人工胃液中药用炭片对尿毒清颗粒的吸附作用研究

崔 彦 ，王伟英 ，马玉蓉 ，叶利明

(1.重庆市第五人民医院药剂科，重庆 400061； 2.四川大学华西药学院，四川 成都 610041)

经肠道吸附毒素是慢性肾功能不全患者非透析治疗阶段的常用方法。药用炭片用于治疗慢性肾脏疾病已有20年，具有不溶于水、不为消化液或细菌所分解的特点，可从肠道吸附尿素、肌酐等尿毒症毒素，并从肠道排出，使患者的血尿素氮、血清肌酐水平下降，以延缓肾功能的进行性恶化[1-5]。肾功能不全患者常需要合并使用很多药物，有些药物可被药用炭片吸附[6-7]，但目前未见药用炭片吸附相关药物及吸附率的研究报道。本研究中采用体外吸附的方法[8-11]，利用药物溶出度仪模拟人体内环境进行药用炭片对尿毒清颗粒在人工胃液中的体外吸附试验，以探讨体外吸附的程度，指导临床合理用药，减少药物资源浪费。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

1100型高效液相色谱仪(Agilent Technologies Inc.，USA)；紫外可见光检测器（ultraviolet-visible detector）；RCZ-8B型溶出实验仪（天津天大天发科技有限公司）。

1.2 试药

芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号为MUST-17031901）；药用炭片（河北长天药业有限公司，批号为48161120，规格为每片3 g）；尿毒清颗粒（康臣药业＜内蒙古＞有限责任公司，批号为20161264，规格为每袋5 g）；流动相配制用溶剂均为色谱纯，其他溶剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 芍药苷含量测定

2.1.1 色谱条件[12-15]与系统适用性试验

色谱柱：Kromasil(Akzo Nobel Inc.，Sweden)C18柱(250 mm × 4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈 -0.05 mol／L磷酸二氢钾溶液(15∶85)；检测波长：230 nm；柱温：35℃。理论板数按芍药苷峰计算不低于3 000。在此色谱条件下，芍药苷峰与其他相邻色谱峰可达到有效分离，分离度大于1.5。色谱图见图1。

2.1.2 溶液制备

取80℃干燥至恒重的芍药苷对照品9.52 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得对照品溶液(每1 mL含芍药苷0.038 mg)。

取稀盐酸（取盐酸234 mL，加水稀释至1 000 mL，即得）16.4 mL，加水约800 mL与胃蛋白酶 10 g，摇匀，加水稀释成1 000 mL，即得人工胃液。

采用药物溶出度仪模拟人体内环境，参照2015年版《中国药典（四部）》通则0900特性检测法项下溶出度与释放度测定法中第三法（小杯法）[16]测定，溶出介质200 mL（人工胃液），恒温控制在(37.0 ± 0.5)℃，转速100 r／min，将6片药用炭片和1袋尿毒清颗粒同时投入同一溶出杯（规格为250 mL）中，同时将尿毒清颗粒单独投入盛有相同体积人工胃液的另一溶出杯中，分别在 0.5，1.0，2.0 h 取一定量溶出液用微孔滤膜过滤，弃去初滤液，取续滤液（自取样至滤过在30 s内完成，所量取溶出介质的体积之和如超过总体积的1%时，补充等体积等温度的溶出介质），即得供试品溶液。

取按处方除白芍外的其他药材和辅料制作的制剂，按供试品溶液制备方法处理，即得阴性对照品溶液。

2.1.3 方法学考察

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专属性试验：分别吸取一定体积的对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液进样测定。结果表明，阴性对照品溶液中其他成分对样品的测定无干扰。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：将2.1.2项下制得的芍药苷对照品母液，依次稀释 2，4，6，8，10 倍，分别进样，记录峰面积。以芍药苷质量浓度为横坐标、以峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得标准曲线回归方程 Y=1 460 X-2.114，R2=0.997(n=6)。结果表明，芍药苷质量浓度在 19.04 ～190.4 μg／mL范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液 20 μL，按拟订色谱条件连续进样6次，记录峰面积。结果的 RSD为1.42%（n=6），表明仪器精密度良好。

重复性试验：按2.1.2项下供试品溶液，将尿毒清颗粒单独投入盛有人工胃液的溶出杯中，平行操作6次，精密吸取每个溶出杯中的供试品溶液，依法前处理后，按拟订色谱条件进样20 μL，分别记录峰面积。结果的RSD为2.68%（n=6），表明方法重复性良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，于室温下自然放置，分别于 0，1，2，4，8，12，24 h 时精密吸取 20 μL，按拟订色谱条件进样测定。结果的 RSD为2.54%（n=6），表明供试品溶液室温条件下放置24 h内稳定性良好。

加样回收试验：精密量取2.1.2项下供试品溶液共6份，分成3组，每组按高、中、低质量浓度分别精密加入对照品贮备液，定量稀释至刻度，进样测定，计算加样回收率。结果见表1。

表1 芍药苷加样回收试验结果(n=9)

2.2 吸附率测定

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，按拟订色谱条件于 0.5，1.0，2.0 h 时测定每个溶出杯中芍药苷的峰面积，计算吸附率。结果见表2。吸附率（%）=（1-吸附后溶液药物峰面积／未吸附溶液药物峰面积）×100%。

表2 人工胃液中药用炭片对尿毒清颗粒芍药苷的吸附率(n=5)

3 讨论

药用炭片具有发达的孔隙结构和巨大的比表面积，临床用于治疗慢性肾脏疾病，可从肠道吸附尿素、肌酐等有毒物质，并从肠道排出体外，可降低患者的血尿素氮、血清肌酐水平，可代替肾脏的解毒功能，保护健存的肾单位，并延长透析间期，减少透析次数。

肾功能不全患者常常需要合并使用多种药物，尿毒清颗粒是常见的合并用药。本研究中利用药物溶出度仪模拟人体内环境，用人工胃液作介质以模拟胃部环境，考察药用炭片对尿毒清颗粒的吸附作用，结果显示，将药用炭片和尿毒清颗粒投入同一溶出杯中后，随着时间的推移，药用炭片对尿毒清颗粒中有效成分芍药苷的吸附率逐渐增高，2.0 h后吸附率已达92.62%。由于人体胃排空的速度为0.5～2.0 h，为了减少药用炭片对尿毒清颗粒的吸附，建议二者至少间隔2.0 h以上服用。

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