CGF复合自体颗粒脂肪行面部轮廓年轻化治疗的临床应用

赵启明 王昕 陈小平 张伟强 林金德 汪淼

面部老化的形态特征主要是面部软组织的移位和容量缺失。改善面部轮廓老化容貌的方法主要是自体颗粒脂肪移植增加面部软组织的容积量。在补充软组织容量的面部轮廓年轻化治疗中，自体颗粒脂肪移植为首选。但是，自体颗粒脂肪移植存在成活率不肯定、液化吸收后临床效果不可预测，临床应用受到限制。浓缩细胞生长因子（CGF）是通过专用特殊设备将自体外周血经不间断差速离心制备而成的富含多种高浓度生长因子的血液提取物，可促进组织修复和再生。作者将CGF与自体颗粒脂肪复合行面部颗粒脂肪移植，获得良好的面部年轻化效果，现报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 收集2015年1月2017年1月要求行面部年轻化治疗的女性求术者为观察对象。本组共33例，年龄30～52岁。面部轮廓老化部位主要有：前额部皱纹和不规则凹陷；上睑凹陷；眶、颧、颞部皱纹和凹陷；鼻唇沟及前颌沟过深；颊部皱纹和凹陷等面部轮廓缺陷。

1.2 治疗方法 （1）自体脂肪颗粒的制备：通过吸脂的方法获得自体脂肪颗粒，取材部位主要是腹部等明显脂肪堆积的部位，其次为大腿内外侧。在吸脂部位首先注射膨胀液（配比：2% 利多卡因40ml，1%肾上腺素 1ml，0.9% 氯化钠液 1000ml），用 20ml注射器连接面部吸脂针，将吸脂针置于吸脂部位、回拉针栓造成负压，前后抽动吸脂针、按顺序将整个吸脂部位抽吸一遍。获得脂肪进行生理盐水洗涤和低速离心（1000r/min，5min），去除底层水液和上层油脂，保留脂肪颗粒备用。（2）CGF专用设备和制备方法：专用设备：Medifuge离心机（Silfradent，意大利）。CGF制备方法：用9ml Vacuette负压真空采集管（Medifuge离心机特殊匹配试管）抽取患者自身静脉血（9ml/每个部位）立即置入Medifuge离心机。采用不间断差速离心制备技术，离心程序为：加速30s，速度达2700r/min，旋转2min后，降至2400r/min，旋转4min，再加速至2700r/min旋转4min，3300r/min旋转3min，最后减速36s停止。离心13min后，试管中血液分为三层（血液在离心过程中，由于红细胞沉降速度最快，离心后沉人试管底层；CGF、白细胞和血小板沉降速度相似，但慢于红细胞，故沉积在中间的凝胶层；最上层淡黄色为血浆）。中间凝胶状物质为CGF凝胶。取出CGF凝胶后剪碎与颗粒脂肪混合。（3）填充注射：采用多层次、多部位原则注入CGF-自体脂肪颗粒于面部需填充部位。一次注射量2～10ml/部位（最大充填量为颞部，约10ml，最少充填量为鼻唇沟，约2ml）。一般每个部位比预测充填量超充约20%～30%。术后3～6个月根据面部形态决定是否再次进行修饰性充填（双侧不对称者等）。（4）术后处理：术后抗生素防感染5～7d，供区腹带加压包扎，24h后换药，10d拆线。受区术后给以轻柔按摩塑形，专用胶带粘贴固定，1周后拆除。避免不恰当的按摩和外力压迫。

1.3 疗效评价 采用综合评判法（Fuzzy评判法）进行临床评价。评价因素U=皱纹变化、面部轮廓老化改善程度、术后并发症。评价集合V= 有效、改善、无效。各因素在各评价等级上的判定范围：（1）皱纹变化：注射部位细小皱纹消退，深在皱纹明显变浅为有效；注射部位细小皱纹减轻，深在皱纹变浅为改善；注射部位细小皱纹无减轻，深在皱纹未变浅（皱纹同以往一样）为无效。（2）面部轮廓老化改善程度：脂肪充填部位丰满，容貌轮廓改善明显视为有效。脂肪充填部位的老年性生理凹陷充填不足，需再次脂肪充填，容貌轮廓有一定的改观视为改善；脂肪充填部位的老年性生理凹陷部与术前相近，容貌轮廓无改善视为无效。（3）术后并发症：注射后仅有轻微肿胀、一过性轻微疼痛为有效；有瘀血、注脂区红肿、感染、发热、暂时性硬结等可逆性并发症为改善；出现皮肤溃疡及瘘道形成、不规则硬块及皮下结节、色素沉着、动静脉栓塞等不可逆性或严重并发症为无效。

2 结果

所有求术者一次充填后面部脂肪充填区皮肤质地柔软、细小皱纹消失，粗大皱纹变浅。老化的凹陷区充实丰满，面部轮廓曲线柔和，面型外观都得到了明显改善。同时面部功能也未受到任何影响（如面瘫等）。仅有3例有受区轻微瘀血和1例明显肿胀，无1例患者发生受区血肿、感染和脂肪液化。所有患者术后随访3～6个月，有2例又出现治疗区细小皱纹，3例鼻唇沟改善不明显。5例双侧面部凹陷者脂肪充填部位丰满度已达患者要求，但因面部轻微不对称需再次充填以调整面部对称性。2例充填部欠丰满需要二次抽脂注射，补充脂肪注射修复后丰满度达求术者要求。3例局部摸着有不平感外，其余充填区移植脂肪稳定。CGF与自体颗粒脂肪复合行面部脂肪移植，其增容后的面部轮廓呈现出年轻化的效果，令人满意（图1～3）。

图1 术前后正面脸照

图2 术前后左侧脸照

图3 术前后右侧脸照

3个月后采用综合评判法（Fuzzy评判法）进行疗效评价。

汇总临床疗效建立频数分布表（表1）。

表1 33例面部老化求术者疗效评价频数分布（n）

设权数集合A=（0.2、0.4、0.4），A 集合与R 矩阵复合得B 集合，B= A * R=（0.2、0.03、0.06），通过归一化处理得： C=（0.69、0.10、0.21），本组评价有效（0.69）这一隶属度最高。表明应用CGF与自体脂肪颗粒复合行面部轮廓年轻化是有效的。

3 讨论

自体颗粒脂肪在面部轮廓年轻化改型中的应用主要有三个方面：（1）改善面部皮肤皱纹：额部、眉间、鼻唇沟、眶周进行自体颗粒脂肪填充后面部皱纹能明显变浅。（2）面部组织老化萎缩：面部老化可出现面部软组织的萎缩，继而造成面部轮廓的欠丰满。采用脂肪移植补充可重塑饱满柔和的年轻化面部轮廓。（3）面部生理性凹陷的美容矫正：对颞区、鼻背、颊部的生理性凹陷区和轻度的颏过小等面部轮廓缺陷也可用自体脂肪隆颞、隆鼻、隆颊和隆颏，使面部轮廓更漂亮。因此，自体颗粒脂肪移植在面部轮廓年轻化治疗中得到了广泛应用。但是颗粒脂肪移植成活率不稳定，一直是临床应用的棘手问题。

有研究表明细胞生长因子可加速移植脂肪早期的血管重建并抑制脂肪细胞凋亡坏死，从而提高移植脂肪成活率［1］。许多富含血小板和生长因子的血浆浓缩物（PRP、PRF、PC等）都能有效地促进移植脂肪血管化，延缓或抑制移植脂肪细胞的凋亡，提高移植脂肪成活率。临床应用富含生长因子的PRP、PRF与自体脂肪颗粒混合移植，能够提高移植脂肪的存活，明显减少瘀斑和脂肪吸收［2-3］。

CGF本质上与PRF和PRP都是富含多种高浓度生长因子的血液提取物。但CGF比PRP有更多与修复和再生相关的生长因子、血小板、白细胞、干细胞等有效成份和更强的纤维网状结构［4］。Rodella等［5］检测发现CGF内除含有大量的多种细胞生长因子外，还有含有CD34阳性细胞，说明CGF中有外周血干细胞的存在。其能通过加速移植脂肪早期的血管重建和刺激前脂肪细胞的增殖及延缓或抑制移植脂肪细胞的凋亡来提高移植脂肪成活，其机制主要为：（1）细胞生长因子的调节作用：CGF富含大量的血小板，在制备过程中因特殊的变速离心力使得血小板被激活，血小板α颗粒释放出各种生长因子，如表皮细胞生长因子（EGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子（TGF-β）、血小板衍生生长因子（PDGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、白介素1（IL-1）、胰岛素样生长因子（IGF）、骨钙素、骨连接蛋白、纤维蛋白原、纤维连接蛋白。这些细胞生长因子通过与细胞膜上相应的受体相结合，激活下游信号通路，将信号传至核内，促进细胞增殖、基质合成（胶原和透明质酸的产生）和诱导血管再生和脂肪形成。（2）纤维蛋白形成的支架结构：CGF具有稳定的三维纤维蛋白结构，该结构密度高，稳定性强，其中包含了全血中绝大部分的血小板和白细胞，以及两者释放的细胞生长因子等活性成分。CGF中的血小板像粘结剂一样浸入到纤维蛋白网内，但浸入其中的白细胞具有活性并且在密集的纤维蛋白网状结构中产生作用。此外，CGF中包含大量白细胞，在降解过程中持续释放免疫调节相关的细胞因子，减轻了局部不良的免疫反应，增强了抗感染的能力。纤维蛋白形成的支架结构为细胞提供了增殖分化的场所，从而促进软硬组织的修复和再生。另外，CGF并不像其他富血小板血浆凝胶一样在制成后快速溶解，其结构溶解缓慢，类似于生理性血块的溶解过程，能够缓慢持续地释放修复与再生的关键因子。（3）干细胞：Rodella等检测发现CGF内除含有大量的多种细胞生长因子外，CGF还含有CD34阳性细胞，意味CGF中有外周血干细胞的存在，也能促进前脂肪细胞向脂肪细胞转换。

CGF与自体脂肪混合移植补充面部的容量损失，可获得面部年轻化治疗的效果，其临床应用优势为：（1）面部年轻化效果佳：面部老化造成的皱纹和软组织萎缩与皮肤胶原蛋白流失、弹力纤维断裂、各层软组织萎缩有关。CGF与脂肪颗粒复合行面部充填移植，由于自体颗粒脂肪移植无排斥反应，吸收较少，且质地柔软，存活后长期存在，可获得更佳饱满、与周围组织协调的面部美感。本组求术者一次治疗就基本满意。除了个别因双侧脂肪移植部位有轻度不对称需再次充填脂肪外，极少出现因脂肪吸收需要二次脂肪再注射的（本组仅有2例）。（2）移植脂肪稳定：CGF不易降解，作用更稳定和持久，一旦聚合形成其硬度如人类完整皮肤一般，其支架结构能够抵抗生理压力，留存更长久。（3）抗炎作用：CGF的纤维蛋白聚合形成的网状结构内有大量白细胞、免疫细胞和免疫调节因子如白细胞介素（IL-1β，IL-6，IL-4），肿瘤坏死因子（TNF-α）等存在，使得CGF具有一定的免疫防御与局部抗炎功效，能减轻创伤后的炎症反应，促进组织修复。不易感染。（4）引导循环血中干细胞的迁移、增殖和分化：纤维蛋白网状结构是CGF的基质支架，有趋化作用，可募集血循环中的干细胞、支持细胞迁移、促进细胞粘附。在CGF内有大量CD34阳性细胞，表明其基质内有外周血造血干细胞存在，可促进组织再生和分化。（5）止血：血小板具有凝血和止血的重要功能，其参与了生理性止血的全过程。当血管壁受损时，其能迅速在血管受损部位形成止血栓，血管随即发生变形，表面粘度增大，凝聚成团。一般通过粘附、释放、聚集、收缩、吸附等步骤来完成其止血的生理功能。

［1］ Sclafani AP,Azzi J．Platelet Preparations for Use in Facial Rejuvenation and Wound Healing: A Critical Review of Current Literature． Aesthetic Plast Surg,2015,39(4):495-505．

［2］ Sclafani AP, McCormick SA． Induction of dermal collagenosis,angiogenesis, and adipogenesis in human skin by injection of plateletrich fibrin matrix． Arch Facial Plast Surg, 2012, 14(2):132-136．

［3］ Sclafani AP．Platelet-rich fibrin matrix for improvement of deep nasolabial folds． J Cosmet Dermatol,2010,9(1):66-71．

［4］ Qiao J,An N,Ouyang X．Quantification of growth factors in different platelet concentrates．Platelets,2017,21:1-5．

［5］ Rodella LF,Favero G,Boninsegna R,et al Growth factors,CD34 positive cells,and fibrin network analysis in concentrated growth factors fraction．Microsc Res Tech,2011,74(8):772-777．