多发性骨髓瘤患者血清HMGB1水平变化及其与β2-MG、LDH的关系

刘艳娟，吴玉辉，郭贺贺，刘奕晨，孙志强

(1贵州医科大学，贵阳550000；2南方医科大学深圳医院)

多发性骨髓瘤(MM)是一种发生于B淋巴细胞的恶性浆细胞疾病，是血液肿瘤中最常见的恶性肿瘤之一，其发病率在恶性血液疾病中约占13%[1]。目前，MM的发病机制尚未清楚，既往研究认为电离辐射、病毒感染、基因遗传都有可能引发该病。近年研究报道，MM的发生可能与慢性炎症[2,3]有关。高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种重要的炎症细胞因子，在多种恶性肿瘤呈高表达状态。目前，国内关于HMGB1在MM发病中的作用研究相对较少。本研究通过检测MM患者血清HMGB1水平，分析其与反映MM疾病进展和肿瘤负荷的β2微球蛋白(β2-MG)、乳酸脱氢酶(LDH)的相关性，了解HMGB1与MM发生发展的关系，旨在为MM的诊断和治疗提供新的靶点。

1　资料与方法

1.1　临床资料

选择2015年10月～2017年1月我院收治的MM患者65例(观察组)，男51例、女14例，年龄45～88岁、平均53.1岁。均符合《中国多发性骨髓瘤诊治指南》2015年修订的诊断标准。对33例患者采取BDT方案(硼替佐米+地塞米松+来那度胺)化疗，根据中国医师协会血液分会多发性骨髓瘤工作组制定的疗效标准，将33例患者分为完全缓解20例、缓解后复发13例。其余32例为初诊未治患者，依据MM DS分期系统，Ⅰ期10例、Ⅱ期6例、Ⅲ期16例。排除严重肝功能异常、动脉粥样硬化等慢性炎症疾病患者，化疗前或化疗过程中出现感染者。另选择性别、年龄匹配的健康体检者65例(对照组)，男51例、女14例，年龄40～76岁、平均50.2岁。本研究通过医院医学伦理委员会批准，所有受试者均签署知情同意书。

1.2　血清HMGB1检测

采集受试者清晨空腹外周静脉血5 mL，置于促凝管中，室温放置2 h后离心，吸上清液，-80 ℃保存。采用ELISA法检测血清HMGB1水平，严格按照ELISA试剂盒操作说明书进行。

1.3　血清β2-MG、LDH检测

采集患者清晨空腹外周静脉血5 mL，离心取血清，采用ELISA法检测β2-MG、LDH水平，按照ELISA试剂盒操作说明书进行。

1.4　统计学方法

2　结果

2.1　两组血清HMGB1水平比较

观察组和对照组的血清HMGB1水平分别为(339.582±225.018)、(50.437±45.935)pg/mL，观察组高于对照组(P<0.01)。

2.2　不同预后MM患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平比较

初诊未治者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平均高于完全缓解者(P均<0.01)。缓解后复发者血清HMGB1、β2-MG水平高于未治者，LDH低于未治者，但差异无统计学意义(P均>0.05)。缓解后复发者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平均高于完全缓解者(P均<0.01)。见表1。

表1　　　　不同预后MM患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平比较

注：与完全缓解比较，*P<0.01；与缓解后复发比较，△P<0.01。

2.3　初诊未治不同分期患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平比较

Ⅱ期患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平高于Ⅰ期，Ⅲ期患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平高于Ⅱ期(P均<0.01)。见表2。

表2　　　　初诊未治不同分期患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平比较

注：与Ⅱ期比较，*P<0.01。

2.4　MM患者血清HMGB1水平与β2-MG、LDH水平的相关性

Pearson相关性分析显示，MM患者血清HMGB1水平与β2-MG、LDH水平均呈正相关(r=0.949，P=0.002；r=0.879，P=0.003)。

3　讨论

MM的发病原因和发病机制目前尚不明确。人类HMGB1基因位于13q12染色体上，包括5个外显子和4个内含子[4]。从结构上来说，HMGB1分为3个功能区，即HMGB1 A盒、HMGB1 B盒和酸性C末端[5]。A盒和B盒的主要作用是与DNA非特异性结合，B盒是引起炎症反应的功能结构区，酸性C末端主要参与调节HMGB1与DNA结合的亲和力。正常情况下，HMGB1主要存在于内质网和高尔基体中，与DNA相结合，维持核小体结构的稳定并参与基因的重组、复制等，释放至细胞外的HMGB1可通过多种途径介导机体的炎症反应、免疫反应、组织再生及肿瘤细胞转移等。

研究显示，HMGB1在白血病中呈高表达状态。付娟等[6]检测了40例初诊未治白血病患者(白血病组)、50例良性血液病患者(良性血液病组)及50例健康志愿者(对照组)血浆HMGB1水平，发现白血病组化疗前HMGB1水平高于化疗后及良性血液病组、对照组。Jia等[7]比较36例慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者(未治22例、经治14例)和14例年龄相仿的健康对照组血浆HMGB1水平,发现未治疗过的和复发患者同健康对照组相比较，其血浆HMGB1水平明显增高。Yang等[8]发现，HMGB1在各种白血病中过度表达。本研究结果显示，MM患者血清HMGB1水平高于健康对照者，且随着MM分期升高，HMGB1水平升高。提示血清HMGB1水平与MM病情有关，可能是MM发生发展的一个影响因素。

HMGB1参与恶性肿瘤发生发展的通路主要有以下3种[9，10]：①JAK/STAT信号通路：JAK/STAT信号通路在肿瘤疾病的进展过程中起重要作用。STAT在多种恶性肿瘤中的表达水平较正常组织中明显升高。此外，有试验证实激活JAK/STAT途径可活化STAT，进而促进肿瘤细胞的增殖、转移等。而HMGB1可能影响STAT信号通路，与肿瘤的发生存在一定的关系。②RAGE通路：RAGE作为HMGB1的主要受体，与HMGB1具有高度亲和力。有报道指出，HMGB1和RAGE在肿瘤的侵袭过程中起协同作用。释放到细胞外的HMGB1可以结合细胞表面的RAGE，上调RAGE，最终促进肿瘤的细胞的生长和转移。③Toll样受体(TLR)：除RAGE外，TLR2和TLR4亦可作为HMGB1的受体，并能与其相互作用诱导细胞活化，与肿瘤的发生发展密切相关。另有研究报道，HMGB1可增加化疗耐药性，在治疗上使用HMGB1中和抗体可增加恶性血液病对化疗药物的敏感性[11]。

β2-MG是相对分子质量较低的蛋白，生理代谢过程活跃的肿瘤细胞可分泌大量β2-MG[12]。MM患者血清β2-MG表达水平明显增高的作用机制主要为[13]：①骨髓瘤细胞可大量分泌和合成β2-MG；②骨髓瘤细胞坏死后可大量释放β2-MG；③骨髓瘤细胞引起肾功能损害，使肾小球滤过率下降，血清β2-MG表达水平明显升高。血清β2-MG升高常常提示疾病进展。LDH是机体糖酵解过程中重要的代谢酶，当患有肿瘤时，LDH可自细胞内大量释放至血液中[13]。对于MM患者，血清LDH表达水平可明显升高，与MM预后密切相关,对MM的临床诊断、治疗效果和预后评估具有重要意义[14]。本研究结果显示，Ⅱ期患者外周血中β2-MG和LDH较Ⅰ期升高，Ⅲ期患者较Ⅱ期升高，且HMGB1水平与β2-MG、LDH水平均呈正相关。说明HMGB1在一定程度上可以反映疾病的严重程度及预后。

综上所述，MM患者血清HMGB1升高可能影响MM的发生发展，还可反映疾病的严重程度。

参考文献：

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