鸡毒支原体活疫苗对肉鸡生产性能的影响

王文道，王选增，马 迪

（山东省蓬莱市大辛店畜牧兽医站，山东 蓬莱 265612）

1 鸡毒支原体概述

1.1 鸡毒支原体（MG）的病原学特征

鸡毒支原体（MG），其大小为250～500nm，能通过450nm的细菌滤器，形态不一，呈高度多形性，常见的有球状、丝状，还有杆状、环状、螺旋状等不规则形态。姬姆萨染色着色良好，革兰氏染色阴性，着色较淡。MG可吸附于鸡、火鸡和仓鼠等动物的红细胞，这是与非致病性禽源支原体的主要区别。MG为需氧或兼性厌氧菌；在人工培养时对营养要求较高，需要在培养基中加入10%～15%的灭活猪或马血清、胰酶水解物和酵母浸出物才能生长。在固体培养基上，需置潮湿的环境中培养3～10d才能形成表面光泽透明、边缘整齐、露滴样的小菌落，且菌落为“煎蛋样”，菌落很小，最大不超过1mm，肉眼不可见，光学显微镜下可清楚观察到菌落形态。

MG对理化因素的抵抗力不强，对紫外线敏感，阳光直射便迅速丧失活力，一般常用的化学消毒剂均能迅速将其杀死；50℃约20min即可将其灭活，在沸水中立刻死亡。液体培养物在4℃保存不超过1个月，在-30℃中可保存1～2年。MG对链霉素、四环素族、氯霉素、红霉素、泰乐菌素敏感，但也易产生耐药性。

1.2 临床症状与剖检变化

MG单独感染时临床症状较轻，感染鸡偶有夜间咳嗽，不影响鸡的食欲和精神状态。但是MG极易和其他病原混合感染，症状明显:病鸡咳嗽、流鼻涕、流泪、呼吸时发出湿锣音，死亡率高。

1.3 诊 断

血清学方法是临床诊断MG感染应用最普遍的方法，血清学试验呈阳性者，结合临床症状就可以在MG分离和鉴定之前作出初步诊断。用于检测MG的血清学试验很多，但都不同程度的缺乏特异性和敏感性。分子生物学方法也常用于MG的感染。

1.3.1 病原体的分离和鉴定

分离病原体适用的培养基有人工培养基 (FM24培养基和PPLO培养基)、鸡胚、组织培养物(鸡肾细胞培养物和鸡气管培养物)。病料为可疑感染鸡的气管或气囊的渗出液、肺的悬浮液或鼻窦的渗出液，均可选择上述培养基进行分离培养，同时还需结合血清学方法来确定。此法工作量大，耗费时间长，不适合于生产上的快速诊断和监测。

1.3.2 血清学方法

生产上多用血清学方法结合病史和临床症状来诊断MG感染。常用的血清学方法有血清平板凝集试验(SPA)、血凝抑制试验(HI)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和斑点酶联免疫吸附试验(Dot2ELISA)等，该方法可用于检测卵和血清中的MG抗体，也有人利用该方法检测MG抗原。

1.3.3 分子生物学方法

主要包括核酸探针和PCR方法，敏感性和特异性均较血清学方法高，并且可用于MG和MS的鉴别诊断。

1.4 疫苗预防

国内使用的活疫苗为MG康涅狄克F株疫苗，F株是由Carpenter等(1981)命名并用于疫苗生产的，其致病力极弱，给1、3、20日龄的雏鸡滴眼接种，不会引起任何可见的症状和气囊病变，不影响增重。它比野毒株致病性低，可经点眼、喷雾或饮水途径免疫，以点眼法最为安全。中国兽医药品监察所用弱毒株F-36制成的活疫苗免疫接种鸡，不影响鸡体增重，不引起气囊损伤，接种鸡不表现任何临床症状。

活苗研究中，美国将F株、TS11株及6/85株制成疫苗应用，TS11株及6/85株为MG温度敏感变异株，6/85疫苗株为冻干制品，通过喷雾法接种后，可在呼吸道存在几周，须注意的是6/85株引起的免疫应答几乎检测不到，TS11株引起的抗体应答也很弱。因此，通过血清学方法无法检测到6/85株的免疫效果。

根据市场调查，TS-11株（澳大利亚生物资源公司生产）说明书的用法与用量：用于蛋鸡和种鸡点眼接种，每只0.03mL。推荐在3～6周龄时进行接种。MG6/85株（英特威美国分公司生产）商品名：迈可威，说明书的用法与用量：用水稀释后喷雾接种6周龄以上的鸡每只1羽份。由于肉鸡饲养周期一般为38～42日龄，以上两种疫苗不适合肉鸡免疫。

目前，在蓬莱市部分肉鸡场鸡毒支原体感染率较高，为有效控制该病，进行实验研究，主要研究7日龄肉鸡点眼1羽份和1.5羽份的鸡毒支原体活疫苗（F-36株）后，通过与空白组做对照试验，观察各组肉鸡的成活率、日增重以及料重比的变化，进行统计分析，为有效控制鸡毒支原体感染肉鸡提供理论基础和依据。

2 材料与方法

2.1 实验疫苗

鸡毒支原体活疫苗（F-36株），福州大北农生物技术有限公司；

鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(LaSota株+H120株)，瑞普（保定）生物药业有限公司（商品名：新支妥）；

鸡传染性法氏囊病活疫苗（B87株），瑞普（保定）生物药业有限公司（商品名：法必妥）；

鸡新城疫活疫苗(LaSota株)，齐鲁动物保健品有限公司；全程蓬莱福润牧业有限公司饲料厂全价颗粒饲料。

2.2 实验动物、地点

爱拔益加白羽肉鸡2万只，购自山东民和牧业股份有限责任公司；

实验场所为蓬莱市某肉鸡养殖场。

2.3 实验设计

将爱拔益加白羽肉鸡2万只，随机分布在2栋鸡舍中，每栋鸡舍饲养1万只，第一栋鸡舍中随机选取一个位置，饲养300只鸡，隔离分组，每组饲养100只。第二栋鸡舍同第一栋鸡舍分组，做重复试验。

第一栋鸡舍分别为试验1组、试验2组和对照1组，第二栋鸡舍分别为试验3组、试验4组和对照2组；试验1组和试验3组在7日龄点眼1羽份鸡毒支原体活疫苗（F-36株），试验2组和试验4组在7日龄点眼1.5羽份鸡毒支原体活疫苗（F-36株），对照1组和对照2组，不做鸡毒支原体活疫苗免疫，各组肉鸡均在同一条件下进行饲养。

实验于2017年3月1日～4月9日进行，为期40d。

2.4 免疫程序

表1 免疫程序

2.5 测定记录与统计分析

出栏时记录出栏数，计算成活率；1日龄和出栏时，测定每组试验鸡只的初始重量、出栏重量，计算日增重；记录饲料用量，计算料重比。

采用Excell软件对原始数据进行处理，利用SPSS13.0统计软件进行显著性检验。

3 结果与分析

试验1组和试验3组平均值为第一组，试验2组和试验4组平均值为第2组，对照1组和对照2组平均值为对照组。

3.1 对肉鸡成活率的影响

表2 各组肉鸡成活率

从表2看出：第一组、第二组成活率高于对照组，差异显著（p＜0.05）；第一组和第二组之间成活率差异不显著（p＞0.05）。

图1 各组肉鸡成活率结果柱状图

实验过程中每天记录死亡的只数，40日龄计算每组的死亡个数，用总数200减去死亡个数，除以200得出每组成活率。

3.2 对肉鸡日增重的影响

表3 各组肉鸡日增重

从表3看出：第1组、第2组日增重高于对照组，差异显著（p＜0.05）；第1组和第2组之间日增重差异不显著（p＞0.05）。

图2 各组肉鸡日增重结果柱状图

实验过程中记录1日龄平均体重和出栏时的平均体重，计算40日龄每天的日增重。

3.3 对肉鸡料重比的影响

表4 各组肉鸡的料重比

图3 各组肉鸡的料重比柱状图

料重比（F/G）:记录各组实验期内的饲料总消耗量与鸡只总重量，两者之比。

4 小结与讨论

通过实验，可以看出，爱拔益加白羽肉鸡在使用鸡毒支原体活疫苗（F-36株）1羽份和1.5羽份后，第1组和第2组成活率、日增重显著高于对照组（p＜0.05）；第1组和第2组料重比显著低于对照组（p＜0.05），表明免疫疫苗效果确切；免疫接种量1羽份和1.5羽份，组间差异不显著（p＞0.05）。

（1）免疫效果确切，免疫能增强机体抵抗力，提高成活率；

（2）鸡群在健康未发病的情况下，日增重明显；

（3）免疫后，饲料转化率提高，料重比低，经济效益显著。

5 结论

5.1为有效控制鸡毒支原体感染肉鸡，对肉鸡进行鸡毒支原体活疫苗（F-36株）免疫试验，通过对结果统计分析表明，鸡毒支原体活疫苗接种剂量1羽份，即可有效抵抗野毒的攻击，增强免疫力，有效降低鸡毒支原体感染带来的风险。

5.2鸡毒支原体活疫苗（F-36株）在我市的免疫应用表明，肉鸡成活率、日增重明显提高，料重比明显降低，为提升肉鸡的生产性能提供了技术支撑。

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