，而氧乐果的允许最大残留限量值（MRL值）为0.02 mg/kg。乐果的安全性评估中应充分考虑代谢产物氧乐果的安全风险[11-14]。目前，针对乐果的残留动态研究[15-19]多未涉及代谢物氧乐果。王新全等[20]则对豇豆中乐果及氧乐果进行了研究，但对乐果在芹菜上代谢转化为氧乐果并产生膳食风险的相关研究很少。为明确乐果在芹菜不同生育期施用的风险，笔者进行了田间试验，探讨露地栽培模式下，乐果在芹菜上施用的残留动态和最终残留量，以期为芹菜的质量安全提供有针对性的建议。

1 材料与方法

1.1 试验时间、地点

研究田间试验于2016年7月20日，在沈阳市辽中区浦东镇乌伯牛村山久蔬菜生产基地进行，室内试验于2016年11月在辽宁省农科院农业部农产品质量安全风险评估实验室（沈阳）进行。施药期间没有暴雨冰雹等极端天气，气候条件正常。

1.2 试验材料

试验作物为西芹，购买市售芹菜苗定植。试验农药为40%乐果乳油，河北中天邦正生物科技股份公司。

1.3 仪器和试剂

1.3.1 仪器 Waters UPLC Xezo TQ超高效液相色谱串联质谱仪，美国Waters公司；中佳HC 3514高速离心机，安徽中科中佳科技有限公司；鼎昊源RS-1涡旋混合器，北京鼎昊源科技有限公司；帕恩特超纯水机，北京湘顺源科技有限公司；0.22 μm针头过滤器、50 mL聚丙烯塑料离心管，新康医疗器械有限公司。

1.3.2 试剂 甲醇、乙腈（色谱纯，Merck公司）。

1.3.3 农药标准品 乐果、氧乐果，购自农业部环境质量监督检验测试中心（天津）。

1.4 方法

1.4.1 田间试验设计

（1）试验小区15 m2(3 m×5 m)，隔离区2 m，重复小区3个。

（2）在生长中期（定植期和采收期中间点），分别以乐果最高登记剂量（低浓度）和最高登记剂量的1.5倍剂量（高浓度）施药，考察成熟芹菜产品农药累积情况。

（3）在采收期，分别以乐果最高登记剂量（低浓度）和最高登记剂量的1.5倍剂量（高浓度）施药，分别施药2次和3次，施药间隔期为7天。于最后一次施药后3、5、7天采集芹菜，考察成熟芹菜产品农药累积情况。

（4）在采收期，以乐果最高登记剂量（低浓度）施药1次，施药后2 h、1天、3天、5天、7天、10天、14天、17天、21天分别采集芹菜样品，考察乐果和氧乐果的代谢情况。

（5）对照区：另设对照区30 m2(3 m×10 m)，不施药，采集对照样品。

（6）样品采集。每次取样量2 kg。抽取的样品在8 h内冷藏运回实验室，分别用组织捣碎机粉碎混匀，四分法缩分成500 g，作为待测样品，于-18℃冰箱中保存备用。

1.4.2 样品分析

（1）提取。称取待测样品10.00 g，置于50 mL离心管中。加入20.0 mL乙腈，匀浆2 min。加入QuEChERS净化包，剧烈振荡2 min，10000 r/min离心5 min，取上清液过0.22 μm滤膜，滤液待测。

（2）上机。色谱条件：Acquity UPLC HSS T3柱(100mm×2.1mm，1.8 μm)，柱温25℃，进样量5 μL，流速0.45 mL/min，流动相A为水、B为甲醇。梯度洗脱条件：0～0.25 min，90%～5%A；0.25～5.00 min，5%～90%A。质谱条件：电喷雾离子源正离子模式(ESI+)，离子源温度500℃，毛细管电压1.0 kV，雾化气流量900 L/h，锥孔反吹气流量50 L/h，扫描方式为多反应监测(MRM)模式。

2 结果与分析

2.1 乐果和氧乐果在芹菜上的降解动态分析

芹菜中乐果的消解动态试验，施药剂量为最高登记剂量（低浓度）600 g a.i/hm2，分别在施药后2 h、1天、3天、5天、7天、10天、14天、21天取样。根据消解数据进行拟合（图1），符合一级动力学方程，C=1.1682e-0.274t，相关系数r为0.99，半衰期为2.5天。3天后乐果浓度降解到0.5 mg/kg以下，低于乐果在芹菜上的允许最大残留限量值。

图1 乐果在芹菜中的降解曲线

氧乐果的降解动态方程为C=0.1049e-0.132t，相关系数r为0.96，半衰期为5.25天。21天后氧乐果浓度降解到0.02 mg/kg以下，低于氧乐果在芹菜上的允许最大残留限量值。

图2 氧乐果在芹菜中的降解曲线

2.2 生长中期施药后芹菜中乐果与氧乐果的最终残留分析

生长中期即在芹菜定植到采收时的中间点，时间在移栽定植后40天施药。施药浓度分别为低浓度600 g a.i/hm2和高浓度900 g a.i/hm2。由表1可见，成熟芹菜产品中，乐果和氧乐果残留量均低于最大残留限量MRL值。

表1 生长中期施药后芹菜中乐果与氧乐果的最终残留

2.3 采收期施药后芹菜中乐果与氧乐果的最终残留分析

在采收期分别设置2种施药浓度低浓度600ga.i/hm2和高浓度900 g a.i/hm2。每种施药浓度分别施药2次和3次，每次施药间隔期为7天。在末次施药结束后3、5、7天分别进行采样，检测成熟芹菜产品中乐果和氧乐果的最终残留量。

由表2可以看出，施药2次，喷施2种浓度乐果的残留量在7天时均低于芹菜上的允许最大残留限量值0.5 mg/kg，但氧乐果的浓度7天时仍高于芹菜上的允许最大残留限量值0.02 mg/kg。

由表3可以看出，施药3次，喷施低浓度乐果的残留量在7天时低于芹菜上的允许最大残留限量值0.5 mg/kg，喷施高浓度乐果的残留量超过芹菜上的允许最大残留限量值0.5 mg/kg。氧乐果的浓度在7天时均高于芹菜上的允许最大残留限量值0.02 mg/kg。

3 结论

露地试验芹菜中乐果的动态降解相关系数r为0.99，氧乐果的动态降解相关系数r为0.96，均属高度相关水平，环境条件对试验的影响总体可控。

在芹菜生长中期按最高登记剂量和最高登记剂量的1.5倍喷施乐果1次，采样间隔45天，不会造成成熟芹菜产品中乐果和氧乐果残留量超标，芹菜产品食用安全。

在芹菜采收期按最高登记剂量喷施1次，施药安全间隔期达到21天以上，可以保证芹菜中乐果和氧乐果残留量低于芹菜上允许的最大残留限量值。

在芹菜采收期多次喷施乐果，会造成芹菜中氧乐果残留量超标。乐果在芹菜采收期使用存在较大的质量安全风险。

4 讨论

乐果在芹菜中的半衰期为2.5天，这比卢平等[21]研究报道的3.5天和5.4天略低。出现这种差别可能与试验的地理位置、气候条件和试验时间天气因素有关。

乐果的高毒代谢产物氧乐果属于果蔬上禁止使用农药。乐果的安全风险应该进行重新评价。

乐果在芹菜采收期使用存在较大的质量安全风险，建议加强监管，严格控制乐果在蔬菜上的使用，以其他高效低毒低残留农药替代乐果的使用。

简秋[22]、王丽梅[23]、周艳琳[24]针对露地和温室蔬菜中农药残留进行了研究，发现温室中蔬菜最终农药残留高于露地蔬菜。范素芳[25]在不同生长季节对农药残留规律进行了研究，发现环境因子对农药残留的影响较大。下一步将继续对温室芹菜和露地芹菜进行对比研究。

本试验虽以芹菜为研究对象，但其中的试验设计可以为其他高风险农药残留的作物关键控制点研究提供借鉴。

表2 施药2次芹菜中乐果与氧乐果的最终残留

表3 施药3次芹菜中乐果与氧乐果的最终残留

参考文献

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