雷公藤多苷联合泼尼松对SLE患者CD4+CD25+T细胞的影响及其疗效

李广科，李 娟，袁 耀，赵亚伟，王 格

(河南省漯河市中心医院/漯河医学高等专科学校第一附属医院风湿免疫科 462000)

系统性红斑狼疮(SLE)是临床较为典型的一种自身免疫介导弥漫性结缔组织疾病[1]，其临床发病机制尚未完全明确。有研究表明，SLE的临床特征主要表现为免疫耐受异常、多个系统器官受累、出现自身抗体[2]。据有关资料统计，近年来SLE的病死率已明显降低，20年的存活率为60%以上，5年的存活率为90%以上[3]，虽然其存活率有所提高，但是与健康人群相比，病死率也高出3倍[4]。有研究证明，SLE患者，外周血CD4+CD25+T细胞明显低于健康人。CD4+CD25+T细胞的数量和功能异常，与SLE的发生、发展相关。CD4+CD25+T细胞常表现出自身免疫是否正常，在正常情况下能保持平衡，维持机体免疫稳定，一旦失衡容易引发自身免疫疾病发生[5]。大量临床研究发现，感染、肾衰竭是导致SLE患者死亡的主要原因。临床治疗SLE主要使用的药物有免疫抑制剂和糖皮质激素，糖皮质激素中的泼尼松较为常用。有研究报道称，雷公藤多苷治疗狼疮性肾炎的效果显著，患者的耐受性较好。本研究主要采用雷公藤多苷联合泼尼松和单独使用泼尼松治疗SLE患者，观察两组不同用药方案治疗后患者对CD4+CD25+T细胞影响及疗效，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2014年12月至2016年10月本院接诊的100例SLE患者进行研究，入选的患者采用随机数字表法，均分为两组，观察组(50例)和对照组(50例)。对照组单独使用泼尼松进行治疗，观察组在对照组的基础上增加使用雷公藤多苷进行治疗。观察组男15例，女35例；年龄22～58岁，平均(34.2±6.8)岁；平均病程(5.8±2.5)年。对照组男18例，女32例；年龄22～63岁，平均(36.4±6.1)岁；平均病程(5.9±2.3)年。本研究取得本院伦理委员的批准，所有参与研究的患者均签署知情同意书。纳入标准：符合临床SLE的诊断标准；排除标准：患有严重的心、肾、脑血管系统疾病者；处于哺乳期、妊娠期的女性；并发严重的感染者；不能接受整个研究用药疗程者；有相关药物过敏史的患者等。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2仪器与试剂 检测使用的试剂：藻红素标记鼠抗人CD4(美国BD公司)；异硫氰酸荧光素标记鼠抗人CD25(美国BD公司)。检测使用的仪器：流式细胞仪来自Beckman Coulter公司的Epics XL-MCL型流式细胞分析仪，操作过程均严格按说明书进行，根据WXPO32软件分析其检测的结果。

1.3方法 对照组患者给予泼尼松片(浙江仙琚制药股份有限公司，国药准字H33021207)进行治疗，泼尼松的初始剂量为0.5 mg/(kg·d)，在连续服用1个月后，逐渐减少药物的用量，并维持在每天10.0 mg。观察组患者在对照组的基础上，增加使用雷公藤多苷片(远大医药黄石飞云制药有限公司，国药准字Z42021212)，雷公藤多苷每次20.0 mg，每天3次，采用口服。观察组泼尼松的用法与用量均与对照组相同。两组患者的治疗时间均为6个月，在治疗的过程中，记录并观察患者药物治疗后出现的不良反应情况。

CD4+CD25+T细胞检测：两组患者在治疗的前后采集5 mL的静脉血，采用离心法分离外周血单个核细胞，在血标本中分别加入20 μL的藻红素，标记鼠抗人CD4，20 μL异硫氰酸荧光素，标记鼠抗人CD25，并且设立同型管用于对比。将其混合后在阴凉处放置15 min，加入3 mL的红细胞裂解液，在37 ℃的温室放置15 min，离心弃去上清液，并用磷酸盐缓冲液洗涤3次，记录所有患者治疗前后的CD4+CD25+T细胞变化。CD4+CD25+T细胞均按照百分率表示。

1.4观察指标 两组患者CD4+CD25+T细胞治疗前后的变化情况比较；两组患者SLE活动指数(SLE-DAI)评分的变化情况比较；两组患者的疗效比较；两组患者治疗后的不良反应比较。

1.5疗效评定标准 完全缓解：患者临床症状与体征消失；部分缓解：临床症状与体征减轻；无效：临床症状与体征无明显的好转。总有效率=完全缓解率+部分缓解率。

2 结 果

2.1两组患者CD4+CD25+T细胞治疗前后变化情况比较 治疗前两组患者的CD4+CD25+T细胞水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后两组患者CD4+CD25+T细胞水平显著上升(P<0.05)，并且观察组患者的CD4+CD25+T细胞水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组患者CD4+CD25+T细胞治疗前后变化情况比较

2.2两组患者SLE-DAI评分的变化情况比较 两组患者治疗前的SLE-DAI评分比较，差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，两组患者的SLE-DAI评分明显降低(P<0.05)，并且观察组患者的SLE-DAI评分显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组患者SLE-DAI评分的变化情况比较分)

2.3两组患者的疗效比较 观察组患者治疗后的总有效率为92%，对照组患者治疗后的总有效率为74%，观察组的疗效明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 两组患者的疗效对比[n(%)]

2.4两组患者治疗后的药物不良反应比较 两组患者治疗后在肝功能异常、恶心呕吐、肺炎、上呼吸道感染、白细胞计数下降等方面比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组患者治疗后女性出现月经紊乱9例，对照组出现2例，观察组发生率明显高于对照组，差异有统计学意义(χ2=5.005 1，P<0.05)。见表4。

表4 两组患者治疗后药物不良反应比较[n(%)]

3 讨 论

临床研究发现，SLE的发病机制复制，是由多种原因所导致[5]，处于活动期的SLE患者，其T细胞数量、功能都会下降。研究认为，T细胞和B细胞异常活化、CD4+辅助T细胞异常分泌细胞因子、B细胞异常活化分化为浆细胞，是自身抗原失去耐受的主要机制[6-7]。其中，T细胞亚群CD4+CD25+T细胞具有维持自身免疫耐受、调节免疫应答的功能，CD4+CD25+T细胞数量和功能下降，会容易出现自身免疫性疾病[6]。CD4+CD25+T细胞具有免疫抑制功能[7]。CD4+CD25+T细胞以主动方式来维持免疫耐受，SLE的发展、发生与其数量、功能异常密切相关[8]，CD4+CD25+T细胞等多种免疫细胞功能异常，会导致自身产生抗体，由此形成的免疫循环复合物，也会在患者的各个脏器沉积[9]。

雷公藤多苷和其他雷公藤制剂相比，其不良反应较少，药物用量小。它对体液免疫、细胞免疫具有抑制作用，具有抑制肾脏系膜细胞、基质增生，抗炎和调节免疫的效果[10-11]，临床常用于SLE治疗。研究表明，雷公藤多苷属于中药提取物，它是从雷公藤植物的根部提取的总苷[12]，环氧二萜内酯类化合物是其主要的成分。雷公藤多苷能抑制T细胞的增殖反应，其治疗SLE的机制较为复杂，但都与糖皮质激素代谢间接或直接相关，能增加皮质醇分泌，刺激垂体肾上腺轴[13]。有学者认为，治疗SLE可采用雷公藤多苷联合糖皮质激素，但其对肝脏造成的损伤不容忽视，且药物的不良反应与用药剂量呈正比，用药剂量越大，不良反应越大，剂量越小，不良反应越小[14-15]。大量的临床研究证明，雷公藤多苷联合糖皮质激素治疗SLE都具有较好的疗效，其起效快、安全性较高，并且不良反应发生率低[16-18]。

本研究结果表明，所有患者在治疗后的CD4+CD25+T细胞水平均有明显上升，并且雷公藤多苷联合泼尼松治疗的患者CD4+CD25+T细胞水平明显高于仅采用泼尼松治疗的对照组；所有患者治疗后SLE-DAI评分明显降低，并且联合泼尼松治疗的患者SLE-DAI评分显著高于单独使用泼尼松者；雷公藤多苷联合泼尼松治疗总有效率为92%，高于单独使用泼尼松治疗总有效率(74%)；两组患者治疗后都出现有不良反应，其中雷公藤多苷联合泼尼松治疗的女性患者月经紊乱的发生率高于仅采用泼尼松治疗的女性患者，说明雷公藤多苷对患者的月经周期有一定的影响。以上研究结果均与以往的报道相符。

综上所述，雷公藤多苷联合泼尼松治疗SLE，能够提高CD4+CD25+T细胞水平，可保护、恢复SLE造成的器官损伤，治疗后出现少数不良反应，并且对月经周期有一定的影响，但均在可控范围内，值得临床推广应用。

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