老年急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤治疗患者β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排及其临床意义

梁月雄 崔翠萍 林 璐 黄鹏程 林 薇 李 冰

广东省肇庆市第一人民医院，广东肇庆 526100

急性淋巴细胞白血病为临床常见白血病，其发生于老年患者可因老年人群机体功能减退等而进一步加重治疗困难，预后情况更差[1-2]。改善老年急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤化疗预后十分重要。β2微球蛋白（β2-MG）、免疫球蛋白重链（IgH）重排均与白血病密切相关，而细胞周期蛋白B2（CyclinB2）则被证实与多种癌症性疾病相关[3]。本研究检测了老年急性淋巴细胞白血病患者外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率，分析了其与患者大剂量甲氨蝶呤治疗生存预后的关系及其联合预测大剂量甲氨蝶呤治疗患者生存预后的价值，现报道如下。

表1 随访1年期间存活和死亡患者治疗前β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排比较

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年1月～2015年12月我院收治的老年急性淋巴细胞白血病患者36例为研究对象，急性淋巴细胞白血病，均为初治患者，患者年龄均高于60岁，性别不限。患者均符合纳入标准，且无患者排除，男20例，女16例，年龄61～79岁，平均（68.4±8.2）岁，WHO2008标准分型为 B-ALL患者28例，T-ALL患者8例，均对试验签署知情同意书，符合伦理学标准。

1.2 方法

患者均采用大剂量甲氨蝶呤（山西普德药业股份有限公司，H14022462，剂型：注射剂，规格：5mg）治疗，用量为 3g/（m2·d）。在甲氨蝶呤用药后12h行7.5%甲氨蝶呤剂量的甲酰四氢叶酸[CF，注射用亚叶酸钠，武汉人福药业有限责任公司，H20090013 ，剂型：注射剂，规格：0.1g(以亚叶酸计)]解救，CF解救分至少6次进行，每次之间间隔时间为6h，至血清甲氨蝶呤水平＜0.1μmol/L时停止CF解救。

1.3 观察指标和检测方法

在治疗前取患者空腹静脉血8mL置于EDTA抗凝管中常规冷藏待测。采用放射免疫法检测β2-MG水平[4]。采用实时定量RT-PCR法检测其治疗前的外周血CyclinB2[5]。采用半巢式PCR方法检测外周血IgH基因重排[6]。统计其随访1年生存率。

1.4 统计学方法

采用SPSS19.0软件，计量资料均符合正态分布并采用两独立样本均数t检验进行组间比较，计数资料比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患者随访1年生存预后情况分析

36例患者随访1年存活患者29例，死亡患者7例，1年生存率为80.56%（29/36），患者1年生存率较低，预后情况差，急需改善 。

2.2 随访1年期间存活和死亡患者治疗前β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排比较

比较随访1年期间存活患者和死亡患者治疗前β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排阳性率，死亡患者β2-MG、CyclinB2水平均明显高于存活患者，且死亡患者IgH基因重排阳性率100%也明显高于存活患者的48.28%，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.3 老年急性淋巴细胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率与其1年生存率的关系分析

Spearman相关性分析结果显示，老年急性淋巴细胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率与其1年生存率均呈负相关（r= -0.844，-0.818，-0.852，P ＜ 0.05）。

2.4 老年急性淋巴细胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率预测其1年生存预后的价值分析

老年急性淋巴细胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平预测其1年生存预后的价值良好，诊断性试验四格表分析结果显示，老年急性淋巴细胞白血病IgH基因重排率预测其1年生存预后的价值良好，其中个以三者联合预测患者1年生存预后的价值最优。见表2。

3 讨论

本研究结果提示，老年急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤治疗患者随访1年的生存率仅约8成，其随访1年生存率较低，患者预后情况较差，亟待改善。因此，改善老年急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤治疗预后是目前急需解决的医疗难题。与其他癌症性疾病一致，急性淋巴细胞白血病的发生发展亦涉及多个因子。CyclinB2仅在部分肿瘤细胞中表达，已成为肿瘤细胞的标志[7-12]。因此，CyclinB2亦可能与老年急性淋巴细胞白血病相关。β2-MG亦是肿瘤标志物，肿瘤细胞可合成β2-MG[13-14]。因此β2-MG亦可能与老年急性淋巴细胞白血病相关。IgH重排更是淋巴细胞克隆性增生的特异性标准，与淋巴细胞来源恶性肿瘤密切相关[15-16]。因此，IgH重排亦可能与白血病密切相关。

表2 老年急性淋巴细胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率预测其1年生存预后的价值

本研究结果显示，老年急性淋巴细胞白血病患者外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率均较高，提示β2-MG、CyclinB2和IgH基因重排可能与老年急性淋巴细胞白血病的发生相关。而本研究中老年急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤治疗后死亡患者治疗前外周血CyclinB2和β2-MG水平以及IgH基因重排阳性率均较高，提示其外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率可能与生存相关。进一步Spearman相关性分析结果显示，老年急性淋巴细胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率与其1年生存率均呈负相关，其外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率可反映其随访1年不良预后风险，可能用于其预后情况评估。进一步研究证实，老年急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤治疗患者治疗前外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率预测其1年生存预后的价值良好，其中以三者联合预测患者1年生存预后的价值最优，对老年急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤治疗患者治疗前外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率的检测可能早期预知其不良预后风险，对于外周血β2-MG、CyclinB2水平分别高于2213ng/mL、1582以及IgH基因重排阳性患者需尽早进行干预，以期改善预后情况。

综上所述，老年急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤治疗患者β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排联合预测患者预后价值良好，可能用于其早期预后评估干预，从而指导临床改善预后情况。

[1] 王业生，孙玲，焦雪丽，等.改良VDLP方案在老年急性淋巴细胞白血病中的应用研究[J].中华老年医学杂志，2016，35（9）：975-977.

[2] 张闰，刘娟，葛峥，等.老年人急性淋巴细胞白血病临床和实验室特征研究[J].中华老年医学杂志，2013，32（4）：426-429.

[3] 王淑梅，孙路路，杨平，等.大剂量甲氨蝶呤注射剂化疗导致急性淋巴细胞白血病患儿肝功能异常的危险因素分析[J].中国临床药理学杂志，2016，32（21）：2012-2014.

[4] 王建功，胡万宁，王晓红，等.Wnt5a、CyclinB2在甲状腺肿瘤组织及血清中的表达及临床意义[J].河北医科大学学报，2012，33（11）：1268-1270.

[5] 钱瑛，陈国千.中枢神经系统白血病患者脑脊液胱抑素C、β2-微球蛋白及乳酸脱氢酶水平观察[J].国际检验医学杂志，2014，35（4）：412-413.

[6] 郑苗苗，岳丽杰，陈小文，等.急性淋巴细胞白血病患儿MTHFR基因多态性与大剂量甲氨蝶呤毒副反应的关系 [J].中国当代儿科杂志，2013，15（3）：201-206.

[7] 王婧，黄晓军，江滨，等.55岁以上中老年急性淋巴细胞白血病患者的临床特征与疗效分析[J].北京大学学报（医学版），2013，45（6）：938-944.

[8] 龙潺，唐雪元，郑方英，等.miRNA－19b 在急性淋巴细胞白血病发病中的作用机制[J].中国老年学杂志，2016，36（19）：4724-4726.

[9] 梅艳，汪洋，宋新文，等.儿童急性淋巴细胞白血病化疗中甲氨蝶呤血药浓度监测结果分析[J].中国临床药理学杂志，2012，28（8）：566-568.

[10] 王淑梅，孙路路，杨平，等.大剂量甲氨蝶呤注射剂化疗导致急性淋巴细胞白血病患儿白细胞减少的危险因素分析 [J].中国临床药理学杂志，2016，32（20）：1905-1907.

[11] 王建功，胡万宁.PPN/MG61、CyclinB2在甲状腺肿瘤组织及外周血中的表达[J].山东医药，2009，49（16）：76-77.

[12] 顾敏，李爽，郝良纯，等.大剂量甲氨蝶呤治疗儿童急性淋巴细胞白血病的血药浓度及影响因素分析[J].中国医科大学学报，2013，42（6）：566-569.

[13] 谭必然 .血清与脑脊液 β2-MG、SDF-1、IGF-1及MBP与急性淋巴细胞白血病的相关性研究[J].临床和实验医学杂志，2014，13（14）：1148-1150.

[14] 张传新，胡国敏，贾国存，等.中枢神经系统白血病患儿脑脊液β2-M G、IL-2、IL-6水平测定[J].郑州大学学报（医学版），2013，48（4）：568-569.

[15] 田佳懿，刘俊丽，王淑梅，等.大剂量甲氨蝶呤注射剂化疗导致急性淋巴细胞白血病患儿贫血的相关因素分析[J].中国临床药理学杂志，2016，32（20）：1908-1910.

[16] 王淑梅，孙路路，曾蔚欣，等.CYP2 C19基因多态性与急性淋巴细胞白血病易感性及甲氨蝶呤血清浓度的关系 [J].中国临床药理学杂志，2014，30（7）：577-580.