赵思远 译
墨西哥、智利和哥伦比亚的研究表明,在拉丁美洲,对于猪健康来说,猪繁殖与呼吸障碍综合症仍然是一个巨大的挑战。这项研究于二零一六年六月在都柏林第24届国际猪兽医会议上进行展示。
来自巴塞罗那的西格尔·斯和来自于瑞典的同事在瘦弱的仔猪中发现了一些微小的病变和病毒。断奶后仔猪的浪费是全球养猪业的一个问题。在墨西哥,最能导致这个问题的病毒疾病是2型猪圆环病毒,猪繁殖与呼吸综合征症和蓝眼病(猪红血球病毒PoR病毒),后者仅在墨西哥存在。这些疾病造成了巨大的经济损失,使猪容易发生以细菌为主的混合性感染。
墨西哥巴吉奥地区对因身体状况较差而死去的猪进行了尸检。纳入标准为6~16周龄猪,结果显示其有明显的生长迟缓(身体状况评分1或2)。其中,间质性肺炎25例(68%),卡他性化脓性支气管肺炎7例(7/37),支气管间质性肺炎5例(5/37)。两只猪均有纤维坏死性胸膜肺炎。此外,有14只(占38%)猪的淋巴器官淋巴细胞有不同程度的缺失。16/37(43%)猪圆环病毒2型的聚合酶链式反应呈阳性,18/37(49%)猪繁殖与呼吸综合症病毒检测呈阳性。在7/37(19%)的仔猪中发现猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合症病毒共同感染。最后,未感染三种病毒的动物仅占27%。
研究表明,73%的浪费仔猪与猪繁殖与呼吸障碍综合症和猪圆环病毒2型感染或复合感染有关。需要特别强调的是,38%的猪有肺部病变,而且是细菌感染。可能是潜在的免疫抑制或病毒来源的免疫调节有利于这些感染的发展。
结果表明,猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸障碍综合症经常存在于墨西哥农场的猪群中(单独或共同感染)。研究表明,在造成猪消瘦的原因中,猪轮状病毒(PoR病毒)所起的作用相对较小。
墨西哥东南部的尤卡坦州是墨西哥主要养猪区之一。在这种情况下,新的病毒变异引入阳性农场的风险很大。即使动物感染后不显示疾病的症状。公猪传播猪繁殖与呼吸障碍综合症可能性很大。本研究的目的是确定天然交配用的替代母猪和公猪的健康状况以及献精者的健康状况,以采用不同的控制预防措施。
我们为了采集血液样本,从23个生农场动物身上提取血清。另外,对使用自然交配的25个农场也进行了抽样。这一点非常重要。
——在25个养猪场中,有8个猪场(32%)通过血清学检测,对猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒呈阳性反应。
——128份猪血清中有36份(28.13%)在酶联免疫吸附测定中呈阳性。
——23头自养母猪中有15只(65.22%)对猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒呈阳性反应。
——1414例代金血清中,酶联免疫吸附测定检验呈阳性的为625份(占44.21%)。
——来自四个检疫区的155只动物,无酶联免疫吸附测定阳性结果。
——酶联免疫吸附测定呈阳性的猪(36只)聚合酶链反应检测均为阴性。
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——在635份酶联免疫吸附测定的样本中,6份为阳性,来自于两个农场。
酶联免疫吸附测定结果表明,替代母猪和公猪都曾接触过猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(未确定感染时间)。至于聚合酶链式反应测试,只有两个农场可以确定会感染猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒,而病毒血症发病时间较短,所以血清不是检测病毒的最佳样本。
由此可以得出结论,至少有两个抽样农场存在猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒循环。且猪繁殖与呼吸障碍综合症的患病率较低,建议对聚合酶链式反应扩增产物进行测序,以确定呈阳性农场中存在的病毒株。确定阳性农场中存在的病毒株,这样就可以实施疫苗接种这样的具体控制措施。
尤卡坦自治大学的同一组研究人员进行的第二项研究目的是了解使用不同策略的农场的猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒发生了什么变化。与世界上大多数养猪地区一样,墨西哥的许多农场对猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒呈阳性反应,但在东南部地区,几乎没有这种疾病的临床证据。
第四个农场生产自己的替代母猪,检测血清阳性(SP>0.4)。后两个农场没有任何控制策略。结果显示两份样品呈阴性,两份呈阳性。5个农场的酶联免疫吸附测定结果与其最初状态不一致。四个农场呈阴性:两个农场100%与RT-聚合酶链式反应及两种阳性反应相关。第五个初始状态呈阳性的农场对酶联免疫吸附测定100%呈阴性。初始阳性的农场至少有一个样本对ELISA呈阳性。用聚合酶链式反应技术,3个农场至少有1个样品呈阳性,3个100%呈阴性。初始状态为阴性的农场至少有一个阳性样本。
结果表明,尽管没有与猪繁殖与呼吸障碍综合症一致的临床体征,但两个农场具有不同的状态。经过实验证实,口服液样品是猪育肥监测研究的一种很好的替代方法。聚合酶链式反应结果表明尤卡坦大部分农场的猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒循环较少。
智利大学的M.Neira Ramirez和来自智利和明尼苏达州的同事注意到,猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒 2型于1999年首次在智利被发现,在2013年2月,国家宣布猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒阴性,但在2013年10月再次检测到猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒。他们的研究总结了猪繁殖与呼吸障碍综合症流行病的进展,他们进行了一项系统的发育研究以了解猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒在该国的起源和传播。
第一个病例报告在一个母猪群中,位于猪密度较高的地区。病猪临床疾病严重,生产受到严重影响。在这一事件之后有几次疾病暴发,大多数国家的养猪活动都集中在这一地区。
这些数据来自2014启动的猪繁殖与呼吸障碍综合症国家根除计划。这些数据用来描述疫情,并对2013—2015年间共获得26个序列进行了分析。到2014年底,在全国已知的2368个猪场中,有98猪场个被诊断为猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒感染。其中43处属于养猪场,55处属于商业养猪场。
病毒序列与2012—2013年的北美病毒密切相关,与以前智利猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒的同源性相差很大。
我们的分析表明,智利2013—2015型猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒与2012年5月的病毒有一个共同的祖先,并与2011年4月份的相关序列(印第安纳/XW 079/2013)有一个共同的祖先。
研究结果表明,2013年间影响智利的病毒与以往的猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒不同,这表明有新病毒的引入。此外,智利病毒共同祖先的时间表明,这些病毒可能在智利猪体内进化了至少两个月后才在第一个商业农场被发现。
在1998到2014年间,哥伦比亚国立大学和哥伦比亚农业研究所的J.D.MOGULEN GAL病毒IS和他的同事对不同类型的ORF 5序列进行了系统发育分析。
自1996年以来猪繁殖与呼吸综合症病毒在哥伦比亚得到承认。猪繁殖与呼吸综合症病毒具有高度的遗传变异和一定的抗原异质性。ORF 5,是基因序列的一部分,包含一段可以编码蛋白的碱基序列,不能被终止子打断。RD测序目标和它是了解该领域正在发生的事情的有价值的工具。在哥伦比亚七个养猪业发达的部门,采集了不同受感染猪场的样本。利用534个核苷酸对获得的ORF 5序列进行比较。我们用发表在基因库中的55个菌株和71个参考序列构建了一个树状图,它代表了两个基因型的家族。
所有分析的哥伦比亚分离株都包含在基因型2之内,并且与发现的病毒R 2332原型的5株株系密切相关。哥伦比亚基因型2序列显示ORF 5的核苷酸相似性在91.2%~99.8%之间,与Lelystad株的核苷酸相似性在57%~60%之间。
这55个哥伦比亚分离株也与大约15年前在该国使用的ML病毒 RESP 猪繁殖与呼吸障碍综合症疫苗株有很高的核苷酸同源性。哥伦比亚的一些农场受到第二种猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒的影响,其传播率似乎非常低。在来自同一农场或同一地理区域的一些分离株中,ORF 5抗原表位中检测到了重要的核苷酸变异。
本研究还表明,循环株间存在较低的遗传变异,这可能是由于选择压力较低所致。因此可以得出的结论是,目前流行的野毒株可能是疫苗病毒衍生株。