一起水貂巴氏杆菌病的诊治报告

孙鑫鹏王文佳董馨李梦莹许立华（宁夏大学农学院宁夏银川750021）



一起水貂巴氏杆菌病的诊治报告

孙鑫鹏 王文佳 董馨 李梦莹 许立华*（宁夏大学农学院 宁夏 银川 750021）

2017年8月初，山东威海某水貂养殖场水貂发生死亡，剖检病死水貂并进行细菌分离、鉴定，确诊为巴氏杆菌感染。经药敏试验筛选、使用敏感药物，结合消毒等措施，有效控制病情。现将诊治结果报告如下。

1 发病情况

山东威海某水貂养殖场养殖丹麦红眼白貂1200只，其中皮用貂900只、种用貂300只。2017年8月初貂群发病，3 d内共死亡30只，其中种用貂死亡21只，皮用貂死亡9只，给养殖场造成较大的经济损失。

2 临床症状

病貂精神不振，呼吸急迫，未见明显症状便已死亡。

3 剖检变化

就诊当日，剖检6只病死貂，其病变大致相同，主要表现为肺淤血，切开有大量泡沫液体；心肌发绀，冠状血管充血、有点状出血点；肝脏肿大、充血，表面可见针尖大小灰白色坏死点；脾脏肿大，呈暗红色等。

4 实验室诊断

4.1 细菌分离和鉴定 取病变明显的脏器触片后染色镜检，均能见大量革兰氏阴性两端钝圆小杆菌。取病死貂肝、肺，接种绵羊鲜血琼脂(100ml/L)，37℃培养18~24h后观察。在血液琼脂平板上，形成灰白色、湿润、不溶血的露珠状菌落。

4.2 生化试验 对分离菌进行生化试验，结果表明本菌发酵葡萄糖、蔗糖，不能发酵阿拉伯糖、鼠李糖、乳糖；不水解明胶；氧化酶、吲哚试验为阳性。上述试验结果与巴氏杆菌的生化反应结果基本一致[1]。

4.3 分子生物学诊断 提取细菌基因组DNA，参照文献报道的方法合成一对用于扩增细菌16S rRNA基因序列的通用引物[2]，上游引物：5′-AGAGTTTGATCATGGCTC AG-3′；下游引物：5′-ACGGTTACCTTGTTACGACTT-3′。以基因组DNA为模板进行PCR反应，扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳，在1000~2000bp之间出现目的条带。将PCR产物送交宝生物工程(大连)有限公司测序，利用NCBI的BLAST工具将测序结果进行同源性比对，结果显示扩增序列与多杀性巴氏杆菌(GenBank序列号CP 020405.1)16S rRNA的基因序列同源性为100%，因此可确定分离菌株为多杀性巴氏杆菌。

4.4 致病性试验 将分离菌接种于脑心浸液中于37℃培养18~24h。选取10只健康体重相近的ICR小白鼠，5只腹腔注射菌液0.25ml菌液(2.48×108CFU/ml)，5只腹腔注射等量无菌脑心浸液。小鼠攻毒后连续观察7d。结果攻毒小鼠在36h内全部死亡，并能从死亡小鼠体内分离到巴氏杆菌。对照小鼠全部健活。

附图 PCR 扩增分离菌16S rRNA基因结果

M. DNA标准DL2000; 1. 分离菌；2，阴性对照

5 药敏试验

选择14种药敏纸片(购自杭州滨和微生物试剂有限公司)对分离菌进行药敏试验。结果显示该株分离菌对头孢他啶、头孢哌酮、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、头孢曲松、哌拉西林、氨芐西林、头孢噻肟高度敏感；对强力霉素、阿米卡星、新霉素中度敏感；对左氧氟沙星、氧氟沙星耐药。

6 治疗措施

对发病貂群用头孢他啶25mg/kg拌料口服，用15%石灰乳消毒过道、粪便等，甲醛熏蒸貂舍，笼具、食槽等用癸甲溴铵消毒并于太阳下暴晒。2d以后没有死亡出现，5d以后全群好转，随访5周，未再出现新的病例，说明该病得以控制。

7 讨论

调查期间发现该养殖场所用饲料均新鲜无霉变且未经细菌污染，同时貂舍通风、卫生良好，故而排除因饲料、应激等因素而导致貂群发病。本次发病主要发生在种用貂，皮用貂发病较少。深入调查发现该养殖场曾发病前1周购进一批种貂，只隔离3d便进行混群，推测可能是由于外购种貂携带巴氏杆菌而导致此次巴氏杆菌病的暴发。因此，建议养殖场外购种畜时一定要进行隔离观察，确认不携带病原微生物在进行混群。此外，在貂群发病时，该养殖场一直采取左氧氟沙星拌料口服进行治疗，但效果不佳。故而当暴发细菌性疾病时，应当结合药敏试验，选择敏感药物进行治疗，及早控制病情，降低损失。

[1] 李一经. 兽医微生物学[M]. 北京: 高等教育出版社, 2011: 170.

[2] 陈香碧, 苏以荣, 何寻阳等. 喀斯特原生土壤与退化生态系统土壤细菌群落结构[J]. 应用生态学报, 2009, 20(4): 863-871.

（2017–10–06）

S858.92

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1007-1733(2018)02-0043-01