原发性干燥综合征合并间质性肺炎患者血清白介素-35的水平及临床意义

刘 敏，何 迪，刘 波

(吉林大学中日联谊医院 风湿免疫科，吉林 长春130033)

原发性干燥综合征(pSS)是一种全身炎症性自身免疫病，其主要特点为泪腺及唾液腺等外分泌腺体淋巴细胞浸润，以口干、眼干为主要表现，并可出现肺、肝、肾等器官系统受累。肺间质受累可出现于3%-11%的干燥综合征患者中，并被认为是目前导致干燥综合征患者死亡的最主要原因之一。IL-35是IL-12家族的新型细胞因子，主要起免疫抑制作用，在类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、炎症性肠病(IBD)、肿瘤等的发病机制中起到重要作用，但在pSS中，目前尚没有关于IL-35的报道。本研究旨在探讨pSS伴间质性肺炎(SS-ILD)患者的血清IL-35水平及其与临床指标的相关性，为SS-ILD的发病机制及治疗提供线索。

1 对象及方法

1.1研究对象选取自2014年6月至2017年5月期间于吉林大学中日联谊医院风湿免疫科住院的pSS患者120例(所有患者均为女性)，并符合2002年修订的干燥综合征国际分类标准。排除合并其他自身免疫性疾病、肿瘤、严重肺部感染、肝炎及慢性心肾功能衰竭的患者。根据是否合并间质性肺炎，将患者分为合并间质性肺炎的干燥综合征组(SS-ILD组)和不合并间质性肺炎的干燥综合征组(SS-n-ILD组)。另选取同期年龄匹配的健康体检女性30例作为对照组(HC组)。

1.2相关指标采集记录所有患者的年龄、病程、疾病活动度评分(ESSDAI)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、自身抗体等相关数据。

1.3标本采集用EDTA管收集所有患者及对照组外周血，离心留取上清，置于-80℃冰箱中待使用。

1.4方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中IL-35水平，所有步骤均按试剂盒说明书进行。

1.5统计学方法采用SPSS 20.0(SPSS Inc.,Chicago,IL)软件进行分析，正态分布资料的组间差异采用独立样本t检验或单因素方差分析，进一步比较两组间差异采用最小显著差异法(LSD)；秩和检验用于分析偏态分布资料的组间差异；分类资料的组间差异采用卡方检验。Pearson等级相关检验分析两因素之间的相关关系。P值≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1各组间临床资料比较SS-ILD组平均年龄(60.9±8.1岁)，较SS-n-ILD组平均年龄(50.2±10.8岁)更大，差异有统计学意义(P<0.05)；与SS-n-ILD组相比，SS-ILD组疾病活动度指数更大、血沉更快，而IgM及抗SSA抗体阳性率更低，差异有统计学意义，其余指标两组间无统计学差异(见表1)。

表1 2组间病程、ESSDAI、CRP、免疫球蛋白及自身抗体比较(平均数±标准差)

2.2各组间血清IL-35水平比较各组血清中IL-35水平差异有统计学意义(P<0.05)，其中SS-ILD组血清IL-35水平为46.72±18.09 pg/mL，显著低于SS-n-ILD组(53.77±18.20 pg/mL)和健康对照组(75.72±16.57 pg/mL)。采用LDS法进一步分析两组间差异，结果显示：①SS-ILD组血清IL-35水平显著低于SS-n-ILD组，差异有统计学意义(P<0.05)。②SS-ILD组血清IL-35水平较健康对照组明显降低，差异有统计学意义(P<0.001)。③SS-n-ILD组与HC组相比，两组间IL-35水平有统计学差异(P<0.001)，见表2。

表2 pSS患者与健康对照组血清IL-35水平比较

a与SS-n-ILD组相比，P<0.05;b与健康对照组相比，P<0.001

2.3pSS患者血清IL-35水平与临床指标的相关性分析结果显示，在SS-ILD组，血清IL-35水平与ESSDAI、ESR、IgM呈显著负相关，与IgA呈显著正相关，而与病程、IgG水平无明显相关；在SS-n-ILD组，血清IL-35水平仅与病程及IgA呈显著正相关，而与其他指标无相关性，见表3。

3 讨论

pSS是一种以淋巴细胞高度浸润外分泌腺体为特点的全身炎症性自身免疫性疾病，除唾液腺及泪腺受累外，亦可出现肺、肝、肾等腺体外器官受累。肺是pSS最易受累的腺体外器官，流行病学研究显示，根据检测方法和诊断标准的不同，约8%-75%的pSS患者可出现肺部受累，而合并ILD的pSS患者死亡率可高达42.9%-90%[1-3]。

表3 pSS患者中血清IL-35水平与各相关指标之间的相关性

虽然ILD是pSS患者预后不良的因素之一，其发病机制仍不明确。David等人发现，高C反应蛋白可能参与ILD的发病[4]。本研究中我们发现，合并ILD的pSS患者CRP较不合并ILD的单纯pSS患者明显升高，这与前人研究结果一致，提示CRP可能作为评价SS-ILD疾病活动的指标。另外，研究结果显示，ESSDAI作为判断pSS患者疾病活动性指数，其在SS-ILD组评分较SS-n-ILD组明显升高，提示虽同为器官受累，但pSS患者出现肺部受累时其疾病严重程度更甚。

IL-35是一种主要由EBI3和p35组成的异质二聚体，是IL-12家族的新成员，主要由Treg细胞产生及分泌。与IL-12家族其他成员不同，IL-35主要为抗炎因子，在各种自身免疫性疾病，如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、炎症性肠病等的发病中发挥免疫抑制作用[5,6]。虽然IL-35在其他炎症性疾病及自身免疫性疾病中研究颇多，但目前没有关于血清IL-35在pSS中的作用研究。本研究首次发现，与健康对照组相比，不合并ILD的pSS患者血清IL-35水平明显降低，提示IL-35在pSS的发病中可能起到抑制作用。

有研究表明，作为炎症抑制因子，IL-35可能参与间质性肺疾病的发病过程。Dantas等人[7]通过比较合并肺间质纤维化的系统性硬化病(SSc)患者及不合并肺间质纤维化的单纯SSc患者血清IL-35水平，发现IL-35可能与SSc间质性肺疾病有关。而Yin等人[8]则发现，在特发性炎症性肌病中，是否合并间质性肺炎的血清IL-35水平并无差异。但目前没有发现关于IL-35在合并ILD的pSS发病中的相关作用报道。本研究中，我们首次发现合并ILD的pSS患者血清IL-35水平显著低于不合并ILD的pSS患者及健康对照组，且与疾病活动度指数(ESSDAI)呈显著负相关，提示IL-35在pSS-ILD的发生发展中可能起到抑制作用。伴ILD的SS患者外周血IL-35水平显著降低，可能是疾病活跃状态下，外周血Treg细胞被抑制，导致其分泌IL-35减少。IL-35在ILD中的作用机制可能与其低水平尚不足以对抗炎症进展，导致炎症细胞进一步分泌致炎因子浸润肺脏有关。

本研究在国内外首次通过检测合并ILD的pSS患者血清IL-35水平，揭示了IL-35在肺间质受累中可能发挥重要作用，为明确SS-ILD的发病机制及治疗提供了新的思路。由于本研究样本量有限，且对间质性肺炎的损伤程度与分型及IL-35尚未做进一步分析，在以后的研究中，我们将以更大样本量、更确切的证据明确IL-35在SS-ILD中的作用及意义。

参考文献：

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[7]Dantas AT,Goncalves SMC,Pereira M C,et al.Increased IL-35 serum levels in systemic sclerosis and association with pulmonary interstitial involvement[J].Clinical Rheumatology,2015,34(9):1621.

[8]Yin L,Ge Y,Yang H,et al.The clinical utility of serum IL-35 in patients with polymyositis and dermatomyositis[J].Clinical Rheumatology,Clinical Rheumatology,2016,35(11):2715.