ICP-MS法测定六味颈康胶囊中的5种重金属元素含量△

范桂强，马国荣，崔婧，庞红霞，张李莉，蒋晓蕊，靳雅楠

(1.河北省衡水市食品药品检验检测中心，河北　衡水　053000；2.河北省衡水市食品和市场监督管理局稽查局，河北　衡水　053000)

六味颈康胶囊为河北省深州市医院制剂(冀药制字Z20051536)，由白芍、甘草、醋乳香、醋没药、续断和粉葛六味中药制成，该药具有活血、通络、止痛之功能，适用于气血瘀滞、经络痹阻引起的头疼头晕、颈项强直、脊背酸痛、四肢麻木，以及颈、腰椎等病症的治疗，该制剂经多年临床应用，疗效确切[1]。近年来，环境污染日趋严重，造成我国中药材存在不同程度的重金属污染[2]。相伴而来，中成药不良反应的报道日益增加，也使中药材重金属的残留受到了人们越来越多的关注。因此，笔者参考相关资料，以2015年版《中华人民共和国药典》的相关重金属标准为依据，建立六味颈康胶囊中重金属元素测定的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法，样品经微波消解后不需分离，可直接测定样品中5种重金属元素铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)。结果表明，建立的方法简便易行，结果准确可靠，专属性强，能很好地控制该制剂的重金属残留。

1　仪器与试药

1.1 仪器

Thermo iCAP Q ICP-MS仪(美国Thermo Fisher科技公司)；MARS XPRESS微波消解仪(美国CEM公司)；XS205 DU电子分析天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司]。

1.2 标准物质与试剂

单元素标准溶液铅(Pb))(GBW08619，批号：16064)、镉(Cd)(GBW08612，批号：16052)、砷(As)(GBW080117，批号：16048)、汞(Hg)(GBW08617，批号：16056)、铜(Cu)(GBW08615，批号：16033)均购自国家标准物质研究中心，质量浓度均为1000 μg·mL-1。

调谐液为10 μg·L-1的锂(Li)、钇(Y)、铈(Ce)、钴(Co)、铟(In)、铀(In)混合标准溶液；内标溶液为10 ng·mL-1的铋(Bi)、铟(In)、锗(Ge)用5%硝酸稀释后的溶液。硝酸(GR)(MERCH公司)；30%过氧化氢(AR)(国药集团)；水为本实验室自制超纯水；本实验中其他所用试药均为分析纯；六味颈康胶囊(河北省深州市医院，批号分别为141226、150713、151102，规格：0.4 g)。

2　方法与结果

2.1 ICP-MS仪器工作条件

RF功率为1200 W；载气为高纯氩气；流速为1.04 L·min-1；采样深度为5 mm；雾化室温度为2.7 ℃；Ni采样锥、截取锥；使用碰撞池技术(KED)。

2.2 微波消解条件

见表1[3]。

表1　样品微波消解优化程序

2.3 溶液的制备

2.3.1 标准系列溶液

2.3.1.1 标准储备液分别精密量取Pb、Cd、As、Hg、Cu单元素标准溶液适量，用5%硝酸溶液逐级稀释制成每1 mL分别含Pb、Cd、As、Hg、Cu为1、1、1、0.1、1 μg的溶液。

2.3.1.2 混合标准使用液精密量取2.3.1.1项下Pb、Cd、As、Cu标准储备液适量，用5%硝酸逐级稀释制成Pb、Cd、As、Cu混合标准系列溶液；精密量取Hg单元素标准储备液适量，用5%硝酸逐级稀释制成Hg标准系列溶液，级别及浓度见表2。

表2　混合标准系列溶液浓度　ng·mL-1

2.3.1.3 混合标准储备液分别精密量取Pb、Cd、As、Hg、Cu单元素标准溶液适量，用5%硝酸溶液逐级稀释制成每1 mL分别含Pb、Cd、As、Hg、Cu为1、0.5、2.5、0.2、3 mg的混合溶液。

2.3.2 供试品溶液的制备取六味颈康胶囊20粒精密称定，研细，取0.4 g，置微波消解罐中，加硝酸6 mL，30%过氧化氢2 mL，盖好，置微波消解仪中，按2.2项下消解程序消解，完成后将消解罐置于电热板上，100 ℃将酸蒸发至2 mL，将消解后的溶液用水转移至50 mL聚四氟乙烯材料的容量瓶中，用水反复冲洗消解罐并将洗液并入容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。同时制备空白试剂。

2.4 含量测定方法

测定选取同位素为208Pb、114Cd、75As、63Cu、202Hg，其中208Pb和202Hg以209Bi作为内标，114Cd以115In作为内标，75As和63Cu以72Ge作为内标。采用在线内标法用蠕动泵与样品混合后进入ICP-MS仪，然后按ICP-MS仪测定工作条件进行测定[4-5]。

2.5 线性关系考察和检测限

仪器的内标管进样管在仪器分析过程中始终插入内标溶液，依次将仪器样品管插入各个浓度的对照品溶液中进行测定，以3次测量值的平均值为纵坐标(Y)，以质量浓度(X，ng·mL-1)为横坐标进行线性回归。取2.3.2项下空白溶液，连续测定11次，测定空白溶液中Pb、Cd、As、Hg、Cu的标准偏差，以测定标准偏差的3倍为被测定元素的检出限，结果见表3。

表3　线性范围和检测限

2.6 精密度试验

取标准曲线范围内同一浓度的混合标准溶液和汞标准溶液，重复测定7次，记录测量值，结果Pb、Cd、As、Hg、Cu测量值的RSD分别为1.12%、0.65%、1.37%、0.84%、1.52%(n=7)，表明仪器精密度良好。

2.7 重复性试验

取同一批六味颈康胶囊(批号：150713)约0.4 g，按2.3.2下方法制备供试品溶液，平行试验8份。结果Pb、Cd、As、Hg、Cu 5种元素的RSD分别为0.76%、1.03%、0.82%、0.90%、1.16%(n=8)，表明本方法重复性良好。

2.8 稳定性试验

取已知含量的供试品溶液(批号：150713)适量，分别放置0、2、4、8、16、24 h测定，结果Pb、Cd、As、Hg、Cu 5种元素的RSD分别为1.15%、0.88%、0.96%、1.24%、1.30%，表明5种元素在24 h内稳定性良好。

2.9 加样回收率试验

取已知含量的供试品(批号：150713，平均装量：0.4018 g)内容物共9份，每份约0.2 g，精密称定，置消解罐中，分低、中、高3水平，每水平各3份，分别加入2.3.1.3项下的混合标准储备液80、100、120 μL，按2.3.2项下供试品溶液制备步骤消解处理，按2.4项下测定条件进行测定，计算加样回收率及RSD，结果见表4。

2.10 样品含量测定结果

取3批本品，每批次称取3份，按2.3.2项下供试品溶液制备步骤消解处理，按2.4项下测定条件进行测定，结果见表5。

表4　回收率结果表(n=9)

表4(续)(n=9)

表5　样品中Pb、Cd、As、Hg、Cu的含量(n=3)　μg·ng-1

3　讨论

有研究表明，重金属元素半衰期长、不易分解，易在人体内蓄积，当蓄积到一定含量时，可导致各种疾病发生[6]。中药材中重金属超标是阻碍我国中药出口和走向国际市场的主要制约因素之一，目前各国都对中药材中的重金属含量提出了严格要求，制定了一系列的质量标准。我国2015年版《中华人民共和国药典》中并未对中成药中重金属残留限量作出规定，由于我国中成药使用量很大，为提高药物安全，制定出重金属残留限量势在必行。

《中华人民共和国药典》2015年中，仅对六味颈康胶囊处方中的甘草[7]和白芍[7]重金属含量做出了规定：Pb不得超过百万分之五、Cd不得超过千万分之三、As不得超过百万分之二、Hg不得超过千万分之二、Cu不得超过百万分之二十。结合六味颈康胶囊生产工艺配方(1000制剂单位处方量：白芍360 g，甘草108 g)，该制剂中上述5种重金属元素含量均未超标。

本研究所采用的样品前处理方法是国内外公认的微波消解法，该方法处理样品迅速，操作较为简便，样品消解更加均匀，实验安全性更高，并且可以灵活地设置消解升温程序，是较为理想的样品处理方法。实验中微波消解时试剂主要选择硝酸、高氯酸、盐酸进行消解，选择硝酸是因为其对仪器的损害较小，较其他两种试剂产生多原子离子的干扰较少。在考察硝酸用量时，以对样品消解完全的程度为指标，考察了6、9 mL硝酸，发现6 mL硝酸即可消解完全，所以在进行样品消解时选择硝酸用量为6 mL。在进行工作模式选择时，对标准工作模式与KED模式进行了比较，结果KED模式较标准模式的回收率要高，所以在实验中选择KED模式为工作模式。

本实验采用ICP-MS法测定六味颈康胶囊中五种重金属元素，操作简便、灵敏度及准确度高，可适用于六味颈康胶囊中重金属元素的测定，控制产品质量。

[1]郝江涛，孙丽红.六味颈康胶囊治疗神经根型颈椎病的疗效观察[J].国际中医中药杂志，2013，35(11)：1016-1016.

[2]先惠，王爱平.中药材中重金属污染现状以及防治措施[J].微量元素与健康研究，2013，30(4)：24-25.

[3]宋更申，周丽，刘浦，等.微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定蛇床子中16种稀土元素[J].药物分析杂志，2016，36(12)：2148-2152.

[4]施晓光，赵庄，路敏仪，等.微波消解ICP-MS法测定黄芪注射液5种重金属元素含量[J].中国药师，2013，16(4)：494-496.

[5]何平，孙巍，孙玉侠，等.微波消解-ICP-MS法测定丹参和三七药材中18种重金属元素[J].中成药，2011，33(12)：2110-2113.

[6]卢进，申明亮.中药材重金属含量与控制[J].中国中医药信息杂志，1995，2(10)：10-12.

[7]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2015.