肉鸡Ⅰ群禽腺病毒与坏死性肠炎混感的病例诊断

姬万民

（瑞普（天津）生物科技股份有限公司 300308）

2018年2月，河北省正定县某规模化鸡场地面平养方式饲养的8500只肉鸡30日龄出现死亡情况，患病肉鸡开始表现为零星死亡，随后死亡增加，日死亡率达2%，病鸡表现精神沉郁，食欲不振，鸡冠苍白，排黄绿色或暗黑色稀便为主要症状。采用双黄连口服液和环丙沙星、泰乐菌素和复方新诺明等药物进行治疗，治疗效果不佳。该畜主将患鸡带到本处就诊，病料无菌采集后送公司诊断实验室进行检测。根据该鸡群的发病情况、临床症状、病理解剖变化并结合PCR分子生物学诊断，诊断确定为FAdV-Ⅰ与坏死性肠炎混合感染，现报告如下：

1 临床症状

鸡群突然发生疾病，临床表现为精神沉郁，缩头，采食饲料减少，喝水量增多，羽毛杂乱无光泽，鸡冠及肉锤呈现发白情况，卧地，不愿走动，排黄绿色或暗黑色，灰色粪便，一些粪便混合血液或未消化的饲料。病程较长会产生神经症状，颤抖，站立不稳，瘫痪，触诊检查时表现出尖叫现象。

2 病理变化

患病蛋鸡心包积液严重，心包中可见到大量的淡黄色的清亮液体，肝脏肿大，出血，质地脆弱易破裂，表面凹凸不平，坏死灶和出血交替出现，呈现黄黑相间（见图1左）。肾脏肿大、苍白，有尿酸盐沉积（见图1右），小肠扩张，大小不均增大至正常的2～3倍。肠腔切开，肠表面变黄，肠腔内充满气体和血液，肠黏膜充血坏死，黏膜附着黄色或绿色假膜。部分肠黏膜增生，肠壁增厚充血，浆液表面有大量针尖大小出血点和灰白色小米粒大小坏死点，肠道中充满了黑色和红色的内容。

图1 病鸡的眼观病变

3 实验室检验

3.1 病毒的检测及测序分析

无菌采集病死鸡的肝脏和心包积液，分别进行组织总DNA和总RNA的提取。以其为模板，分别进行FAdV-Ⅰ的常规PCR和RT-PCR扩增，本次试验病料样品与心包积液PCR扩增产物与预期扩增产物片段大小相符，试验扩增产物的条带处于508bp，基因测序结果与GenBank中的序列比对，通过DNAStar软件进行同源性分析，结果显示，分离株与I群禽腺病毒序列同源性为96.5%，表明被检病料样品中含有I群禽腺病毒。

3.2 细菌药物敏感性试验

细菌药物敏感性试验采用常规试纸法进行。结果表明，该菌对新霉素和氟苯尼考具有高度敏感性，对杆菌肽药物中度敏感，对罗红霉素、氧氟沙星和复方新诺明表现出耐药性。

图3 PCR扩增结果

M：DL1 000 DNA Marker；1：组织样品；2：心包积液；3：阳性对照；4：阴性对照

4 治疗措施

发病鸡立即隔离，按照无害化的要求对病死鸡迅速处理、焚烧及深埋，环境使用生石灰消毒。

紧急注射Ⅰ群禽腺病毒卵黄抗体，同时根据抗生素敏感性试验结果，对发病鸡全群上午使用氟苯尼考（立本康）饮水（剂量为每1L水中加75mg），并在饲料中添加电解多维和维生素K3，连用 3～5d。

做好鸡舍及周边环境的生物安全，及时清理屋内的家禽粪水，对养殖设备（如水箱、食槽等）进行清洗消毒，同时做好鸡群的消毒。

经采取上述措施后，至第3d病鸡精神转好，采食量增加，死亡明显减少，至第5d死亡基本停止，1周后痊愈。

5 讨论

I群禽腺病毒主要引起鸡包涵体肝炎、心包积水综合征的特异性病原体，其主要病变特征为心包中有淡黄色水样或胶脉样的积液，心脏松弛、柔软。肝脏呈现淡褐色和黄色，质地变脆，出现充血、肿胀，伴有局灶性坏死点和出血点。根据鸡群的临床症状及分子生物学诊断结果，确诊该鸡群为FAdV-Ⅰ与坏死性肠炎混合感染。

I群禽腺病毒一种条件致病性病毒，广泛存在于家禽的呼吸道和消化道，其发病往往伴随着其他不良因素，如通风不良、饲料霉菌毒素超标；或者其他疾病如IBD、CIAV、H9N2、NDV的发生。因此，在饲养过程中要注重家禽饲养管理，提高机体免疫功能，同时加强禽舍中的环境卫生，加强通风，合理消毒，并做好IBD、CIAV等疾病的免疫工作，减少心包积液综合征。在治疗过程中，使用卵黄抗体，并结合保肝护肾的药物进行治疗，减少家禽的死亡，降低养殖经济损失。