多发性骨髓瘤患者血清IL-6、IL-6R、MCL1的检测分析及与预后的关系

朱 婕,张 磊,张葆康,牛爱荣

(山东省青岛市中心医院检验科 266042)

多发性骨髓瘤(MM)是一种浆细胞恶性增殖的血液系统肿瘤，其临床表现主要为骨质破坏[1]。MM随人口老龄化其发病率递增，严重影响人类健康。白细胞介素-6(IL-6)是骨髓瘤细胞增殖的关键因子，可抑制细胞凋亡[2]。白细胞介素-6受体(IL-6R)存在于骨髓瘤细胞表面，可增加骨髓瘤细胞对IL-6R的敏感度[3]。髓样细胞白血病蛋白1(MCL1)是骨髓瘤细胞重要的生长因子，可调节信号转导，参与骨髓瘤细胞的增殖[4]。骨代谢标志物N-端骨钙素(N-MID)、Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(PINP)、Ⅰ型胶原蛋白羧基端β降解产物(β-CTX)可用于评价MM患者骨损伤程度及预后[5]。本研究通过电化学发光免疫分析法(ECILA)检测MM患者血清中IL-6、IL-6R、MCL1、β-CTX、PINP、N-MID的表达水平，分析IL-6、IL-6R、MCL1水平与骨损伤的相关性，并探讨IL-6、IL-6R、MCL1与MM预后的关系。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院2010年4月至2015年4月收治的120例MM患者纳入MM组。所有患者经骨X线片、骨髓象、血免疫球蛋白等临床指标检查确诊，均符合《血液病诊断及疗效标准》(第3版)中的诊断标准。依据Durie-Salmon分期法将MM组患者按临床分期分为3个亚组，即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期组，Ⅰ期组年龄42～73岁，平均(53.73±4.51)岁；Ⅱ期组年龄40～74岁，平均(54.62±4.78)岁；Ⅲ期组年龄41～75岁，平均(52.89±3.65)岁。选择本院同期健康体检者为对照组，年龄43～72岁，平均(53.67±3.94)岁。各组均为40例。

1.2方法 各组均在空腹(禁食≥12 h)状态下采集肘前静脉血5 mL，注入真空采血管中，室温静置60 min，将低温离心机温度调至4 ℃，预冷后离心15 min，转速为3 000 r/min，分离上清液置于-80 ℃冰箱保存。待标本收集完毕后，利用ECLIA，通过全自动电化学发光免疫分析仪(型号：CobasE601；德国)同批次测定各组血清IL-6、IL-6R、MCL1，以及骨代谢标志物N-MID、PINP、β-CTX水平，分析血清IL-6、IL-6R、MCL1水平与MM临床分期的相关性。以上试剂均为仪器配套试剂盒，操作步骤严格依照说明书进行。

2 结 果

2.1各组血清IL-6、IL-6R、MCL1的表达水平 MM组患者血清IL-6、IL-6R、MCL1水平均明显高于对照组(P<0.05)，其中Ⅲ期组明显高于Ⅱ期组(P<0.05)，Ⅱ期组明显高于Ⅰ期组(P<0.05)。见表1。

表1 各组血清IL-6、IL-6R、MCL1的表达水平

注：与对照组相比，aP<0.05；与Ⅰ期组相比，bP<0.05；与Ⅱ期相比，cP<0.05

2.2各组血清N-MID、PINP、β-CTX的表达水平 MM组患者血清N-MID、PINP水平明显低于对照组(P<0.05)，其中Ⅲ期组明显低于Ⅱ期组(P<0.05)，Ⅱ期组明显低于Ⅰ期组(P<0.05)。MM组患者血清β-CTX明显高于对照组(P<0.05)，其中Ⅲ期组明显高于Ⅱ期组(P<0.05)，Ⅱ期组明显高于Ⅰ期组(P<0.05)。见表2。

表2 各组血清N-MID、PINP、β-CTX的表达水平

注：与对照组相比，aP<0.05；与Ⅰ期组相比，bP<0.05；与Ⅱ期相比，cP<0.05

2.3MM组血清IL-6、IL-6R、MCL1水平与临床分期的相关性 经Spearman相关分析，MM患者血清IL-6水平与临床分期呈正相关(r=0.68，P<0.05)；IL-6R水平与临床分期呈正相关(r=0.56，P<0.05)；MCL1水平与临床分期呈正相关(r=0.72，P<0.05)。

3 讨 论

3.1MM与骨损伤 MM细胞的存活依赖于一定的骨髓微环境，二者相互作用可激活破骨细胞活化因子、成骨细胞抑制因子引起骨细胞代谢失衡[6]，导致溶骨性骨质破坏，进而影响MM患者的生存质量及预后[7]。血清中骨代谢标志物如N-MID、PINP、β-CTX可用来评价骨质损伤及其预后[5]。本研究结果表明，MM组患者血清N-MID、PINP水平明显低于对照组(P<0.05)，N-MID、PINP水平与MM临床分期有关，临床分期越晚，N-MID、PINP表达水平越低；MM组患者血清β-CTX水平明显高于对照组(P<0.05)，且β-CTX水平也与MM临床分期有关，临床分期越晚，β-CTX表达水平越高。此结果与欧阳清等[5]的研究结果一致。

3.2IL-6、IL-6R与MM 成熟的IL-6由184个氨基酸组成，相对分子质量为26×103，其编码基因位于7号染色体。IL-6分子中4个半胱氨酸残基形成两对二硫键，这对IL-6的生物学活性极为重要。IL-6是一种具有多种生物学功能的细胞因子，参与调节如T淋巴细胞、B淋巴细胞、造血干细胞、破骨及成骨细胞等的增殖与分化。细胞表面的IL-6R以异二聚体形式存在，由相对分子质量为80×103的α链与130×103的β链组成。IL-6的生物活性由其受体IL-6R所介导，IL-6R的α链以低亲和力与IL-6特异性结合，而后IL-6Rα-IL-6复合物以高亲和力与IL-6Rβ结合，形成具有信号转导功能的IL-6-IL-6R复合物[8]。在MM疾病进程中，IL-6可由MM细胞、破骨细胞、成骨细胞、骨髓基质细胞等以自分泌或旁分泌形式产生，从而促进细胞增殖并阻碍细胞凋亡[2]；IL-6可刺激骨髓瘤细胞异常分泌免疫球蛋白，引起机体免疫紊乱及免疫病理损伤；血清IL-6水平升高可使肿瘤负荷增大，并加重MM患者病情。IL-6可在MM细胞中持续产生，以抵抗化疗药物诱导细胞凋亡[9]。本研究结果表明，MM组患者血清IL-6、IL-6R水平均明显高于对照组(P<0.05)，IL-6、IL-6R水平与MM临床分期有关，临床分期越晚，IL-6、IL-6R表达水平越高，此结果与崔为发等[10]的研究结果一致。

3.3MCL1与MM MCL1是一种抗凋亡蛋白，属于BCL-2家族成员，该蛋白由350个氨基酸组成，其编码基因位于染色体1q21。MCL1基因可在多种组织中正常表达，对维持细胞的分化、成熟等具有重要意义。MCL1主要通过抗凋亡、阻断自杀信号通路等途径在肿瘤方面发挥癌基因作用[11]；MCL可在多种恶性肿瘤中高表达，与肿瘤的分化程度及预后有密切关系[12-13]；下调MCL1水平则可促进肿瘤细胞的凋亡。本研究结果表明，MM组患者血清MCL1水平明显高于对照组(P<0.05)，MCL1水平与MM临床分期有关，临床分期越晚，MCL1表达水平越高。

综上所述，MM患者血清IL-6、IL-6R、MCL1均有高表达，并与MM临床分期呈正相关，可用于评价MM患者骨损伤及预后。

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