非小细胞肺癌患者血清中肝细胞生长因子水平检测与EGFR基因突变的关系

王秀丽 展翼翼 周欣

摘要目的：探讨非小细胞肺癌患者血清中肝细胞生长因子水平检测与EGFR基因突变的关系。方法：收治ⅢB～Ⅳ期非小细胞肺癌患者69例，检测血清中肝细胞生长因子（HGF）水平，分析血清HGF水平与EGFR基因突变的关系。结果：69例非小细胞肺癌患者中检出EGFR野生型和耐药突变（20-T790M）32例（46.4%）；EGFR基因敏感突变型35例（50.7%），其中Exon-19 Del 16例，Exon-21 L858R 19例；未知类型2例；EGFR基因敏感突变组在给予一线分子靶向治疗后，出现耐药14例，耐药后血浆HGF水平[（989.4±11.5）pg/m Ll较治疗前[（421.1±11.7）pg/mL]明显升高（P<0.05）。结论：血清肝细胞生长因子在一定程度上可以预测EGFR基因突变情况，进而可以预测非小细胞肺癌患者EGFR-TKI耐药情况。

关键词非小细胞肺癌；肝细胞生长因子；EGFR；基因突变

在临床工作中，我们发现经过1年酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗后大部分表皮生长因子受体（EGFR）敏感突变的非小细胞肺癌（NSCLC）患者都产生了获得性耐药，其耐药机制尚不完全明确。基础研究表明肝细胞生长因子（HGF）信号通路的异常激活在耐药过程中产生重要影响。本研究通过检测晚期NSCLC患者TKI治疗前后血清中HGF的含量以及EGFR基因突变情况，探讨NSCLC患者血清HGF与EGFR基因突变之间的关系，现将结果报告如下。

资料与方法

2015年4月-2016年10月收治ⅢB～Ⅳ期NSCLC患者69例，男36例，女33例；年龄34～85岁，平均（58.3±4.9）岁；临床分期：ⅢB期15例，Ⅳ期54例；病理类型：腺癌52例，鳞癌15例，未确定2例。纳入标准：①经病理或细胞学证实为NSCLC；②均为初治患者；③患者及家属知情同意，愿意配合本次研究。排除标准：①有EGFR-TKI治疗禁忌证；②合并严重感染或其他重要器官疾患；③预期生存时间<3个月。

方法：①EGFR基因检测：所有纳入对象均进行EGFR基因突变检测，根据基因检测结果分为EGFR基因敏感突变型（19-Del、21-L858R）与EGFR野生型。EGFR基因敏感突变（19-Del、21-L858R]患者确诊后给予EGFR-TKI药物治疗。EGFR基因检测方法：采用实时荧光PCR及多重PCR-STR方法检测，主要检测突变点18、19、20和21号外显子。②HGF的测定：抽取患者清晨空腹血5 mL，分离血浆，置于20%冰箱保存。采用ELISA方法测定血浆中HGF含量，EGFR基因敏感突变患者出现耐药后再次测定其血清HGF水平。

观察指标：记录患者EGFR基因突变情况以及血清HGF水平。

统计学方法：应用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，计量资料用（x±s）形式表示，采用t检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

结果

EGFR突变状态：69例NSCLC癌患者中检出EGFR野生型32例（46.4%）；EGFR基因敏感突变型35例（50.7%），其中Exon-19 De]16例，Exon-21 L858R 19例；未知类型2例。纳入患者一般资料，见表1。

EGFR基因突变型、野生型与血清HGF水平的比较：与野生型相比，EGFR敏感突变型血清HGF水平明显低于野生型（P<0.05）；亚组分析，男性、鳞癌、吸烟、EGFR野生型肿瘤患者的HGF水平较高，而女性、腺癌、不吸烟、EGFR敏感突变型血清HGF水平较低，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

TKI耐药前后患者血清HGF水平的比较：EGFR基因敏感突变患者在给予一线分子靶向治疗后，至2017年3月，出现疾病进展14例，在疾病进展后，二线治疗前，再次抽取患者血清，检测HGF水平，对比14例患者靶向治疗前与出现耐药后的血清HGF水平，耐药后血清HGF水平（989.4±11.5）pg/mL较治疗前血浆HGF水平（421.1±11.7）pg/mL明显升高（P<0.05），见表3。

讨论

我国肺癌病死率较高，临床工作中我们常用EGFR-TKI治疗晚期NSCLC，已取得良好的远近期疗效，能明显提高患者的生活质量。然而EGFR-TKI可存在严重的原发和继发耐药问题，严重影响药物的长期使用。在众多EGFR-TKI耐藥机制中，HGF/上皮间质转化因子（MET）信号通路的异常激活在原发性耐药和继发性耐药中都发挥了重要作用。肝细胞生长因子受体（HGFR）是一种酪氨酸激酶受体，与HGF结合后通过触发HGFR二聚化，进而启动下游信号通路，从而影响细胞的增殖、运动等功能。HGF/MET信号通路异常激活包括HGF和HGFR过表达、MET扩增和突变。其中发生率最高的是HGF和HGFR过表达。

本研究结果显示NSCLC患者69例中检出EGFR野生型32例（46.4%）；EGFR基因敏感突变型35例（50.7%），其中Exon-19 Del 16例，Exon-21 L858R 19例；未知类型2例；与野生型相比，EGFR敏感突变患者血清HGF水平明显低于野生型（P<0.05）。由此可见，EGFR野生型患者血清HGF水平明显高于EGFR突变者，这支持不同EGFR基因状态患者应用吉非替尼后所表现的不同结果。

EGFR基因敏感突变患者在给予一线分子靶向治疗后，出现耐药14例，耐药后血清HGF水平较治疗前明显升高（P<0.05），说明患者血清HGF水平是促进EGFR-TKI药物耐药的重要因素。

耐药现象对于癌症患者疗效以及生存期产生重要影响，克服耐药是临床医师研究的热点，针对不同耐药机制联合靶向治疗可在保证药物疗效的同时，避免耐药的发生。本研究证实了HGF可通过多种途径干扰耐药的发生，针对HGF的多个靶向药物与EGFR-TKI药物联用，或许可以延长患者的生存期，但仍需进行大量研究证实。