TP-ELISA、TPPA和TRUST三种方法联合检测梅毒的回顾性分析

杨剑，王小明，黄永建

(萍乡市人民医院检验科，江西 萍乡 337055)

梅毒是由梅毒螺旋体感染人体后引起的传播疾病，具有高传染性[1]，主要通过性接触、母婴和输血的方式进行传播，可致全身各组织和器官产生慢性系统性病变，临床表现不一，病程较长。近年来我国梅毒的发病率呈逐年上升趋势[2]，因此临床上对梅毒的准确诊断和有效治疗显得尤为重要。目前，临床实验室检测梅毒的血清学试验主要为两类：一类是非特异性试验，包括RPR和TRUST；另一类是特异性试验，包括ELISA、CLIA、TPPA、TPHA及免疫印迹试验等。本实验室采用TPELISA进行梅毒筛查检测，TPPA加以确认，TURST进行辅助诊断和疗效观察[3-7]。现将此套梅毒检测流程检测出的结果进行回顾性分析，报告如下。

1 材料与方法

1．1 标本来源 本院2016年7月至2017年6月住院和门诊病人TP-ELISA筛检后(弱)阳性血清标本1156例。

1．2 主要仪器和试剂 Anthos-2010酶标仪；BioTek ELX50洗板机；WZR-H5000数显混匀器；TP-ELISA试剂由北京万泰生物药业有限公司和上海科华生物有限公司提供；TPPA试剂由日本富士瑞必欧株式会社提供；TRUST试剂由上海荣盛生物技术有限公司。

1．3 方法 采用真空采血管取肘静脉血5ml，离心后的血清标本分别用北京万泰TP-ELISA试剂（ELISA1）进行筛查检测梅毒抗体，阳性或弱阳性结果均采用TPPA和TRUST方法同时进行检测。另外，弱阳性结果还用上海科华TP-ELISA(ELISA2)试剂进行复查。所有检测均按照SOP文件和使用说明书操作。

1．4 统计学方法 分别统计各方法的阳性结果和阳性符合率，比较分析采用 χ2检验，P＜0．05为差异有统计学差异。

2 结果

2．1 ELISA1、ELISA2、TPPA 和 TRUST 法 检测结 果在ELISA1检测为阳性或弱阳性的1156例标本中，S/CO值≥4的874例，即阳性结果；S/CO值1～3．99的282例，即弱阳性结果。三种试剂同时测定为阳性的标本1103例，其中874例S/CO值≥4的均为阳性。而 282例 S/CO值 1～3．99的标本采用ELISA2进行复查，同为阳性的为247例，35例为阴性结果；采用TPPA法确认阳性的标本为239例。1156例标本均进行TRUST检测，阳性数为541。见表1。

2．2 ELISA1检测弱阳性标本与TPPA阳性符合率结果祥 见表2。

表1 3种试剂检测1156份梅毒标本的阳性结果（n）

表2 ELISA检测弱阳性标本与TPPA阳性符合情况

3 讨论

人体感染梅毒螺旋体后数周血清中可产生抗梅毒螺旋体抗体（特异性抗体）和具有抗类脂抗体性质的反应素（非特异性抗体）。梅毒螺旋体特异性抗体出现较早于非特异性抗体1周左右，大约2～4周出现IgM抗体，4～6周出现IgG抗体，可终生存在体内，即便治疗有效后仍可存在。

我们发现，用TP-ELISA2试剂复查TP-ELISA1试剂检测出的弱阳性标本中，有35例标本检测为阴性结果，这说明ELISA法存在假阳性，且试剂1的抗体检出率高于试剂2，这在有的文献中也有过报道[8]。而TP-ELISA试验阳性结果的874例标本中TRUST试验阳性的仅335例，说明TRUST敏感性较低。由于TRUST在梅毒感染最初4周，机体未产生一定的反应素供检测出来，一般为阴性，4周后阳性率逐渐升高，6至8周可达100%，晚期梅毒和治疗后反应素下降，且治愈3至6月逐渐消失，因此其滴度检测可作为疗效观察[9]。

从表1和表2中可见，TP-ELISA检测出S/CO值≥4的结果与TPPA达到非常好的吻合，几乎100%，当然这还需要更多量的标本来进一步验证。而对于TP-ELISA检测判断为弱阳性的标本，与TPPA 符合率为 84．75%，与魏方[5]等报道的 88．7%相近。随着S/CO值的降低，两者的符合率越低，在处于 1～1．99 值内的符合率仅 20．83%。 因此，TPELISA阳性的结果需TPPA进一步进行确证，而且弱阳性结果要进行追踪复查以免误诊，避免给患者及家人造成一定的心理压力和经济负担。

TP-ELISA和TPPA试验是针对抗梅毒螺旋体抗体的试验，有较高的特异性和敏感性[10-12]。TPPA是目前国内常用的梅毒螺旋体确认试验之一[10，11]，但由于操作较复杂，结果判断具有主观性，不便于自动化，因此不适合用于大批量的标本检测。而TP-ELISA法操作简单，易自动化，被大多数医院用于梅毒筛查检测，但是可出现一定的假阳性的结果，原因很多，主要存在老年人、妊娠和肿瘤患者，这与此类人群体内存在异嗜性抗体密切相关[13]。因此对于TP-ELISA阳性结果的标本需要TPPA进一步确证。

综上所述，本实验室采用TP-ELISA（北京万泰）法进行大规模的梅毒筛查检测，弱阳性结果采用另一厂家（上海科华）试剂复查，同时进行TPPA和TRUST检测，几种方法所得结果综合分析，对于仍为弱阳性的病例进行追踪观察，在临床上有很好的使用价值。这一套检测流程和报告体系可以极大可能地降低梅毒的误诊和漏诊，且整套检测不需要贵重的仪器，在基层医院更为值得推广。当然，临床医师还需结合病人临床上的病史及体征进行梅毒诊断，尽量减少医疗纠纷的产生。

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