邵军民,高志学,王瑞龙
(宝鸡公路动物防疫监督检查站,陕西宝鸡721312)
黄芪多糖(Astragaluspolysaccharin,APS)是黄芪的主要活性成分,具有促进生长发育、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗氧化、调节免疫等生物学功能,是理想动物饲料添加剂与免疫增强剂[1]。鸡新城疫(Newcast l e di sease,ND)是由鸡新城疫病毒(Newcast l e di sease vi rus,ND)引起的一种烈性传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须通报的动物传染病,我国将其列为一类动物疫病,给我国养禽业造成了巨大的经济损失[2]。本研究探讨黄芪多糖对肉仔鸡新城疫疫苗免疫效果的影响,以期为黄芪多糖的产业化应用奠定基础。
1.1 黄芪多糖、疫苗、肉鸡黄芪多糖购自桐庐新天地生物科技有限公司;新城疫活疫苗购自山东省滨州沃华生物工程有限公司;AA白羽肉仔鸡由宝鸡市坪头养鸡场提供。
1.2 试验分组将60只7日龄AA白羽肉仔鸡随机分为2组(对照组、试验组),每组30只鸡,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.1%黄芪多糖,试验开始前对照组和试验组的试验肉仔鸡均以滴鼻的免疫方式免疫新城疫弱毒活疫苗1头份,试验期为35d,试验期间对照组和试验组的日常饲养管理均一致,自由采食与饮水。
1.3 血清样品的采集与处理分别在疫苗免疫前、疫苗免疫后 7d、14d、21d、28d、35d于翅静脉处对试验肉鸡采集血液1.0mL,将采集的1.0mL血液全部打入1.5mL离心管中,将离心管置于37℃温箱中倾斜45°放置1h,随后将离心管置于4℃冰箱中放置2h,以5000 rpm离心10min,上清液即为待检测的血清样品。
1.4 1%鸡红细胞悬液的制备选取3只SPF成年公鸡,在一次性注射器中加入0.2mL肝素后于公鸡的翅静脉处各采集血液2.0mL,将采集3只公鸡血液混合后全部打入15mL离心管中,将离心管以2000rpm离心10min,弃去上清液,利用灭菌生理盐水洗涤沉淀3次,洗涤后的沉淀即为鸡红细胞。在99mL灭菌生理盐水中加入1mL鸡红细胞,即得1%鸡红细胞悬液。
1.5 抗体效价的测定利用常规血凝抑制试验方法分别测定疫苗免疫前、疫苗免疫后 7d、14d、21d、28d、35d 采集血清样品的新城疫抗体效价。
1.6 数据分析试验数据采用SPSS 13.0统计学软件进行进行单因素方差分析和多重比较,结果用“平均值±标准差”表示。
如表1所示,随着免疫后时间的延长试验组和对照组的新城疫抗体效价均逐步提高,均在疫苗免疫后28d达到峰值。试验组和对照组相比较,在新城疫疫苗免疫前和疫苗免疫后的7d新城疫抗体效价差异均不显著 (P>0.05);在疫苗免疫后的14d、21d、28d、35d,新城疫抗体效价均显著提高(P<0.05)。表明肉仔鸡饲料中添加0.1%黄芪多糖对肉仔鸡新城疫疫苗的免疫效果具有良好的增强作用。
表1 黄芪多糖对新城疫疫苗免疫效果的影响 log2
抗体是介导动物机体体液免疫的重要组成成分,抗体效价的高低可直接反映动物机体的体液免疫状态,检测疫苗免疫后的血清抗体效价可简单、直观、有效的检测疫苗的免疫效果,故本研究通过测定血清抗体效价来评价新城疫疫苗的免疫效果。黄芪多糖能够显著改善动物机体的免疫功能,但黄芪多糖对鸡群免疫功能的影响与鸡的品种、机体状态以及黄芪多糖的纯度和添加剂量等均密切相关。孙波等[3]研究表明乌鸡基础日粮中添加500mg/kg和1000mg/kg黄芪多糖均能够提高乌蒙乌鸡的免疫功能。本研究结果表明肉仔鸡基础饲粮中添加0.1%的黄芪多糖可提高新城疫疫苗的免疫效果,与孙波等[3]的研究结果表现出了高度的一致性。说明饲料中添加黄芪多糖可以显著提高鸡群的免疫功能和疫苗的免疫效果,黄芪多糖可作为免疫增强剂在禽饲料中广泛应用。