敦煌遗方“神仙粥”抗衰老作用的研究*

丁高恒，殷晓春，慕婷婷，孟军亮，裴凌云，刘永琦，蔺光遥，吴建军甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000

敦煌遗书共约5万卷，载有1 100余首中医方剂，主要包括内、外、妇、儿、五官、口腔、皮肤等临床各科方剂，以及食疗方剂与特色鲜明的佛教道教方剂、疗服石方剂、藏医方剂和美容美发方剂等。在诸多方剂之中，有不少抗衰老方剂有着重要的医学文献史料价值与较高的医学研究及临床应用价值。其中敦煌遗书《呼吸静功妙诀》文后所附的养生“神仙粥”就具有明显的抗衰老作用［1-3］。《神仙粥》食方：山药蒸熟，去皮一斤。鸡头实半斤，煮熟去壳捣为末，粳米半升。慢火煮成粥，空心食之。或韭子末二三两在内，尤妙。食粥后，用好热酒、饮三杯妙。此粥，善补虚劳，益气强志，壮元阳、止泄精神妙。本研究对敦煌遗方“神仙粥”的抗衰老作用进行了研究，为今后的应用开发提供实验依据，使敦煌遗方在抵抗衰老方面作出积极的贡献。

1 材料与方法

1.1 实验动物 2016年9月13日于兰州市兽医研究所购买48只SPF级SD大鼠(动物实验许可证号：SYXK(甘)2012-0001)，2月龄，雌雄各半，平均体质量(150±30)g，实验室室温控制在(22±3)℃，相对湿度45%～55%，自然光照，实验室每天用消毒液消毒。

1.2 药物 1)D-半乳糖(武汉富驰生物科技有限公司，批号：F20160422)。2)神仙粥(按神仙粥原方中质量比，山药∶鸡头实∶粳米∶韭子末 =20∶10∶15∶6 进行配制，经查阅文献，对于神仙粥，人的给药剂量为2.25 g/kg，人的转移因子为35，大鼠的转移因子为6，故大鼠的给药剂量=人的给药剂量×人的转移因子/大鼠的转移因子=2.25×35/6(g·kg-1)计算后为 13(g·kg-1)，然后再根据SD大鼠的具体体质量换算给药)。3)吡拉西坦(陕西白鹿制药股份有限公司，批号：20151010，规格0.2/粒，成人剂量为4～8粒/次，3次/d，用蒸馏水配制成0.09%的水溶液)。

1.3 试剂 1)SOD试剂盒，规格48 T，货号：A001-3。2)MDA测试盒，规格50 T/48样，货号：A003-1。均购于南京建成生物工程研究所。

1.4 动物造模 从购置的48只雌雄各半的SPF级SD大鼠中随机抽出8只作为空白组，其余大鼠皮下注射D-半乳糖［125 mg/(kg·d)］制作衰老模型，每 3天测量1次体质量，根据其体质量的变化，及时调整给药剂量)，空白组则注射与之等剂量的0.9%生理盐水，连续造模30天后，经水迷宫实验检测造模是否成功。

1.5 动物分组 将40只衰老模型大鼠按体质量从轻到重依次编号为1～40，利用SPSS 20.0统计软件，激活随机数字发生器，设定随机种子为当天日期(20161021)，调用 RV.Uniform(0，1)函数生成0～1之间的随机数，接着再对所生成的随机数进行个案排秩，从小到大排序为1～40号，最后将排秩结果编码为不同变量，规定排秩编号1～8者所对应的患者纳入模型组，排秩编号9～16者所对应的患者纳入阳性对照组，排秩编号17～23者所对应的患者纳入神仙粥高剂量组，排秩编号24～31者所对应的患者纳入神仙粥中剂量组，排秩编号32～40者所对应的患者纳入神仙粥低剂量组，每组各8只，雌雄各半。各组受试对象体质量、鼠龄、性别等基本情况差异无统计学意义(P＜0.05)，具有可比性。

1.6 动物给药 连续造模30天后经水迷宫实验检测造模成功后，进行给药干预实验。其中神仙粥高、中、低剂量组分别按24、12、6 mg/kg的神仙粥灌胃给药，空白组和模型组给予与之等剂量的蒸馏水，阳性对照组皮下注射吡拉西坦0.4 g/kg，1次/d，持续30天。

1.7 检测指标与方法 1)器官水平研究。脾脏指数和胸腺指数测定：给药30天后，经水迷宫实验检测造模成功，各组大鼠禁食12小时，称重后脱颈椎处死，摘取大鼠脾脏和胸腺，用生理盐水洗净，然后再用滤纸吸干并称其质量，计算脾脏指数和胸腺指数。2)免疫水平研究。SOD、MDA测定：给药30天后，经水迷宫实验检测造模成功，各组大鼠禁食12小时，称重后脱颈椎处死，心脏采血，使用酶标仪测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量，具体实施步骤按照试剂盒说明操作。

1.8 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件进行数据处理，服从正态分布的计量资料用(s)表示，组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 器官水平研究 胸腺指数和脾脏指数模型组与其余5组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)，其中模型组胸腺指数和脾脏指数最低，其余各组间比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 各组胸腺指数、脾脏指数比较(s)

表1 各组胸腺指数、脾脏指数比较(s)

注：a表示与模型组比较，P＜0.05

组别 只数 胸腺指数 脾脏指数空白组 8 0.1619±0.0169a 0.2545±0.0234a模型组 8 0.1289±0.234 0.2147±0.0233阳性对照组 8 0.1587±0.222a 0.2413±0.0244a神仙粥高剂量组 8 0.1545±0.0178a 0.2455±0.0155a神仙粥中剂量组 8 0.1499±0.0177a 0.2379±0.0197a神仙粥低剂量组 8 0.1510±0.0186a 0.2474±0.0159a F 2.844 3.513 P 0.027 0.01

2.2 免疫水平研究 SOD活性及MDA含量模型组与空白组、阳性对照组、神仙粥高剂量组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)，且其中模型组SOD活性最低、MDA含量最高，其余各组间比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。表2。

表2 各组大鼠超SOD活性与MDA含量比较(s)

表2 各组大鼠超SOD活性与MDA含量比较(s)

注：a表示与模型组比较，P＜0.05

组别 只数 SOD/(μ·mgprot-1) MDA/(nmol·mgprot-1)空白组 8 229.64±57.74a 8.80±1.34a模型组 8 158.53±47.72 15.56±4.94阳性对照组 8 220.49±58.05a 10.56±3.62a神仙粥高剂量组 8 216.15±72.51a 11.48±5.06a神仙粥中剂量组 8 177.66±22.31 12.62±4.59神仙粥低剂量组 8 171.42±47.10 12.47±2.57 F 2.537 2.672 P 0.043 0.035

3 讨论

衰老是一个复杂的多环节生物学过程，是生物界普遍存在的一种自然现象，是一切多细胞生物随着时间的推移而表现出的各个细胞和器官功能的不可逆的、全面的、逐渐丧失的过程。衰老虽不可逆转，但可以缓解。当今世界人口老龄化问题日趋严重，我国老龄化问题尤为严峻。面对衰老带来的诸多社会、生活问题，开展老年医学及老年生物学方面的研究，探讨延缓衰老的方法，已成为当前医学界的研究热点之一。

SOD是生物机体内最有效的氧自由基清除系统，维持生物体内自由基的正常水平，从而保护组织免受超氧自由基的损害，但随着生物体逐渐衰老，SOD活性也随之降低，抗氧化能力同样有所下降，不能有效清除自由基，导致膜脂质发生过氧化损伤，继而生成大量MDA，使得生物体进一步受到损害。因此，清除自由基，降低生物机体内过氧化脂质的含量对延缓衰老具有重大作用。本研究采用敦煌遗方“神仙粥”对衰老模型大鼠进行干预，结果表明神仙粥能提高胸腺指数、脾脏指数及SOD活性，降低MDA含量。从而减轻氧化应激，清楚自由基，提高大鼠抗自由基、抗氧化的能力，抑制了神经元凋亡，起到抗衰老作用［4-6］。

本研究通过对敦煌遗方“神仙粥”抗衰老作用的研究，以期为后续抗衰老保健饮品的研发提供实验依据，从远期效益而言，则可改善机体各器官组织的衰老现象，从而达到延缓衰老的效果。此外，若将敦煌遗方进行更加深入研究开发，应用于日常膳食中，即提升了中药遗方的经济价值，同时对解决目前老龄化严重的问题具有较好的推广应用前景。

综上所述，敦煌遗方“神仙粥”在抗衰老方面效果显著，而且神仙粥有别于其他抗衰老药物经济、方便，值得推广和使用。

［1］孟景春.敦煌祛风散“神仙粥”［J］.验方推荐，2013，5(3):52-53.

［2］朱海林，张吉林，张晓红，等.敦煌神仙粥合针刺治疗肾阳虚型腰痛66例临床疗效观察［J］.中国中医药科技，2012，19(5):447-448.

［3］李应存，李金田，史正刚.敦煌佛书P.3777《五辛文书》中之修身养生方录释［J］.甘肃中医，2007(7):28-29.

［4］谭真.敦煌占药方《神仙粥)》分析［J］.敦煌研究，199l，11(2):95-98．

［5］马继兴.敦煌古医籍考释［M］.南昌:江西科技出版社，1988:25．

［6］薛清录.中国中医古籍总目［M］.上海:上海辞书出版社，2007：139.