液相色谱—质谱联用快速检测果蔬汁中12种氨基甲酸酯类农药残留

李艳芳 黄志波 何健安 胡楚维 钟鸣 徐匆

摘要 [目的]建立一种快速测定65种市售果蔬汁中12种氨基甲酸酯类农药残留的方法。[方法]样品通过安捷伦试剂盒进行提取、净化后，利用液相色谱-质谱联用仪精确定量。[结果]12种农药样液浓度在0.01～0.10 mg/L時，校准曲线相关系数为0.994 2～0.999 9，添加回收率为69.0%～106.0%，相对标准偏差为2.70%～11.14%，检出限为0.001～0.005 mg/kg。[结论]此方法操作简单、省时省力、灵敏度高，适用于不同类别的果蔬汁中氨基甲酸酯类农药的残留测定，从而为果蔬汁的质量安全监测提供依据。

关键词 果蔬汁；液相色谱-质谱联用仪；氨基甲酸酯类；农药残留

中图分类号 TS207.5+3 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）17-0187-04

Abstract [Objective]The research aimed to establish a method for rapid determination of 12 kinds of carbamate pesticides in 65 kinds of fruit and vegetable juices.[Method] The sample used the QuEChERS enhanced Matrix RemovalLipid by liquid chromatographytandem mass spectrometry （LCMS）. [Result]The linear ranges of 12 kinds of pesticide standards were 0.01-0.10 mg/L， with linear correlation coefficients were 0.994 2-0.999 9， the recoveries at different concentrations were between 69.0%-106.0%， and relative standard deviations （RSD） were 2.70%-11.14%. The limits of detections （LOD） were 0.001-0.005 mg/L. [Conclusion]This method is easy to operate， saves time and labor， and has high sensitivity. It is suitable for the determination of carbamate pesticide residues in different types of fruit and vegetable juices， thus providing a basis for quality and safety supervision and testing of fruit and vegetable juices.

Key words Fruit & vegetable juices；LC chromatography；Carbamates；Pesticide residue

随着人们生活水平的逐步提高，居民的饮食习惯越来越追求安全、营养和保健。果蔬汁饮品以其丰富的营养、良好的保健功效而受到青睐。据有关统计，到2018年我国果蔬汁的消费总量有望突破70亿kg。面对巨大的市场需求，果蔬汁的质量安全，包括高毒农药残留、重金属物质残留等问题不可忽视。

氨基甲酸酯类农药是人类针对有机氯和有机磷农药本身的缺点而开发出的一种新型广谱杀虫、杀螨、除草剂，具有高效、残留期短的优点[1]。近年来，氨基甲酸酯类农药在农作物上开始广泛使用，从而导致人畜中毒的情况时常发生[2]。因此，严格监控农产品中氨基甲酸酯类农药的残留、提高农产品质量安全检测技术水平显得尤为重要。

氨基甲酸酯类农药在蔬菜水果的生长管理中，用量较大，因此检测水果蔬菜的加工产品——果蔬汁中的农药残留具有较大意义。近年来，针对氨基甲酸酯类农药残留的检测手段基本集中在气相色谱-质谱联用仪[3-4]、液相色谱仪[5-6]、液相色谱-质谱联用仪[7-8]这三大部分。谭阳阳等[3]采用固相萃取和气相色谱质谱联用技术，建立了同时测定蔬菜和食用菌中6种氨基甲酸酯类农药残留的方法；宋利军等[4]利用QuEChERS提取-气相色谱质谱法测定蔬菜中21种有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类农药残留量。文献资料显示，目前国内针对果蔬汁中多种氨基甲酸酯类农药残留的检测方法报道甚少。笔者采用安捷伦试剂盒对样品进行提取、净化后，利用液相色谱-质谱联用仪精确定量，快速测定了65种市售果蔬汁中12种氨基甲酸酯类农药残留。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 原料。12种氨基甲酸酯类农药标准品，浓度均为1 000 mg/L，购自农业部环境监测中心（天津）。

1.1.2 试剂。安捷伦试剂盒（提取柱5982—5755CH、净化柱5982—5058CH），乙腈（色谱纯，德国Merck公司），PALL 0.2 μm GHP膜针头过滤器。

1.1.3 设备。Agilent1290-SCIEX TripleQiad 4500；VM-3000型旋涡混合器；Sigma3K-15型离心机；往复式振荡摇床（德国IKA，HS501）；Milli-Q Integaral 3 纯水机[默克密理博（上海）有限公司]。

1.2 方法

1.2.1 标准溶液的配制。准确量取12种标准液0.1 mL，用乙腈稀释定容至10 mL，得到浓度为 10 mg/L的标准储备液，后继续稀释为0.005、0.010、0.020、0.050、0.100 mg/L的5种标准溶液，冷藏待用。

1.2.2 样品的预处理。准确称量4 mL待测样品，放置在50 mL离心管，分别向离心管中加入水6.0 mL、乙腈10.0 mL、5 mol NaOH 2.0 mL，置于往复式振荡摇床萃取10 min，后每离心管中加入22颗陶瓷粒、萃取盐（试剂盒自带），再置于旋涡混合器振荡1 min，取出，用4 000 r/min离心2 min，吸取上清液6.0 mL放置于含2颗陶瓷粒的净化柱（试剂盒自带），振荡10 min后，4 000 r/min离心2 min，吸取上清液1.0 mL，利用一次性注射器过0.2 μm膜针头过滤器后，待上机测定。

1.2.3 液相色谱-质谱联用仪测定条件。色谱柱：ZORBAX BONUS-RP C18柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流动相A为甲醇，B为0.1%甲酸水溶液；柱温40 ℃；进样体积1.0 μL；流动相梯度：0 min，10% A～90% B；5 min，75% A～25% B；7 min，100%A～0% B；9 min，100% A～0% B。

质谱条件：ESI离子源，扫描模式：多反映监测（MRM）；CUR（气帘气）35.0 psi；CAD（碰撞气）9.0 psi；离子化电压：正负4 500 V；离子源温度：450.0 ℃；GS1（喷雾气）50 psi；GS2（辅助加热器）50.0 psi。

1.2.4 上机测定。将样品液按照选定的“1.2.3”条件进行测定。

2 结果与分析

2.1 方法适用性

2.1.1 前处理方法的可行性。对阴性样品进行测定后发现，利用提取、净化试剂盒处理后的样品，基质谱图非常干净，十分适合进行目标农药的精确定性、定量。

2.1.2 12种目标农药的总离子图。按照表1的质谱参数对采集的12种目标农药进行定性分析，在“1.2.3”条件下，12种目标农药能完全分离，并且峰型理想，均能进行准确定性和定量，目标农药的总离子图和12种目标农药离子图见图1～2。

2.1.3 分析方法的线性相关性。以色谱峰面积作为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线，得出相应的回归方程，其相关系数在0.994 2～0.999 9（表2），表明12种菊酯类农药在0.01～0.10 mg/L具有良好的线性关系。

2.1.4 方法的准确度和精密度。对阴性样品进行加标回收率和精密度试验，进行了0.048、0.096 mg/L 2个浓度的添加，每个加标水平分别进行6次平行测定，结果表明（表3），12种氨基甲酸酯类农药的平均加标回收率为 69.0%～106.0%，RSD为2.70%～11.14%，可满足农药残留检测试验所需的准确度和精密度的要求。

2.2 市售65种果蔬汁中农药残留检测结果

通过对东莞市市售的65种果蔬汁进行测定分析，结果表明，抽检的果蔬汁样品中均无12种氨基甲酸酯类农药残留检出，说明在果蔬汁中氨基甲酸酯类的农药残留还是有一定的安全保障。

3 结论

该研究随机选取了东莞市市售的65种果蔬汁作为检测样品，着重研究利用试剂盒、液相色谱-质谱联用仪对其中可能含有的12种氨基甲酸酯类农药残留进行定量检测分析，建立了一种快速检测果蔬汁中多种氨基酸类农药残留的检测方法。该方法对试验人员的技能要求不高，且经济易行、简便快捷、科学可靠，十分适合在基层农检单位推广应用。

参考文献

[1] LI F，YUAN Y Q，MENG P，et al.Probabilistic acute risk assessment of cumulative exposure to organophosphorus and carbamate pesticides from dietary vegetables and fruits in Shanghai populations [J].Food Addit Contam：Part A，2017，34（5）：819-831.

[2] 俞辰，谢婧荷.浅谈食品中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法研究进展[J].化工管理，2017（29）：208.

[3] 谭阳阳，牛墨，田红.固相萃取-气相色谱质谱联用法测定蔬菜和食用菌中6 种氨基甲酸酯类农药残留[J].检验检疫学刊，2017，27（6）：10-13.

[4] 宋利军，付倩，刘瑞弘，等.QuEChERS提取-气相色谱质谱法测定蔬菜中的21种有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类农药残留量[J].中国卫生检验杂志，2017，27（15）：2135-2139.

[5] 刘莉，丁叶，孙茜，等.HPLC法测定蔬菜中6种氨基甲酸酯类农药[J].江西化工，2017（3）：107-109.

[6] 周建科，劉瑞英，宋歌，等.液面悬浮单滴微萃取-高效液相色谱法测定果汁中两类农药残留[J].食品工业科技，2009，30（7）：317-319.

[7] 姜成君，殷帅，孟庆玉，等.液相色谱-串联质谱法同时测定中草药保健食品中15种有机磷和氨基甲酸酯类农药残留[J].食品安全质量检测学报，2017，8（7）：2495-2501.

[8] 刘永，唐英斐，宋金凤，等.固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中4 种有机磷农药及其代谢产物[J].色谱，2014，32（2）：139-144.